【正文】 ICR類化合物。造成局部 DNA分子無法配對，引起死亡或突變。此菌株在某些性能上比原種有所提高。 卡介苗法： 牛型結核分枝桿菌 牛膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基 移種 230代 得終選菌株 從生產(chǎn)中選種 特點 三、誘變育種 誘變育種： 誘變育種是利用物理、化學等誘變因素處理微生物群體，誘發(fā)基因發(fā)生突變，然后根據(jù)育種目標，從無定向的突變株中，篩選出我們所需要的菌種。 誘變處理 (1)、誘變劑的選擇 誘變劑： 能引起生物 產(chǎn)生高于自發(fā)突變頻率 突變的外界因素，稱為 誘變劑。如亞硝酸、硫酸二乙酯等； ② 與 DNA中堿基十分接近的類似物，摻入到 DNA分子中。 b處理后的菌懸液增殖培養(yǎng)期間，可用黑紙包住盛有處理菌液的玻璃器皿 。 轉(zhuǎn)化因子 ： 起轉(zhuǎn)化作用的 供體細胞 DNA片段 稱為轉(zhuǎn)化因子 。 相關因素 ：菌種類、培養(yǎng)時間、特異蛋白 (DNA結合蛋白、胞壁自溶素、核酸酶 )。 轉(zhuǎn)導子 ：由轉(zhuǎn)導而獲得部分新性狀的重組細胞。 特點 ： 1) 能轉(zhuǎn)導供體菌的個別特定基因（一般為噬菌體整合位點兩側的基因）； 2) 特定基因由部分缺陷的溫和噬菌體攜帶； 3) 缺陷噬菌體是由于其在形成過程中所發(fā)生的低頻率（可形成 105左右） “ 誤切 ” ，或由于雙重溶源菌的裂解而形成。 過程： LFT裂解物 gal 高 感染 λ dgal λ 雙重溶源菌 Uv λ dgal +λ 等量 低 感染 gal gal+ gal 等量 (四 )、溶源轉(zhuǎn)變 溶源轉(zhuǎn)變 ：當正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時，因噬菌體基因整合到宿主的核基因上，而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象。 放線菌 ：鏈霉菌屬、諾卡氏菌屬 (三 )、 F+菌株 ● 定義 ：指細胞內(nèi)存在一至幾個 F質(zhì)粒，并在細胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。 ● 初生與次生 F/ 菌株 ● 細菌染色體繪圖原理 四種接合型菌株的關系 四、原生質(zhì)體融合 定義： 通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩個細胞的原生質(zhì)體進行融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程。 (二 )、有性雜交方法 甲乙親本菌株 產(chǎn)子囊孢子 離心 (雙倍體 ) (單倍體 ) 涂平板 接產(chǎn)孢子培養(yǎng)基 洗下并破壁 雜交得雙倍體雜種 鑒別并選良種 二、準性雜交 (一 )、定義 ● 準性生殖 ： 在同種不同菌株的體細胞間發(fā)生的融合，它可借減數(shù)分裂而導致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。 (二 )、保藏方法 斜面培養(yǎng) 定期移植保藏法 液體培養(yǎng) 穿刺培養(yǎng) 特點 ：此法一般可保藏 3~6個月左右。適用于所有菌種。土壤法不洗，風干后粉碎過 24目篩滅菌。 (三 )、保藏機構 國內(nèi)：中國微生物菌種保藏委員會（ CCCCM） 中國培養(yǎng)物保藏中心（ CCTCC） 國外：美國典型培養(yǎng)物保藏中心（ ATCC） 荷蘭霉菌中心保藏所（ CBS） 英國國家典型菌種保藏所（ NCTC） 日本大板發(fā)酵研究所（ IFO） 。 冷凍干燥保藏法 ● 方法 ：將用滅菌牛奶做成的高濃度的菌液裝入滅菌的安瓿瓶中，放在低溫條件下抽氣干燥，使其中的水分因升華作用逸出，而形成完全干燥的菌塊，然后將安瓿瓶在真空條件下融封。裝入小試管、加塞滅菌后，滴入幾滴菌種 (或孢子 )懸液，用接種針攪勻。 液體石蠟法 ● 方法 ： 將無菌石蠟油加入到上述保藏的菌種中，使菌種與空氣隔絕。 (二 )、衰退的表現(xiàn) 菌落和細胞形態(tài)改變 生產(chǎn)性能的下降 對生長環(huán)境的適應能力減弱 (三 )、菌種退化的原因 1．有關基因的自發(fā)突變 2．育種后未經(jīng)很好的分離純化及染雜菌 3．培養(yǎng)基成分的變化及培養(yǎng)條件的改變 保藏條件的變化 (四 )、退化的防治 控制傳代次數(shù) 創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 選擇優(yōu)良的菌株或孢子保藏及傳代 采用有效的保藏方法 (包括保藏方式及保藏培養(yǎng)基 ) 經(jīng)常進行分離純化 二、菌種的復壯 菌落純：酵母、細菌 純種分離法 細胞純：所有菌，如霉菌可進行菌絲尖端分離 通過宿主體復壯 ：用于病毒 淘汰已衰退的個體 利用生產(chǎn)菌株的遺傳標記 三、菌種的保藏 (一 )、目的及原理 ● 目的：不死、不衰、純粹及便于交換使用。 ● 有性雜交：指不同遺傳型的兩性細胞間發(fā)生的接合和隨之進行的染色體重組，繼而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術。 ● 可與之接合菌株 ： F+菌株 F 雄性菌株 Hfr菌株 ● 定義 ： F質(zhì)粒從游離態(tài)轉(zhuǎn)變成核染色體組特定位點上的整合態(tài)的菌株。 接合子 ：接合后獲得的具有新遺傳性狀的受體細胞。 低頻轉(zhuǎn)導 以低的 少量局限轉(zhuǎn)導子 合成生物 素基因 發(fā)酵半乳 糖基因 噬菌體基因 過程 高頻轉(zhuǎn)導 高頻轉(zhuǎn)導 ：在局限轉(zhuǎn)導中，若對雙重溶源菌進行誘導，會產(chǎn)生50%左右局限轉(zhuǎn)導噬菌體的高頻轉(zhuǎn)導裂解物，用此裂解物去轉(zhuǎn)導受體菌，可獲得 50%左右的轉(zhuǎn)導子，故名。 完全普遍轉(zhuǎn)導 過程 由 P22噬菌體引起的完全普遍轉(zhuǎn)導 感染復數(shù)小于 1 流產(chǎn)普遍轉(zhuǎn)導 定義 ：經(jīng)轉(zhuǎn)導噬菌體的媒介而獲得了供體菌DNA片段的受體菌，如這段外源 DNA在其內(nèi)既 不進行交換、整合和復制 ，也不迅速消失，而僅表現(xiàn)為 穩(wěn)定的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯和性狀表達 。 (二 )、轉(zhuǎn)化過程 轉(zhuǎn)化頻率： %~1%， 最高為 20%。 G：細胞僅吸收 dsDNA，進入后需酶解為 轉(zhuǎn)化因子進入 ssDNA可整合 細胞方式 G+： 僅 ssDNA可進入細胞。 在攪拌下 無可見光有紅光 突變株的篩選 (1)、產(chǎn)量突變株