植物組織培養(yǎng)第四章胚胎培養(yǎng)和離體授粉(文件)
【正文】 子房培養(yǎng) 一、胚珠培養(yǎng) 將胚珠從母株中分離出來，放在無菌的人工環(huán)境條件下，讓其進(jìn)一步生長發(fā)育，以致形成幼苗的過程。附加天然有機(jī)物和氨基酸。 撥開幼花，子房接種到培養(yǎng)基上。 三種方式 ： 離體柱頭授粉（授于離體雌蕊的位置） 離體子房授粉 離體胚珠授粉 一般都在 試管內(nèi) 完成的。又稱 子房內(nèi)授粉 。 注射法： 用 100mg/L硼酸將花粉粒配制成懸浮液，每滴含 100300個花粉粒。 （三）離體胚珠授粉 定義： 離體培養(yǎng)未受精的胚珠，并在胚珠上授粉，最終在試管內(nèi)結(jié)出正常種子的技術(shù)。 三、影響離體授粉受精的因素 （一）外植體 柱頭和花柱的影響 胎座的影響（子房或胚珠上帶有胎座，有利于離體受精的成功） 外植體的生理狀態(tài)（開花后 1~2d剝離的胚珠比當(dāng)天剝離的胚珠結(jié)實(shí)率高） （二）培養(yǎng)基（ Nitsch,white,MS等） CaCl 培養(yǎng)基中蔗糖濃度一般為 4%~5%、常用的 有機(jī)附加物 （三）培養(yǎng)條件 一般在黑暗或光照較弱的條件下培養(yǎng)，溫度 2025℃ 思考： 解釋胚胎培養(yǎng)概念 說明成熟胚與幼胚對培養(yǎng)基成分的不同要求 什么是胚乳培養(yǎng)？其培養(yǎng)的溫度要求一般在多少范圍？ 胚乳培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基種類是哪些？ 簡述子房發(fā)育成植株的染色體情況 胚珠培養(yǎng)和子房培養(yǎng)有何應(yīng)用？ 。 將帶有完整胎座或部分胎座的胚珠接種在培養(yǎng)基上，并撒播花粉進(jìn)行受精。 2） 離體子房內(nèi)授粉： 指用無菌花粉對離體培養(yǎng)的子房進(jìn)行授粉，使其發(fā)育為成熟種子的技術(shù)。 ①步驟： 確定供試植物的開花和花藥開裂時間； 對母本花蕾去雄并套袋； 采集父本花粉； 將花粉引入子房。 方法 :在花藥尚未開裂時切取母本花蕾，消毒后，在無菌條件下用鑷子剝?nèi)セò旰托廴?，保留萼片，將整個雌蕊接種在培養(yǎng)基上，當(dāng)天或第二天在其柱頭上授以無菌的父本花粉。 N6， MS， BN， Nitsch培養(yǎng)基 （二）培養(yǎng)子房的發(fā)育 子房性細(xì)胞 —— 愈傷組織或胚狀體 —— 單倍體植株 子房體細(xì)胞 —— 愈傷組織或胚狀體 —— 二倍體植株 三、胚珠和子房培養(yǎng)的應(yīng)用 胚珠 受精胚珠培養(yǎng)目的 —— 打破種子的休眠 挽救胚的發(fā)育以獲得雜交種 未受精胚珠培養(yǎng)目的 —— 獲得單倍體細(xì)胞發(fā)育而來 的植株 子房 授粉子房培養(yǎng)目的 —— 挽救子房內(nèi)雜種胚的發(fā)育 未授粉子房培養(yǎng)目的 —— 獲得單倍體植株 試管受精解決雜交育種中不 親和問題。 根據(jù)培養(yǎng)的子房是否授粉分
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