【正文】 菌株，該菌株發(fā)酵活力及耐高溫等技術(shù)性能達(dá)到國(guó)際 領(lǐng)先 水平，在我國(guó)首次開(kāi)發(fā)了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的基因重組 纖維素酶 工程菌株，并將首次利用自主開(kāi)發(fā)的酶制劑工程菌株進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。 項(xiàng)目承擔(dān)單位吉林市科大實(shí)用技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司是以酶制劑為主導(dǎo)產(chǎn)品的 生物工程 高新技術(shù)企業(yè)，公司與中國(guó)科技大學(xué)、江南大學(xué)、吉林大學(xué)生命科學(xué)院酶工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、 Fisher實(shí)驗(yàn)室、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程 實(shí)驗(yàn)室等大學(xué)和科研院所形成了緊密合作，公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)、工藝技術(shù)團(tuán)隊(duì)由國(guó)內(nèi)一流水平的專(zhuān)家組成；公司管理規(guī)范，規(guī)章制度健全；項(xiàng)目土建、主體設(shè)備制造 、 內(nèi)部裝置 安裝已經(jīng)完成，配套設(shè)備采購(gòu)安裝及 GMP 裝飾正在進(jìn)行，項(xiàng)目建設(shè)資金投入已經(jīng)達(dá)到 5800 萬(wàn)元，占 項(xiàng)目 建設(shè)資金投入總額 %， 申請(qǐng)國(guó)債資金要件齊全，項(xiàng)目承擔(dān)單位具備國(guó)債資金項(xiàng)目實(shí)施條件和能力。生物技術(shù)創(chuàng)新及其產(chǎn)業(yè)化，將為人類(lèi)社會(huì)創(chuàng)造新的、更高水平的文明開(kāi)辟了廣闊的空間。 6 基因重組纖維素酶項(xiàng)目 對(duì)相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的作用與影響 提升 酶制劑行業(yè) 整體水平 由于該項(xiàng)目是我國(guó)酶制劑行業(yè)第一個(gè)采用具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的工程菌株進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的項(xiàng)目，因此，對(duì)提高我國(guó)酶制劑行業(yè)和國(guó)外企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)能力，提升行業(yè)整體水平具有積極意義。 推動(dòng) 農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu) 的 調(diào)整 該項(xiàng)目生產(chǎn)的主要原材料是秸稈，由于原料在產(chǎn)地必須進(jìn)行 初發(fā)酵，因此，在農(nóng)村將產(chǎn)生新的 初 發(fā)酵行業(yè)，同時(shí)，基因重組纖維素酶面市后，在農(nóng)村還將產(chǎn)生以纖維素酶作為催化劑，生產(chǎn)秸稈糖化飼 7 料的發(fā)酵企業(yè)。引進(jìn)生物工程高新技術(shù)企業(yè)， 扶持 地方農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化龍頭項(xiàng)目是吉林市經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重大舉措之一，因此，該項(xiàng)目成為吉林市政府和吉林高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)重點(diǎn)招商引資項(xiàng)目。 市場(chǎng)分析 該項(xiàng)目產(chǎn)品的 主要應(yīng)用領(lǐng)域 為 飼料 、麻棉 紡織 、 制 藥 、 生物發(fā)酵等行業(yè)，該項(xiàng)目產(chǎn)品是上述行業(yè)產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中不可或缺的添加劑。 麻棉紡織行業(yè)： 我國(guó)洗滌復(fù)合酶年用量 2 萬(wàn)噸左右， 其中纖維素酶添加量為 。纖維酶是生產(chǎn)非糧燃料酒精必須使用的催化劑，按每 6噸原料生產(chǎn) 1噸燃料酒精計(jì)算，預(yù)計(jì) 2020 年，秸稈等非糧原料年用量最少 4800 萬(wàn)噸，纖維素酶投料比按每噸原料 3‰計(jì)算，年需求量將達(dá)到 14 萬(wàn)噸左右。 與國(guó)家高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化專(zhuān)項(xiàng)總體思路、原則、目標(biāo)等關(guān)聯(lián)情況 該項(xiàng)目屬于生物技術(shù)類(lèi)，是 國(guó)務(wù)院辦公廳《生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展“十一五”規(guī)劃》（國(guó)辦發(fā) [20xx]23號(hào)）微生物技術(shù)專(zhuān)項(xiàng)重點(diǎn)支持項(xiàng)目；是國(guó)家科技部科技支撐計(jì)劃 “生物技術(shù)產(chǎn)品中試與規(guī)模化生產(chǎn)配套技術(shù)與工藝的研究與示范” 重點(diǎn)支持項(xiàng)目；該項(xiàng)目 20xx 年 已經(jīng)列入吉林省科技發(fā)展計(jì)劃，分別被評(píng)為重大和重 點(diǎn)項(xiàng)目并獲得省長(zhǎng)基金支持；該項(xiàng)目是地方農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化龍頭項(xiàng)目，是國(guó)債資金重點(diǎn)支持的項(xiàng)目。 20xx 年初 已經(jīng)在吉林 農(nóng)業(yè)大學(xué) 完成了中試，中試結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)結(jié)果一致（詳見(jiàn) 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生化實(shí)驗(yàn)室《檢測(cè)報(bào)告》 ）。 公司專(zhuān)家已經(jīng)設(shè)計(jì)了纖維素酶系列產(chǎn)品生產(chǎn)線(xiàn)，主體設(shè)備及內(nèi)部構(gòu)件和管路連接已經(jīng)完成。此外，生產(chǎn)過(guò)程的發(fā)酵條件優(yōu)于實(shí)驗(yàn)室條件，因此，只要中試設(shè)定條件與生產(chǎn)工藝條件一致，那么，所生產(chǎn)出來(lái)的產(chǎn)品性能將優(yōu)于中試。其催化機(jī)理與溶菌酶相似，糖苷配基的脫去涉及 2 個(gè)保守羧基氨基酸分別作為質(zhì)子供體和親核試劑執(zhí)行酸堿催化的雙置換反應(yīng)；谷氨酸位于細(xì)菌和真菌 CBH， EG 及葡萄糖苷酶的活性位點(diǎn)。 12 根據(jù)重組后靶基因的特征可以分為兩種類(lèi)型： ①由于外源序列的引入或部分取代，靶基因原有結(jié)構(gòu)被破壞，此即為基因破壞或剔除； ②靶基因的全部序列為新的基因所取代。 幾乎所有已克隆的纖 維素酶基因都已在大腸桿菌中得到表達(dá)。 技術(shù)研制報(bào)告 纖維素酶屬誘導(dǎo)型酶類(lèi)其多個(gè)酶組分的表達(dá)調(diào)控是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程， 其中 CBH II 具有關(guān)鍵的作用。 Mandel， 1979)，因此要提高木霉的纖維素酶的產(chǎn)酶能力就可以通過(guò)木霉 CBH II 基因克隆，將其構(gòu)建在不受葡萄糖抑制的真核啟動(dòng)子下游如 PKI， cDNA1等啟動(dòng)子，使 CBH II 不再受到培養(yǎng)基中葡萄糖影響而得到高效表達(dá)，從而促進(jìn)其他纖維素酶基因的協(xié)同表達(dá)，較大幅度提高菌株在發(fā)酵過(guò)程中的產(chǎn)纖維素酶的能力。前者常用的如 PyrG 或 Pyr4，后者常用的有HmR， benA，和 amds。 載體 pUT () 中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院基因工程實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建，包含 Ben A 顯性標(biāo)記。 PCR 擴(kuò)增 CBH II 序列 ①根據(jù)已知綠色木霉 cDNA 序列，設(shè)計(jì) PCR引物，由上海生工公司合成； ② PCR 擴(kuò)增：用標(biāo)準(zhǔn) PCR反應(yīng)體系進(jìn)行 PCR反應(yīng)。對(duì)篩選到的重組質(zhì)粒用內(nèi)切酶和 PCR 進(jìn)行鑒定分析，所擴(kuò)增的片段含有完整的 CBH II 序列。 18 技術(shù)的先進(jìn)性 蛋白質(zhì)基因 同源 重組技術(shù)是國(guó)家 863計(jì)劃項(xiàng)目， 863 計(jì)劃項(xiàng)目在技術(shù)上均為國(guó)際領(lǐng)先或先進(jìn)技術(shù)。 諾威信公司的同類(lèi)產(chǎn)品酶活為 2800u／ ml,該 公司 產(chǎn)品 的發(fā)酵液活力可達(dá) 3200u／ ml； 第二、熱穩(wěn)定性。 該重大關(guān)鍵技術(shù)的突破對(duì)行業(yè)技術(shù) 進(jìn)步的重要意義和作用 提高酶制劑行業(yè)整體水平 。 三、項(xiàng)目建設(shè)方案 建設(shè)規(guī)模 根據(jù)吉林市的資源狀況、自然環(huán)境和市場(chǎng)調(diào)查情況，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際 情況、建廠條 件、 資金情況、原輔材料供應(yīng)等各種因素，該項(xiàng)目纖維素酶生產(chǎn)規(guī)模確定為年產(chǎn) 15000 噸。 設(shè)備選型 主要設(shè)備選型 是在研究和初步確定技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，對(duì)所需要的主要設(shè)備、輔助設(shè)備之間的能 力、設(shè)備配套的可靠性、設(shè)備成熟性、保證產(chǎn)品質(zhì)量等諸多因素進(jìn)行比選，最終采用招標(biāo)的形式購(gòu)置。 26 土地利用現(xiàn)狀 項(xiàng)目 征地 ，是當(dāng)?shù)卣?guī)劃的工業(yè)用地。距吉林飛機(jī)場(chǎng) 15 公里，機(jī)場(chǎng)可以起落各類(lèi)大、中型客機(jī)，國(guó)內(nèi)各主要大中城市均有航班。場(chǎng)區(qū)場(chǎng)地土類(lèi)型為中硬，建筑場(chǎng)地類(lèi)型為 II 類(lèi)。 根據(jù)吉林市水利水電勘測(cè)設(shè)計(jì)研究院的報(bào)告，松花江吉林高新技 27 術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)段多年平均流量為 488m3/s，河道平均坡度為 ‰，百年一遇設(shè)計(jì)洪峰流量為 Q=8300m3/s，百年一遇洪水位為 米，最低枯水位為 米，冬季由于豐滿(mǎn)電廠發(fā)電泄流，該江段很少結(jié)冰。全區(qū)年平均氣溫 3℃ 5℃ ，氣溫受地形影響，由西、西北向東、東南氣溫逐漸降低。全區(qū)日照時(shí)數(shù)24002600小時(shí)，全年總輻射量為 1150千卡 /平方毫米 。 機(jī)場(chǎng) 吉林高新區(qū)距長(zhǎng)春龍嘉國(guó)際機(jī)場(chǎng)僅 65 公里，空中客貨運(yùn)極為便利。 吉林高新技術(shù) 產(chǎn)業(yè) 開(kāi)發(fā)區(qū)享有國(guó)家、省、市的各項(xiàng)優(yōu)惠政策和省級(jí)審批權(quán)限。開(kāi)發(fā)區(qū)在用人、分配等方面實(shí)行按需定崗、按崗定酬、按酬聘人的全新的管理機(jī)制。 設(shè)備驗(yàn)收、安裝、調(diào)試及試生產(chǎn) 20xx年 12 月完成設(shè)備安裝及調(diào)試，并進(jìn)行產(chǎn)前準(zhǔn)備及原材料采購(gòu)。在滿(mǎn)足生產(chǎn)工藝同時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)家現(xiàn)行的有關(guān)規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)，并充分考慮與周?chē)ㄖ膮f(xié)調(diào)，力求建成一個(gè)環(huán)境優(yōu)美，又具有時(shí)代特征的新穎的企業(yè)形象。 結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)依據(jù) 基本風(fēng)壓： 基本雪壓： 防震裂度：Ⅶ度 凍結(jié)深度： 其它地質(zhì)詳細(xì)資料等 建設(shè)期管理的基本原則 規(guī)范管理。 四、項(xiàng)目投資 項(xiàng)目總投資估算依據(jù) 《投資項(xiàng)目可行性研究指南》； 國(guó)家計(jì)委《建設(shè)項(xiàng)目經(jīng)濟(jì)評(píng)價(jià)方法與參數(shù)》第二版及第三版； 中國(guó)輕工總會(huì)《輕工業(yè)建設(shè)項(xiàng)目投資估算辦法》及《輕工業(yè)工程設(shè)計(jì)概算編制辦法》； 中國(guó)輕工總會(huì)《建設(shè)項(xiàng)目經(jīng)濟(jì)評(píng)價(jià)方法輕工行業(yè)實(shí)施細(xì)則》； 設(shè)備購(gòu)置費(fèi)依據(jù)廠家報(bào)價(jià)和現(xiàn)行市場(chǎng)價(jià)格估算，引進(jìn)設(shè)備擬從國(guó)內(nèi)的代理公司購(gòu)買(mǎi)； 建筑工程費(fèi)依據(jù)《吉林省建筑工程預(yù)算定額》和類(lèi)似建筑工程造價(jià)指標(biāo)進(jìn)行估算； 安裝及其它工程 費(fèi)，依據(jù)《輕工業(yè)工程設(shè)計(jì)概算編制方法》和地方有關(guān)規(guī)定編制； 投資估算主要根據(jù)項(xiàng)目建設(shè)實(shí)際需要，建筑材料、原材料等按市場(chǎng)價(jià)格計(jì)算，前期開(kāi)辦費(fèi)及其他工程費(fèi)根據(jù)實(shí)際情況估算； 本項(xiàng)目在吉林市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)新購(gòu)置土地 9176m2，根據(jù)高新區(qū)相關(guān)規(guī)定土地購(gòu)置費(fèi) 萬(wàn)元； 根據(jù)建設(shè)單位提供的資料研發(fā)及專(zhuān)利費(fèi)為 80 萬(wàn)元； 基本預(yù)備費(fèi)按第一、二部分費(fèi)用之和的 10%列計(jì)。 流動(dòng)資金估算 根據(jù)分項(xiàng)詳細(xì)估算法，正常年 份需要流動(dòng)資金 。 項(xiàng)目資本金構(gòu)成比例 項(xiàng)目資本金為科大公司出資。 吉林銀行 500萬(wàn)元貸款已經(jīng)落實(shí)到位，詳見(jiàn)《貸款合同》。 已 完成建設(shè)資金投入 該項(xiàng)目已完成建設(shè)資金投入 5800萬(wàn)元（其中實(shí)收資本 427 萬(wàn)元，吉林銀行貸款 500 萬(wàn)元，交通銀行貸款 150 萬(wàn)元，國(guó)家扶持性資金95 萬(wàn)元，余額見(jiàn)明細(xì)表），占建 設(shè)資金投入總額 %。 36 國(guó)債資金占項(xiàng)目總投資比例： %。 項(xiàng)目執(zhí)行環(huán)保文件及標(biāo)準(zhǔn) 《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》 GB3095— 1996中二級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 《城市區(qū)域環(huán)境噪音標(biāo)準(zhǔn)》 GB3096— 93 中 II 類(lèi)區(qū)域標(biāo)準(zhǔn) 《工業(yè)企業(yè)廠界標(biāo)準(zhǔn)》 GBl2348— 90中 II 類(lèi)標(biāo)準(zhǔn) 《污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)》 GB8978— 96，二級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 建設(shè)項(xiàng)目對(duì)環(huán)境的影響 主要污染源及污染物 廢氣：本項(xiàng)目的廢氣主要來(lái)源于生產(chǎn)中部分蒸汽。 噪音：來(lái)源于車(chē)間的機(jī)械傳動(dòng)。 廢渣排放執(zhí)行 GBJ473《工業(yè)“三廢”（廢渣）排放標(biāo)準(zhǔn)》。污水日排放量為 306m3，具體治理措施如廠： 生產(chǎn)及生活污水選精細(xì)格柵過(guò)濾，除去大顆粒的懸浮物，經(jīng)螺旋泵提升進(jìn)入頂曝氣調(diào)節(jié)沉砂池，初步去除污水中可沉淀顆粒，用污水泵提升送入汽浮凈水器，去除比重比較輕的污染物。 噪音治理 生產(chǎn)過(guò)程中噪音比較大的設(shè)備如鼓風(fēng)機(jī)、引風(fēng)機(jī)、粉碎機(jī)等可安裝在帶隔音墻的機(jī)房?jī)?nèi)并加減震裝置，以減少噪音對(duì)周?chē)h(huán)境的影響。 資源綜合利用 本項(xiàng)目屬于資源再利用項(xiàng)目，項(xiàng)目達(dá)產(chǎn)后每年可利用農(nóng)業(yè)生產(chǎn)廢棄物秸稈 5 萬(wàn)噸。 本項(xiàng)目在建設(shè)工程方案設(shè)計(jì)及設(shè)備選擇的全過(guò)程中都把節(jié)約能源當(dāng)作重要環(huán)節(jié)來(lái)考慮。 選擇高效節(jié)能電器設(shè)備，加強(qiáng)用電管理，采用電容自動(dòng)補(bǔ)償屏進(jìn)行無(wú)功功率補(bǔ)償，使 cosφ保持在 以上，降低線(xiàn)路損耗。 供電選用節(jié)能型變壓器，選擇合理的補(bǔ)償措施，使功率因數(shù)達(dá)到 90%，力求降低電能消耗。 本項(xiàng)目生產(chǎn)車(chē)間嚴(yán)格執(zhí)行“國(guó)家工業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”，“中華人民 42 共和國(guó)食品衛(wèi)生規(guī)范”及國(guó)家商檢局頒發(fā)的有關(guān)設(shè)計(jì)要求。 根據(jù)生產(chǎn)的特點(diǎn)，實(shí)際需要和使用方便的原則，在各生產(chǎn)車(chē)間內(nèi)設(shè)更衣室、盥洗室、衛(wèi)生間，廠內(nèi)設(shè)浴池、醫(yī)療衛(wèi)生所等衛(wèi)生設(shè)施。 職業(yè)衛(wèi)生規(guī)范 生產(chǎn)人員衛(wèi)生 定期體檢，注意個(gè)人衛(wèi)生，不準(zhǔn)攜帶非 生產(chǎn)用品進(jìn)入車(chē)間。 生活環(huán)境衛(wèi)生 職工食堂、浴池和宿舍要嚴(yán)格執(zhí)行餐飲服務(wù)行業(yè) 衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。 消防給水 該辦公樓室內(nèi) 1 個(gè) 消防栓水量按 10L／ s 計(jì)，室外 1個(gè)消防水栓量 20L／ s 計(jì)，火災(zāi)延續(xù)時(shí)間按 2 小時(shí)計(jì)，消防用水量為 216m3／ h。 廠區(qū)內(nèi)設(shè)消防環(huán)狀供水管網(wǎng)，在管網(wǎng)的適當(dāng)位置設(shè)置地下消火栓及隔斷閥門(mén)，消火栓間距均小于 120米。 主要原料：本項(xiàng)目主要原料是麩皮、秸稈、玉米、淀粉酶，每1000L 發(fā)酵液可生產(chǎn)纖維素酶 60kg，每 1000L 發(fā)酵液需麩皮、秸稈133kg，需玉米 20kg，需淀粉酶 。 主要輔料：本項(xiàng)目主要輔料有 KNO3 、 NaCl、 MgSO4每 1000L 發(fā)酵液需上述輔料分別為： 、 、 1kg、 1kg、 kg、 、 kg、 5kg，經(jīng)計(jì)算，全年需上述輔料分別為 400 噸、 200 噸、 240噸、 240 噸、 800噸、 48噸、 400噸、 1200噸。 工業(yè)用水收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)： 2元 /立方米。 主要原材料、燃料、動(dòng)力消耗指標(biāo) 年產(chǎn) 15000噸纖維素酶產(chǎn)品原輔材料及燃料、動(dòng)力 消耗 序號(hào) 項(xiàng)目 單位 消耗 備 注 一 主要原材料 1 麩皮、秸稈 噸 52500 2 玉米 噸 7500 46 3 淀粉酶 噸 600 二 包裝物 1 包裝袋 萬(wàn)條 25kg 2 鐵桶 萬(wàn)個(gè) 20kg 三 燃料、動(dòng)力消耗 1 水 萬(wàn)噸 30 2 電 萬(wàn)度 1150 3 蒸汽 噸 14000 六、項(xiàng)目法人基本情況 公司名稱(chēng)：吉林市科大實(shí)用技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司 公司性質(zhì)：有限責(zé)任公司 注冊(cè)資金： 5300萬(wàn)元 主營(yíng)業(yè)務(wù)： 生物工程 技術(shù)產(chǎn)品 。 公司信用等級(jí)： A級(jí)。項(xiàng)目達(dá)產(chǎn)后，公司將成為國(guó)內(nèi)單罐發(fā)酵體積最大酶制劑公司和國(guó)內(nèi)第一個(gè)使用基因工程菌株進(jìn)行酶制劑生產(chǎn)的企業(yè)?？杀ＷC本項(xiàng)目用電。 工業(yè)蒸汽： 75 元 /噸； 采暖費(fèi)： 29 元 /平方米。 3H2O、瓊脂、 CoCl2 輔助材料供應(yīng)：本項(xiàng)目的輔助材料主要是硝酸鉀、氯化鈉、包裝物等。 原材料供應(yīng) 及外部配套條件落實(shí)情況等