20xx滬科版高中生命科學(xué)第二冊(cè)63基因工程與轉(zhuǎn)基因生物4-wenkub
2022-11-30 16:45:06 本頁(yè)面
【正文】 G A A T T C C T T A A G 限制酶 HindⅢ 識(shí)別的堿基序列 A A G C T T T T C G A A ◆ 限制異源 DNA的入侵并使之失去活力，對(duì)自身的 DNA無損害作用。通過給老鼠植入一種額外基因 NR2B，從而產(chǎn)生一種為 NMDA的蛋白質(zhì) ?！岸牌胬鲜蟆钡挠泝|力比普通老鼠高出 4至 5倍 。 ◆ 限制酶切割時(shí)產(chǎn)生 黏性末端 ， DNA雙鏈不在同一處斷開，產(chǎn)生的片段帶有數(shù)個(gè)堿基尾巴。 ◆ 在宿主細(xì)胞內(nèi)可以獨(dú)立復(fù)制，也可以接合到宿主細(xì)胞的DNA分子中 二、基因工程的基本步驟 目的基因的獲取 基因表達(dá)載體的構(gòu)建（目的基因與運(yùn)載體重組） 重組 DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞 目的基因的檢測(cè)與鑒定（篩選含目的基因的受體細(xì)胞） 目前廣泛提取使用的目的基因有：抗蟲基因、人胰島素基因、人干擾素基因、種子貯藏蛋白基因、植物抗病基因等。 （已知序列） PCR技術(shù) PCR擴(kuò)增儀 以 _____方式擴(kuò)增， 即 ____（ n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)） 指數(shù) 2n 擴(kuò)增形式 在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因 擴(kuò)增結(jié)果 過程： a、變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板在熱作 用下， _____斷裂，形成 ___________ b、復(fù)性 （ 55℃ 60℃ ）：系統(tǒng)溫度降低，引物與 DNA模板結(jié)合，形成局部 ________。表達(dá)載體比載體增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三部分結(jié)構(gòu)。 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 兩個(gè)切口 四個(gè)黏性末端 DNA連接酶 基因表達(dá)載體 （重組 DNA分子或重組質(zhì)粒） 同一種 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1 轉(zhuǎn)化： （ 1） 概念 ： 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi) 維持穩(wěn)定和表達(dá) 的過程。 生物種類 植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì) 胞 微生物細(xì)胞 常用方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉通道法 顯微注射法 Ca2＋ 處理法 受體細(xì)胞 一般為體細(xì)胞 受精卵 一般原核細(xì)胞 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方 法 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 （ 1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 特點(diǎn) : 能感染 雙子葉植物 和 祼子植物 ,對(duì)單子葉植物無感染能力 Ti質(zhì)粒 的 T— DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上 轉(zhuǎn)化過程 : Ti質(zhì)粒 目的基因 構(gòu)建 表達(dá)載體 導(dǎo)入 植物細(xì)胞 插入 植物細(xì)胞染色 DNA 表達(dá) 新性狀 轉(zhuǎn)入 農(nóng)桿菌 （受體細(xì)胞：體細(xì)胞） （ 2）基因槍法 基因槍法又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力，將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。 問題 (四 )目的基因的檢測(cè)與鑒定 檢測(cè) ① 導(dǎo)入檢測(cè)：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 方法 —— DNA分子雜交 ② 表達(dá)檢測(cè) 轉(zhuǎn)錄檢測(cè) —— 分子雜交 翻譯檢測(cè) —— 抗原 抗體 雜交 分子檢測(cè)法 鑒定 抗蟲鑒定 抗病鑒定 活性鑒定等 個(gè)體水平的鑒定 導(dǎo)入過程完成后，全部受體細(xì)胞都能攝 入重組 DNA分子嗎？ 成功導(dǎo)入概率極小，實(shí)際能攝入重組 DNA分子的受體細(xì)胞很少。有的還能吞食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬，分解多種毒害物質(zhì)。 轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄 不會(huì)引起過敏的轉(zhuǎn)基因大豆 ◆ 動(dòng)物基因工程 特點(diǎn) ： ●以受精卵作為受體細(xì)胞 ●用 顯微注射 的方法將目的基因?qū)胧芫? ●使受精卵發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 ♂ ♀ 成果 ： ●巨型小鼠（內(nèi)含外源生長(zhǎng)激素基因） ● （ 1）生產(chǎn)人源性蛋白質(zhì)藥物 乳腺生物反應(yīng)器： 將所需要基因轉(zhuǎn)入乳量高的牛、羊等家畜體內(nèi)， 從動(dòng)物的乳汁中獲得人源性蛋白質(zhì)藥物。在基因操作的基本步驟中 ， 不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 （ ） A、 人工合成目的基因 B、 目的基因與
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1