20xx人教版高中生物選修一5-1dna的粗提取與鑒定ppt同步課件-wenkub
2022-11-27 22:31:27 本頁面
【正文】 標(biāo)解讀 解 DNA分子的理化性質(zhì)。 DNA粗提取與鑒定的原理。 提取 DNA的方法 物理 化學(xué) 物理或化學(xué)性質(zhì) RNA 蛋白質(zhì) 脂質(zhì) 物理 化學(xué) 3． 原理 (1)DNA和 蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 溶液中溶解度不同 。 大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受 的高溫 ， 而 DNA在 以上才會變性 。 [思維激活 1] 為 提取到 DNA， 曾先后使用不同濃度的 NaCl溶液 ，則在質(zhì)量濃度為 2 mol/L NaCl溶液及 mol/L NaCl溶液中應(yīng)取濾液 ， 還是濾得的固體物 ？ 提示 在質(zhì)量濃度為 2 mol/L NaCl溶液中 DNA呈溶解狀態(tài) ， 應(yīng)取濾液 ， 在質(zhì)量濃度為 mol/L NaCl溶液中 DNA溶解度極低 ，易析出 ， 應(yīng)取固體物 。 NaCl溶液 酒精 (體積分?jǐn)?shù)為 95%的冷酒精 ) DNA 不溶 蛋白質(zhì) NaCl溶液質(zhì)量濃度從 2 mol/L逐漸稀釋的過程中溶解度逐漸增大 某些蛋白質(zhì)可溶 DNA對酶、高溫及洗滌劑的耐受性提取 DNA(見下表 ) DNA 蛋白質(zhì) 蛋白酶 沒影響 水 解 高溫 80 ℃ 以上才會變性 60～ 80 ℃ 會變性 洗滌劑 沒影響 瓦解細(xì)胞膜 特別提醒 (1)甲基綠可將 DNA染成綠色 ， 且不需水浴加熱 。下列藥品可達(dá)到上述同一目的的是 ( )。 DNA粗提取實(shí)驗(yàn)流程 DNA 蒸餾水 濾液 (2)植物細(xì)胞的破碎 ——以洋蔥為例 先將洋蔥切碎 ， 然后加入一定的 和 ， 進(jìn)行充分 和 ， 過濾后收集研磨液 。 洗滌劑 食鹽 攪拌 研磨 NaCl溶液 雜質(zhì) 嫩肉粉 木瓜蛋白酶 60～ 75℃ 蛋白質(zhì) DNA 4． DNA的進(jìn)一步提純 利 用 DNA不溶于冷卻的 這一原理 ， 可從溶液中析出較純凈的 DNA， 此時 DNA的狀態(tài)為 。 1． 實(shí)驗(yàn)材料的選取 本 實(shí)驗(yàn)用雞血細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料有兩個原因：一是因?yàn)殡u血細(xì)胞的核 DNA含量豐富 ， 材料易得；二是雞血細(xì)胞極易吸水漲破 ， 而用動物肝臟細(xì)胞等作實(shí)驗(yàn)材料常常需要勻漿和離心 ，對設(shè)備要求較高 ， 操作繁瑣 ， 歷時較長 。 A． ① 是洗滌紅細(xì)胞 ， 去除血細(xì)胞表面的雜質(zhì) B．②是溶解 DNA，去除不溶于酒精的雜質(zhì) C．③是溶解 DNA，去除不溶于質(zhì)量濃度為 2 mol/L NaCl溶液的雜質(zhì) D．④是稀釋 NaCl溶液，去除不溶于低濃度 NaCl溶液的雜質(zhì) 解析 ① 是使雞血細(xì)胞吸水脹破釋放出核物質(zhì)； ② 是析出 DNA，去除溶于酒精的雜質(zhì)； ④ 是稀釋 NaCl溶液使其濃度接近 mol/L， 去除溶于低濃度 NaCl溶液的雜質(zhì) 。 將絲狀 DNA溶解在質(zhì)量濃度為 2 mol/L的 NaCl溶液中 ， 加入二苯胺沸水浴加熱后呈藍(lán)色 。 (2)在圖 A所示的實(shí)驗(yàn)步驟中加蒸餾水的目的是 ________， 通過圖 B所示的步驟取得濾液 ， 再在溶液中加入質(zhì)量濃度為 2 mol/L的 NaCl
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