基因工程的基本操作步驟7-wenkub
2023-01-26 17:53:22 本頁面
【正文】 鹽煙草是否成功？、如何鑒定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否成功？接蟲接蟲在轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草田中澆灌鹽水，觀察其在轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草田中澆灌鹽水，觀察其是否有抗鹽特性是否有抗鹽特性用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人血清白蛋白，如何、用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人血清白蛋白，如何 確定轉(zhuǎn)基因羊培養(yǎng)成功？確定轉(zhuǎn)基因羊培養(yǎng)成功？檢測羊乳中是否含有人的血清白蛋白檢測羊乳中是否含有人的血清白蛋白歸納 : 基因工程的基本操作程序1. 獲取目的基因– 從基因文庫– 利用 PCR技術(shù)– 人工合成2. 構(gòu)建基因表達(dá)載體– 目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞– 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法、顯微注射法4. 目的基因的檢測與鑒定– 檢測：是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯– 鑒定：是否有轉(zhuǎn)基因特性一一 、 乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器？目的基因是什么？ 藥用蛋白基因藥用蛋白基因？目的基因前需加的什么啟動(dòng)子？乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子？受體細(xì)胞是什么？ 受精卵受精卵？分泌蛋白質(zhì)的細(xì)胞是？ 乳腺分泌細(xì)胞乳腺分泌細(xì)胞？將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法？顯微注射法顯微注射法練習(xí)：練習(xí)： 繼哺乳動(dòng)物乳腺發(fā)生器研發(fā)成功后，膀胱繼哺乳動(dòng)物乳腺發(fā)生器研發(fā)成功后，膀胱生物發(fā)生器的研究也取得了一定進(jìn)展?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建③ 將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 ______處， 再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一種限制酶的黏性末端切口DNA連接酶相同 (插入式)① 用一定的 _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切 口，露出 ____________。 氫鍵 單鏈 DNA雙鏈DNA鏈⑦ 前提 __________________________________________________ 有 一段已知目的基因的核苷酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成 （ DNA合成儀）（三）人工合成若基因 _____，核苷酸序列 ______ ，可用此法。 :種類基因組文庫： 含有一種生物的 全部 基因部分基因文庫： 只包含了一種生物的部分 基因，如： cDNA文庫基因文庫的構(gòu)建過程限制酶拼接到載體上導(dǎo)入受體細(xì)胞擴(kuò)增 ? 通過對(duì)受體菌群體的培養(yǎng)而儲(chǔ)存一種生物的全部基因 。 基因組文庫提取生物某發(fā)育時(shí)期的 mRNA單 鏈 DNA逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶雙鏈 CDNA(只含該生物部分基因 )與載體連接導(dǎo)入到受體菌群儲(chǔ)存 cDNA文庫基因組文庫和 cDNA文庫比較原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu) (補(bǔ)充內(nèi)容）非編碼區(qū) 非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 與 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子 終止子① 不編碼蛋白質(zhì)。較小 已知（化學(xué)合成法）mRNAcDNA單鏈cDNA分子逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶（三）人工合成 （反轉(zhuǎn)錄法） 與直接提取的 DNA相比 cDNA不含有 _____ 和 _____等結(jié)構(gòu)。② 用 _____________切斷目 的基因，使其產(chǎn)生 _____ ____________。最近，科生物發(fā)生器的研究也取得了一定進(jìn)展。顯微注射顯微注射2）進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移是，通常要將外源基因轉(zhuǎn)）進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移是，通常要將外源基因轉(zhuǎn)到到________中，原因是中，原因是 ：：受精卵受精卵 ①① 具有發(fā)育的全能性；具有發(fā)育的全能性；②② 體積大，易操作。膀胱上皮膀胱上皮練習(xí)：練習(xí)： 繼哺乳動(dòng)物乳腺發(fā)生器研發(fā)成功后，膀胱繼哺乳動(dòng)物乳腺發(fā)生器研發(fā)成功后，膀胱生物發(fā)生器的研究也取得了一定進(jìn)展。請回答：4）通常采用）通常采用 _____________技術(shù)檢測外源基技術(shù)檢測外源基因因 是否插入了小鼠的基因組是否插入了小鼠的基因組DNA分子雜交分子雜交6）） 與乳腺生物反應(yīng)器相比，膀胱反應(yīng)器有什么與乳腺生物反應(yīng)器相比，膀胱反應(yīng)器有什么 優(yōu)點(diǎn)？優(yōu)點(diǎn)？ ①① 不受性別的限制；不受性別的限制；②② 沒有是否處于生殖期的限制。（ 增補(bǔ)策略增補(bǔ)策略 ））基因治療的類型、基因治療的類型體外基因治療體外基因治療體內(nèi)基因治療體內(nèi)基因治療基因治療的發(fā)展現(xiàn)狀：、基因治療的發(fā)展現(xiàn)狀：處于初期的臨床試驗(yàn)階段處于初期的臨床試驗(yàn)階段三三 、 蛋白質(zhì)工程的崛起蛋白質(zhì)工程的崛起蛋白質(zhì)工程是指以 蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能 的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過 基因修飾 或基因合成 ，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行 改造或制造一種新的蛋白質(zhì) ，以滿足人類對(duì)生產(chǎn)和生活的需求。科學(xué)家嘗試?yán)棉D(zhuǎn)基因番茄來生產(chǎn)口蹄疫疫苗，過程。請據(jù)圖回答。疫苗的主要成分是該病毒的一種結(jié)構(gòu)接種弱毒疫苗的方法預(yù)防。請據(jù)圖回答。選出含有重組質(zhì)粒的葉片小段。的表達(dá)。請分析回答和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。圖中。圖抗鹽煙草。M抗生素抗生素（（ 4）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，在個(gè)體水平）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，在個(gè)體水平上鑒定之前，常用上鑒定之前，常用 __________________________作作探針進(jìn)行
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