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臨床生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室基本技術(shù)與實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理-wenkub

2023-01-21 16:24:42 本頁面
 

【正文】 :糖類、胺類、 DNA與 RNA酶與輔酶, Vit類及 Ca2+、 Fe3+、 Zn2+等。多數(shù)情況下,與熒光強(qiáng)度成反比。 F=?I, I是激發(fā)光強(qiáng)度。 火焰光度法:操作煩瑣,干擾因素多, 已淘汰。 (2)紫外法的吸收池需用石英玻璃作光學(xué)面。 優(yōu)點(diǎn): (1)靈敏度高,檢測濃度在 105~102 mol/l范圍。 (2)操作簡便、快速、選擇性好和應(yīng)用廣泛。 (3)原子法需特定元素的空心陰極燈,對難熔元素測定的靈敏度不夠理想。 : (1)溶劑。濃度很小且厚度不變時成正比。 (4)溶液 pH。 (三 )散射光譜分析法 (比濁法 ) : 利用光線通過混懸顆粒后產(chǎn)生的散射光譜特征,確定其性質(zhì) ….. : 散射比濁法: 根據(jù)光線通過混懸液后,光線減弱的程度來測定其濃度。需特殊儀器如激光比濁儀。 二、電泳技術(shù) (一 )原理: 利用帶電粒子在電場中向所帶電荷相反的電極移動的性能,對物質(zhì)分子進(jìn)行分析測定。因此,取代第一 類電泳 。 毛細(xì)管區(qū)帶電泳可分離的項(xiàng)目包括:多肽、氨基酸、 DNA、 酶分子等。與固定相作用弱的組分,受到阻力小,向前移動速度快,反之,移動速度慢,從而達(dá)到將樣品中各單一組分分離的目的。 (2)應(yīng)用:脫鹽;分離提純;測定高分子物質(zhì)的分子量;高分子溶液的 濃縮。 (2)HPLC的類型:液 固吸附層析;液 液分配層析;離子交換層析。主要用 于純化生物分子。而離子選擇性電極分析法 (ion selective electrode, ISE)則是 電位分析法中發(fā)展最為活躍的分支。其特點(diǎn)是高通量、微型化和自動化,可以 對細(xì)胞、蛋白質(zhì)、 DNA及其他生物組分進(jìn)行準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測。其中臨床生物化學(xué)常用的有基因芯片、蛋白質(zhì)芯片和芯片實(shí)驗(yàn)室三類。 (三 )生物芯片技術(shù)要點(diǎn) 常用的芯片基底 (即芯片載體 )是玻璃片和硅片。根據(jù)對芯片載體的處理方法,芯片可有以下幾種類型:?蛋白質(zhì)微陳列芯片 用于研究蛋白質(zhì); ?微孔板蛋白質(zhì)芯片; ?三維凝膠塊芯片 用于研究抗原抗體、酶動力學(xué)。 (1)芯片專用監(jiān)測系統(tǒng), scan Array5000。 (五 )蛋白質(zhì)芯片技術(shù)與傳統(tǒng)的質(zhì)譜和雙向凝膠電泳技術(shù)相比,優(yōu)點(diǎn): 。 ,實(shí)用性較強(qiáng)。固化生物活性物質(zhì)與游離相比優(yōu)點(diǎn)有: (1)熱穩(wěn)定性提高; (2)可重復(fù)使用;(3)不需要在反應(yīng)后進(jìn)行催化物質(zhì)與反應(yīng)物的分離; (4)可根據(jù)已知的half life來確定生物膜的壽命; (5)能夠避免外源性微
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