【正文】 據(jù)，特別是原始細(xì)胞的數(shù)量和形態(tài)， FAB分型提出以原始細(xì)胞 30％為急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)?；诿庖弑硇汀⒓?xì)胞遺傳學(xué)特征及特殊基因表達(dá)的分型方法，已越來越多地被用于制定最佳治療方案，始于治療前的全面診斷及評估。此分型方案得到了廣泛的應(yīng)用。詳解白細(xì)胞疾病檢驗(yàn)的應(yīng)用 醫(yī)學(xué)百事通 第一節(jié) 白血病概述 第十二章 第一節(jié) 白血病概述 白血病 (leukemia)是造血干細(xì)胞克隆性疾病，是具有高度異質(zhì)性的惡性血液病，其特點(diǎn)為白血病細(xì)胞異常增生、分化成熟障礙，并伴有凋亡減少 編輯制作 莫武寧 我國白血病的發(fā)病率為 ，急性白血病多于慢性白血病，在全國各年齡惡性腫瘤死亡率中白血病占第 6位（男性）和第 8位（女性），在兒童和 35歲以下的人群中占第 1位。 急性白血病分型 第十二章 第一節(jié) 白血病概述 FAB分型 分型FAB分型 近年來，在 FAB形態(tài)學(xué)分型的基礎(chǔ)上開展免疫學(xué)及染色體的研究工作，組成了一個白血病的 MIC研究協(xié)作組（ Morphological Immunological Cytogeical Study Group），并分別于 1985年、1986年、 1987年提出了急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病的 MIC分型。 急性白血病分型 第十二章 第一節(jié) 白血病概述 2022年 3月里昂會議上，國際血液學(xué)及血液病理學(xué)專家推出一個造血和淋巴組織腫瘤 WHO新分型方案的建議。以原始細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征，將急性白血病分為急性淋巴細(xì)胞白血?。?ALL）、急性髓細(xì)胞白血?。?AML）或稱急性非淋巴細(xì)胞白血病（ ANLL）兩大類及其亞型，以后進(jìn)行了多次修改補(bǔ)充，由于分型標(biāo)準(zhǔn)明確，目前已被廣泛采用。胞質(zhì)嗜堿，深藍(lán)色，有較多空泡。 急性白血病分型 FAB分型 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 分型 分 型 標(biāo) 準(zhǔn) AML－ M3 急性早幼粒細(xì)胞白血病，骨髓中異常早幼粒細(xì)胞 ≥30％（ NEC），胞質(zhì)內(nèi)有大量密集甚至融合的粗大顆粒，常有成束的棒狀小體（ Auer小體）。M4Eo為伴嗜酸粒細(xì)胞增多的急性粒單核細(xì)胞白血病，除M4特征外，骨髓中異常嗜酸粒細(xì)胞增多 ≥5％。 AML－ M7 急性巨核細(xì)胞白血病，骨髓原巨核細(xì)胞 ≥30％，電鏡PPO陽性，血小板膜蛋白 Ⅰ b、 Ⅱ b／ Ⅲ a、 Ⅲ a或（ vWF）陽性。 NEC： 非紅系細(xì)胞計數(shù)，是指不包括漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、組織嗜堿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及所有有核紅細(xì)胞的骨髓有核細(xì)胞計數(shù)。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 FAB分型 FAB分型標(biāo)準(zhǔn)明確，國內(nèi)外分型基本統(tǒng)一，對急性白血病的診斷、治療、預(yù)后及生物學(xué)特性的研究起到重要作用，是目前應(yīng)用最多和最廣的分型及診斷方法，也是今后診斷白血病不可缺少的基本方法之一。白血病是造血細(xì)胞的某一克隆被阻滯在某一分化階段上并異常增殖的結(jié)果，故 白血病細(xì)胞往往停滯在細(xì)胞分化的某一抗原表達(dá)階段 ，因此可以利用單克隆抗體檢測相應(yīng)白細(xì)胞表面抗原或胞質(zhì)內(nèi)的分化抗原進(jìn)行白血病類型的鑒別、細(xì)胞發(fā)育階段的鑒別，從而指導(dǎo)治療，判斷預(yù)后。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 免疫學(xué)分型 ?CD1 CD15和 CD33與分化程度相對較高 的AML相關(guān)， 50%M3可陽性。 ?抗血小板 GPⅡb ／ Ⅲa （ CD41a）、 Ⅱ（ CD41b)、 Ⅲa （ CD61）、 Ⅰb （ CD42b） 的單抗被認(rèn)為是鑒定 M7的敏感而特異的 單抗。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 免疫學(xué)分型與 FAB分型 特異性染色體的異常是惡性血液病發(fā)生過程中的重要環(huán)節(jié)，更代表疾病的本質(zhì)，細(xì)胞染色體分析已成為研究和診斷白血病的重要方法之一。21)(q22。q12) 10 M M3V M3/t(15。q11) 3 M1(M2) M1/t(9。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 細(xì)胞遺傳學(xué)分型 細(xì)胞遺傳學(xué)的改變往往與預(yù)后有關(guān)： ?預(yù)后較好的有 t(8。9)， t(9。 ?白血病細(xì)胞對化療的反應(yīng)與細(xì)胞核型有關(guān)，特異性染色體異?？勺鳛楸O(jiān)察病情緩解和復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。19）所致的 PBXE2A融合基因；而 BALL則有 IgH和輕鏈在細(xì)胞膜表面的表達(dá)。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 分子生物學(xué)分型 AMLM3型 ， 90％以上患者可見到 t(15。17）而發(fā)現(xiàn)有 PMLRARα 融合基因，提示融合基因檢測更敏感，更具特異性。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 分子生物學(xué)分型 細(xì)胞遺傳學(xué) /分子生物學(xué)異常可能對白血病危險程度及預(yù)后的評估提供重要信息，如 ALL中已證實(shí) t（ 9。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 分子生物學(xué)分型 髓過氧化物酶基因（ MPO） 位于 17號染色體（ 17q22）。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病分型 分子生物學(xué)分型 基因診斷及分型是更新、更敏感及特異的白血病診斷分型手段，可利用多種特異性基因標(biāo)記檢測白血病、白血病的亞型及微量殘留白血病。新分型方案結(jié)合臨床、結(jié)合染色體核型改變及其受累基因的異常表達(dá)，將急性白血病分類與發(fā)病機(jī)制、靶基因治療相結(jié)合，具有重要的臨床和研究價值。21)(q22。q22)。PMLRARA （ 4） AML 伴 t(9。9)(p23。)。 RBM15MKL1 （ 8）伴 NPM1突變 AML （ 9）伴 CEBPA突變 AML AML 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性髓細(xì)胞白血病和相關(guān)髓系腫瘤 （ 2022 WHO分型） AML （ 1） AML微分化型 （ 2） AML未成熟型 （ 3） AML部分成熟型 （ 4）急性粒單細(xì)胞白血病 （ 5）急性原始單核細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病 （ 6）急性紅白血病 純紅血病 紅白血病 （ 7）急性巨核細(xì)胞白血病 （ 8）急性嗜堿性粒細(xì)胞白血病 （ 9）急性全髓白血病伴骨髓纖維化 短暫性髓細(xì)胞生成異常 髓系白血病伴隨唐氏綜合征 7. 原始漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞腫瘤 急性白血病的診斷 急性白血病的診斷是以形態(tài)學(xué)診斷為基礎(chǔ)，結(jié)合免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn)的 MICM綜合性診斷方法。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病的診斷 骨髓象 是診斷本病的主要依據(jù)。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病的診斷 急性白血病的診斷 少數(shù)病例骨髓增生低下，但白血病性原始細(xì)胞仍 ≥ 30％，可診斷為低增生性急性白血病。 遺傳及分子生物學(xué)檢驗(yàn) 某些類型的急性白血病亞型之間與免疫表型、染色體核型及分子基因標(biāo)志的關(guān)系密切，有助于類型診斷和鑒別診斷。 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 急性白血病療效觀察 （ 2）部分緩解 （ partial remission， PR）： 骨髓 ：原粒細(xì)胞 I型＋ II型（原單＋幼單或原淋 ＋幼淋）＞ 5％～ ≤ 20％； 或臨床、血象二項(xiàng)中有一項(xiàng)未達(dá)完全緩解標(biāo)準(zhǔn)。 白血病自確診之日起，存活時間（包 括無病或帶病生存）達(dá) 5年或 5年以上者。 急性白血病微量殘留白血病的檢測 第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷 方法 靈敏度 主要優(yōu)點(diǎn) 主要缺點(diǎn) 細(xì)胞遺傳學(xué) 1%～ 5% 可發(fā)現(xiàn)異常核型 不敏感 細(xì)胞原位雜交 1% 可用于間期細(xì)胞 不敏感，受分裂期影響 多參數(shù)流式細(xì)胞法 10 2～ 4 快速，可定量， 較敏感 需特殊探針，有時難與 正常細(xì)胞區(qū)分 分子生物學(xué)方法 （ PCR， RTPCR） 10 4～ 6 高敏感度，定量可自動分析 假陰性或假陽性 常用 MRD的檢測方法 急性白血病微量殘留白血病的檢測 第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病 急性淋巴細(xì)胞白血?。?ALL），簡稱急淋，是由于原始及幼稚淋巴細(xì)胞在造血組織異常增殖的造血系統(tǒng)惡性克隆性疾病。退化細(xì)胞明顯增多，藍(lán)細(xì)胞（涂抹細(xì)胞）多見，這是急淋的特征之一。22）（ q34。腦膜與腦實(shí)質(zhì)白血病在CNSL中占首位，故臨床上常以腦膜刺激癥狀和顱內(nèi)壓增高為常見，表現(xiàn)為頭痛、惡心、嘔吐、抽搐、頸項(xiàng)強(qiáng)直或嗜睡、譫妄、昏迷等 ,脊髓損害表現(xiàn)為高位截癱或骶髓浸潤致大小便失禁等。目前，仍以 FAB協(xié)作組的診斷標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行診斷與分型，將 AML分為 M0～ M7 8個亞型，并規(guī)定骨髓中原始細(xì)胞必須大于非紅系細(xì)胞的 30%。 PAS呈陰性或弱陽性 MPO陽性 免疫表型表達(dá)為髓系分化抗原 CD1 CD3 CD1CD1 CD11b中至少有一種陽性 , cMPO多陽性。 血小板中度到重度減少。 POX染色及 SBB染色至少有 3％原粒細(xì)胞陽性。 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M1實(shí)驗(yàn)室檢查 ① 符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) ②骨髓中原始粒細(xì)胞（ I型 +II型） ≥ 90％（ NEC），并伴形態(tài)學(xué)異常 ③ POX或 SBB（ +）的原始細(xì)胞＞ 3％ ④進(jìn)一步依免疫表型特點(diǎn)與 ALL鑒別 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M1診斷標(biāo)準(zhǔn) 貧血顯著，白細(xì)胞中度升高和 M1相似， 以原始粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞為主。 （ 4）特異性和非特異性酯酶染色： ASDNCE 呈陽性反應(yīng)； α NAE可呈弱陽性反應(yīng)， 且不被氟化鈉抑制。血紅蛋白及紅細(xì)胞數(shù)均降低。21）（ q22。染色體 t（ l5； 17）形成的 PML／RARα 融合基因是本病最特異的基因標(biāo)志。血小板中度到重度減少 多數(shù)病例骨髓增生極度活躍。胞質(zhì)含短而粗的 Aure小體，幾條、十幾條或幾十條，可呈束狀交叉排列，酷似柴捆樣，故有人稱之為 “ 柴捆細(xì)胞 ” 。 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M3實(shí)驗(yàn)室檢查 M3實(shí)驗(yàn)室檢查 M3實(shí)驗(yàn)室檢查 POX、 SBB、 SDNCE和ACP染色均呈陽性或強(qiáng)陽性反應(yīng)。故以髓系標(biāo)志為主而 \ HLADR為陰性者 M3型的可能性大。臨床上兼有急粒和急單白血病的特征。 M4Eo有 16號染色體異常，主要表現(xiàn)為 inv（ l6）、 del（ 16）和 t（ l6。 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 急性單核細(xì)胞白血病（ M5） 概述 血紅蛋白和紅細(xì)胞數(shù)呈中度到重度減少。 M5b中原單、 幼單及單核細(xì)胞均可見到，原單細(xì)胞＜ 80％ 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 (1)POX和 SBB染色：原單核細(xì)胞呈陰性和弱陽性反應(yīng)而幼單核細(xì)胞多數(shù)為陽性反應(yīng) (2)PAS染色：原單核細(xì)胞約半數(shù)呈陰性反應(yīng)，幼單細(xì)胞多數(shù)為陽性反應(yīng) (3)酯酶染色：非特異性酯酶染色陽性，可被氟化鈉抑制 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 急性單核細(xì)胞白血病的 POX染色 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 急性單核細(xì)胞白血病 αNAE染色 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 急性單核細(xì)胞白血病 αNAE氟化鈉抑制染色 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 白血病細(xì)胞表面抗原表達(dá) CD1CD1 CD1 CD1 CD3 CD3 HLADR t/del(11)(q23)約見于 22% M5型，其中 60％以上病例為 M5a，其次為M5b和 M4，染色體的缺失和易位均累及 11q23帶的HRX基因（ MLL基因） 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M5實(shí)驗(yàn)室檢查 ① 符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) ②骨髓中原單核、幼單核細(xì)胞異常增生，原單核細(xì)胞 ≥ 80％（ NEC）可診斷為 M5a；原單核細(xì)胞＜ 80％，原單核＋幼單核細(xì)胞＞ 30%（ NEC）可診斷為M5b ③ 白血病細(xì)胞 α NBE陽性且可被氟化鈉抑制確診為單核細(xì)胞性白血病 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M5診斷標(biāo)準(zhǔn) 本病包括紅血病和紅白血病。白細(xì)胞系統(tǒng)明顯增生，原始細(xì)胞大于 30％ (NEC) 幼紅細(xì)胞 PAS常呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，積分值明顯增高 第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病 M6實(shí)驗(yàn)室