微生物工程實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)-wenkub
2022-11-14 01:00:40 本頁面
【正文】 、55℃、60℃條件下恒溫培養(yǎng)24h，觀察菌株生長情況并測量各平板上菌落的直徑。7H20 0．5 g，NaCl 0．5 g，K2HP04 1g，121℃滅菌20 min（二）菌株的擴(kuò)大培養(yǎng)條件優(yōu)化篩選出產(chǎn)酶能力較強(qiáng)的菌株，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。克雷伯氏桿菌發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的條件優(yōu)化 成員：陳文竹、陳怡璋、郭智、趙詔、宋培換一．菌株復(fù)活及擴(kuò)大培養(yǎng)：（陳怡璋）（一）菌株的活化及篩選將冷凍保存的菌種轉(zhuǎn)接到LB培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h，備用。如有條件，可對擴(kuò)大培養(yǎng)的條件進(jìn)行優(yōu)化。碳源種類確定分別以1％葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖、可溶性淀粉、甘油作為碳源，其他組分均相同進(jìn)行培養(yǎng)24h。觀察菌株生長情況并測量各平板上菌落的直徑。選取影響最為顯著的無機(jī)鹽，分別以不同濃度（0．5％、2％、4％、6％、8％、10％），其他組分均相同的條件進(jìn)行培養(yǎng)，觀察菌株生長情況并測量各平板上菌落的直徑。：（趙詔） 試驗(yàn)以蛋白胨為氮源，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中分別加入1%的不同種類的碳源，羧甲基纖維素鈉，葡萄糖，淀粉，蔗糖，麥芽糖，玉米漿，甘露醇，D果糖，其他成分不變，28℃左右150r/min搖床培養(yǎng)5天后測定酶活，最終選擇酶活力最高的實(shí)驗(yàn)組所用的碳源最適產(chǎn)酶的碳源。4發(fā)酵時間的優(yōu)化（趙詔） 將菌株接種在已經(jīng)優(yōu)化好的培養(yǎng)基中，調(diào)節(jié)好合適的pH，將其放于合適的溫度和轉(zhuǎn)速的搖床上培養(yǎng)48h，72h，96h，116h，135h。7HFeS04（參考文獻(xiàn)：、發(fā)酵和產(chǎn)酶條件優(yōu)化及酶）。（郭智） 設(shè)200、400、600、800、1 000、1200L三．纖維素酶活性鑒定：（陳文竹） 纖維素酶是多組分復(fù)合物，各組分的底物專一性不同。液體發(fā)酵培養(yǎng)基經(jīng)35℃，220 r／瑚jn搖床培養(yǎng)。然后在沸水浴中加熱5分鐘，然后立即用自來水冷卻，搖勻，于540nm測光密度，結(jié)果如下表所示： 取適當(dāng)稀釋的酶液，分別以濾紙或1％的CMC溶液為底物，于5
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