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細菌的遺傳分析(2)-wenkub

2023-05-13 22:31:12 本頁面
 

【正文】 整合到細菌染色體一定 的 座位上。 性導 :接合時由 F′因子所攜帶的外源 DNA整合到細菌染色體上的過程。 ⑶在這些 Hfr菌株中,你認為選擇那一個基因可以最高的頻率獲得 Hfr接合后體? A B C D E mal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str (11) his (28) met(29) gal(16) gal (17) ser(16) gal (38) xyl (32) his(26) pro(23) ade(36) pro(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) mal str ser ade his gal pro met xyl 10 5 20 15 10 6 26 3 5 A B D C E 4. 細菌重組與 轉 移 后 標 記 基 因 間 的 重 組 原核生物的遺傳交換發(fā)生在一個 部分二倍體 中 (完全的基因組和一個不完全的基因組 ) 特點: ⑴單交換產生一個不完全二倍體線型染色體, 不能存活。 ⑵ 基因位點離原點越近,進入 F﹣ 越早,重組機會越多;反之越晚。 影印培養(yǎng)法 MM原養(yǎng)型 MM+lay 賴氨酸缺陷型 MM+leu 亮氨酸缺陷型 MM+arg 精氨酸缺陷型 ? 注意: – (1)最初的培養(yǎng)基必須是非選擇性的,即各種突變型都能夠在其上生長; – (2)必須采用適當的方法如涂布或劃線法,以使培養(yǎng)物菌落之間要分開。 –該方法原理與選擇培養(yǎng)法一致,但是采用影印法將在完全培養(yǎng)基上單菌落同時接種到不同選擇培養(yǎng)基上同時對所有菌落進行選擇培養(yǎng),鑒定效率大大提高。 (三 ) 選擇培養(yǎng)法鑒定突變型與重組型 ? 許多細菌的突變都與培養(yǎng)基營養(yǎng)成分及培養(yǎng)條件有關。 ? 通常采用平板表面涂布法或劃線法可以獲得單菌落。?本章重點和難點:了解細菌進行遺傳物質交流的方式,掌握細菌染色體作圖的方法。這種方法獲得的純系,稱為“菌種純”。 ? 營養(yǎng)缺陷型的篩選、鑒定: –選擇培養(yǎng)法是根據菌株在基本培養(yǎng)基和營養(yǎng)培養(yǎng)基上的生長表現將菌株分為原養(yǎng)型 (也稱為原生營養(yǎng)型 )和營養(yǎng)缺陷型 (在基本培養(yǎng)基上不能正常生長,只能在相應的營養(yǎng)培養(yǎng)基上生長 )。 影印培養(yǎng)法 ? 把長有許多菌落的母種培養(yǎng)皿倒置于包有滅菌絲絨布的木質圓柱印章上,使其沾上來自平板上的菌落。 ?接合 ?轉化 第 二節(jié) 細菌的染色體作圖 ?性導 ?轉導 1. 接合現象的發(fā)現 1946年 K12 菌株 A met bio thr+ leu+ thi+ 菌株 B met+ bio+ thr leu thi 一 . 接合 單基因突變率 10 –6 回復突變 1012 or 1018 如何產生? 原養(yǎng)型的出現 以 A、 B菌株直接接觸為前提 隔離培養(yǎng)后 不出現原養(yǎng)型 2. F因子及其轉移 1952年, A菌株 B菌株 鏈霉素 AB混合培養(yǎng),原養(yǎng)型重組體 鏈霉素 BA混合培養(yǎng) , 細菌接合中遺傳物質轉移 單向過程 (即從 A →B株) 細菌分為兩個類群(兩種接合型 ) 供體 (或雄菌株) 受體 (或雌菌株) 2. F因子及其轉移 致育因子 (或 F性因子,也叫 F質粒) 染色體外的一個共價環(huán)狀 DNA分子 ( 細菌 DNA的 2% 1/3基因與接合有關 ) 接合:原核生物中,遺傳物質從供體( “ 雄性 ” )轉移到受體( “ 雌性 ” )的過程。 ⑶ F 因子插入的位置不同,使不同的 Hfr菌株有自己穩(wěn)定的轉移起點和次序。 ⑵偶數交換產生一個環(huán)狀染色體(存活的重組子), 外加一個線型斷片。 F′lac F′lac tsx 可攜帶一個至多個基因,甚至半條染色體。 Hfr2 ←pro +—leu+—gal+—lac+—F F﹣ lac strr F′lac+ strs F﹣ lac strr lac+
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