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細(xì)菌的遺傳分析(2)-wenkub

2023-05-13 22:31:12 本頁(yè)面
 

【正文】 整合到細(xì)菌染色體一定 的 座位上。 性導(dǎo) :接合時(shí)由 F′因子所攜帶的外源 DNA整合到細(xì)菌染色體上的過(guò)程。 ⑶在這些 Hfr菌株中,你認(rèn)為選擇那一個(gè)基因可以最高的頻率獲得 Hfr接合后體? A B C D E mal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str (11) his (28) met(29) gal(16) gal (17) ser(16) gal (38) xyl (32) his(26) pro(23) ade(36) pro(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) mal str ser ade his gal pro met xyl 10 5 20 15 10 6 26 3 5 A B D C E 4. 細(xì)菌重組與 轉(zhuǎn) 移 后 標(biāo) 記 基 因 間 的 重 組 原核生物的遺傳交換發(fā)生在一個(gè) 部分二倍體 中 (完全的基因組和一個(gè)不完全的基因組 ) 特點(diǎn): ⑴單交換產(chǎn)生一個(gè)不完全二倍體線型染色體, 不能存活。 ⑵ 基因位點(diǎn)離原點(diǎn)越近,進(jìn)入 F﹣ 越早,重組機(jī)會(huì)越多;反之越晚。 影印培養(yǎng)法 MM原養(yǎng)型 MM+lay 賴氨酸缺陷型 MM+leu 亮氨酸缺陷型 MM+arg 精氨酸缺陷型 ? 注意: – (1)最初的培養(yǎng)基必須是非選擇性的,即各種突變型都能夠在其上生長(zhǎng); – (2)必須采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄈ缤坎蓟騽澗€法,以使培養(yǎng)物菌落之間要分開(kāi)。 –該方法原理與選擇培養(yǎng)法一致,但是采用影印法將在完全培養(yǎng)基上單菌落同時(shí)接種到不同選擇培養(yǎng)基上同時(shí)對(duì)所有菌落進(jìn)行選擇培養(yǎng),鑒定效率大大提高。 (三 ) 選擇培養(yǎng)法鑒定突變型與重組型 ? 許多細(xì)菌的突變都與培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分及培養(yǎng)條件有關(guān)。 ? 通常采用平板表面涂布法或劃線法可以獲得單菌落。?本章重點(diǎn)和難點(diǎn):了解細(xì)菌進(jìn)行遺傳物質(zhì)交流的方式,掌握細(xì)菌染色體作圖的方法。這種方法獲得的純系,稱為“菌種純”。 ? 營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選、鑒定: –選擇培養(yǎng)法是根據(jù)菌株在基本培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)將菌株分為原養(yǎng)型 (也稱為原生營(yíng)養(yǎng)型 )和營(yíng)養(yǎng)缺陷型 (在基本培養(yǎng)基上不能正常生長(zhǎng),只能在相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上生長(zhǎng) )。 影印培養(yǎng)法 ? 把長(zhǎng)有許多菌落的母種培養(yǎng)皿倒置于包有滅菌絲絨布的木質(zhì)圓柱印章上,使其沾上來(lái)自平板上的菌落。 ?接合 ?轉(zhuǎn)化 第 二節(jié) 細(xì)菌的染色體作圖 ?性導(dǎo) ?轉(zhuǎn)導(dǎo) 1. 接合現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn) 1946年 K12 菌株 A met bio thr+ leu+ thi+ 菌株 B met+ bio+ thr leu thi 一 . 接合 單基因突變率 10 –6 回復(fù)突變 1012 or 1018 如何產(chǎn)生? 原養(yǎng)型的出現(xiàn) 以 A、 B菌株直接接觸為前提 隔離培養(yǎng)后 不出現(xiàn)原養(yǎng)型 2. F因子及其轉(zhuǎn)移 1952年, A菌株 B菌株 鏈霉素 AB混合培養(yǎng),原養(yǎng)型重組體 鏈霉素 BA混合培養(yǎng) , 細(xì)菌接合中遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移 單向過(guò)程 (即從 A →B株) 細(xì)菌分為兩個(gè)類(lèi)群(兩種接合型 ) 供體 (或雄菌株) 受體 (或雌菌株) 2. F因子及其轉(zhuǎn)移 致育因子 (或 F性因子,也叫 F質(zhì)粒) 染色體外的一個(gè)共價(jià)環(huán)狀 DNA分子 ( 細(xì)菌 DNA的 2% 1/3基因與接合有關(guān) ) 接合:原核生物中,遺傳物質(zhì)從供體( “ 雄性 ” )轉(zhuǎn)移到受體( “ 雌性 ” )的過(guò)程。 ⑶ F 因子插入的位置不同,使不同的 Hfr菌株有自己穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移起點(diǎn)和次序。 ⑵偶數(shù)交換產(chǎn)生一個(gè)環(huán)狀染色體(存活的重組子), 外加一個(gè)線型斷片。 F′lac F′lac tsx 可攜帶一個(gè)至多個(gè)基因,甚至半條染色體。 Hfr2 ←pro +—leu+—gal+—lac+—F F﹣ lac strr F′lac+ strs F﹣ lac strr lac+
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