選修3現(xiàn)代生物科技專題知識點-wenkub
2023-04-22 04:04:54 本頁面
【正文】 片段的末端，形成磷酸二酯鍵。coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。一、基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。選修3《現(xiàn)代生物科技專題》知識點總結(jié) 專題1 （2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。②區(qū)別：EDNA連接酶DNA聚合酶不同點連接的DNA雙鏈單鏈模板不要模板要模板連接的對象2個DNA片段單個脫氧核苷酸加到已存在的單鏈DNA片段上相同點作用實質(zhì)形成磷酸二酯鍵化學(xué)本質(zhì)蛋白質(zhì)3.“分子運輸車”——運載體（1）運載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。（3）其它運載體：λ噬菌體的衍生物、動植物病毒二、基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。?編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。（2）目的：獲取大量的目的基因（3）原理：DNA雙鏈復(fù)制（4）過程：第一步：加熱至90～95℃，DNA解鏈為單鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物與兩條單鏈DNA結(jié)合；第三步：加熱至70～75℃，TaqDNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ?顯微注射技術(shù)。第四步：目的基因的檢測和表達，方法是采用DNA分子雜交(DNADNA)技術(shù)。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。：又稱為DNA診斷，是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?；驍y帶病原體。（1）過程：（2）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等。（2）動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。③溫度：適宜溫度：℃＋℃；pH：～。（1）哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞核移植（比較容易）和體細胞核移植（比較難）。（1）動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。（4）動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較：比較項目原理方法誘導(dǎo)手段用法植物體細胞雜交細胞膜的流動性去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動，聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠緣雜交的不親和性，獲得雜種植株動物細胞融合細胞膜的流動性使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合除應(yīng)用植物細胞雜交手段外，再加滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一（1）抗體：一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。（5）單克隆抗體的作用：① 作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 方法一：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，從中輸卵管沖取精子（針對卵母細胞的采集 實驗動物，家畜豬、羊等） 方法二：從屠宰母畜卵巢中采集方法三：借助超聲波探測儀、內(nèi)窺鏡、腹腔鏡等工具直接從活體母畜 卵巢中吸?。ㄡ槍Υ蠹倚蠡虼笮蛣游铮缗＃? 體外受精 卵母細胞的培養(yǎng)：在體外人工培養(yǎng)成熟 精子的采集：方法有假陰道法、手握法和電刺激法等精子的獲能：方法有培養(yǎng)法（通過獲能培養(yǎng)液）、化學(xué)誘導(dǎo)法（通過肝素或鈣離子載體A23187） 獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤菏芫韩@能的精子 ＋培養(yǎng)成熟的卵子 完成受精 胚胎早期培養(yǎng) 條件：受精卵在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng) 培養(yǎng)液成分：無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 三、 胚胎工程的應(yīng)用及前景概念：是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。供體主要職能只是產(chǎn)生優(yōu)良特性的胚胎，縮短繁殖周期胚胎移植成功與否關(guān)系到：供體和受體的生理狀況胚胎移植 1）供、受體生殖器官的生理變化相同，為胚胎提供相同的生理環(huán)境生理學(xué)基礎(chǔ) 2）早期胚胎沒有與母體子宮建立組織聯(lián)系，為胚胎收集提供可能3）受體對外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，為胚胎的存活提供可能4）胚胎能與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但其遺傳物質(zhì)不受影響1）供、受體的選擇和處理（使用激素進行同期發(fā)情處理、超數(shù)排卵處理）2）配種或人工受精基本程序 3）胚胎收集（沖卵）、檢查（胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚）、培養(yǎng)或保存（－196℃的液氮）4）胚胎移植：手術(shù)法（引出子宮和卵巢將其注入）；非手術(shù)法（用移植管將其送入子宮）5）移
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