【正文】 KlineMerck預(yù)防乙肝其他:Lepirudin，水蛭素RefludanBerlex Laboratories抗凝哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品（括號中為宿主細(xì)胞）激素（Hormones）:human somatropin，人生長激素Saizen (Mouse C127)Zorbtive(Mouse C127)Serono .Serono .矮小癥follitropin beta，促濾泡素bFollistim (CHO)Akzo Nobel不孕癥follitropin alfa，促濾泡素aGonalF（CHO）Serono .不孕癥human chorionic gonadotropin，人絨膜促性腺激素OvidrelSerono .不孕癥thyrotropin alfa，促甲狀腺素Thyrogen (CHO)Genzyme血清甲狀腺球蛋白測試酶（Enzymes）:alteplase, tPAActivase (CHO)Genentech急性心梗；肺栓塞，急性腦中風(fēng)urokinase，尿激酶Abbokinase(胎腎細(xì)胞培養(yǎng))Abbott肺栓塞Laronidase，粘多糖aL艾杜糖醛酸水解酶Aldurazyme (CHO)Genzyme粘多糖貯積病Imiglucerase，葡糖腦苷脂酶Cerezyme (CHO)GenzymeGaucher39。180。 到2004年2月，美國FDA批準(zhǔn)的生物技術(shù)藥物共79種，除去4種組織工程產(chǎn)品、3種治療性鼠源單抗、5種體內(nèi)診斷用單抗成像劑、3種由動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的非基因重組蛋白藥物（即尿激酶是人胎腎細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物、干擾素aN3和干擾素an1是人白細(xì)胞和成淋巴細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物），美國FDA批準(zhǔn)的基因重組蛋白質(zhì)藥物為64種。哺乳動(dòng)物細(xì)胞已成為生物技術(shù)藥物最重要的表達(dá)或生產(chǎn)系統(tǒng)，這種局面仍將持續(xù)并且其所占比例有逐年擴(kuò)大趨勢。治療性抗體有17種，分別是Avastin、Bexxar、Campath、Erbitux、Herceptin、Humira、Mylotarg、Orthoclone OKTRaptiva、Remicade、ReoPro、Rituxan、Simulect、Synagis、Xolair、Zenapax和Zevalin。（3）哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)或生產(chǎn)的生物技術(shù)藥物有53種，其中激素類有5種，分別是人生長激素、促濾泡素a、促濾泡素b、人絨膜促性腺激素、促甲狀腺素。這些產(chǎn)品都是結(jié)構(gòu)相對簡單、分子量較小的蛋白質(zhì)，主要為細(xì)胞因子類藥物，并且FDA在2000年1月2004年2月只批準(zhǔn)了4種大腸桿菌表達(dá)的產(chǎn)品，并且都是多肽類、分子量為幾kD的產(chǎn)品，表明細(xì)胞因子類藥物的開發(fā)空間越來越小，而且E 。 本文所列的生物技術(shù)藥物，幾乎涵蓋了所有美國、歐盟和中國的批準(zhǔn)上市的生物技術(shù)藥物，主要資料來源為美國食品藥品管理局(FDA，)、美國制藥協(xié)會(huì)()、美國生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)協(xié)會(huì)()、歐盟醫(yī)藥管理局(EMEA, )，以及每個(gè)生產(chǎn)廠商的網(wǎng)站及產(chǎn)品說明書，并且參考了文獻(xiàn)[25]。（6） 突變體視為不同產(chǎn)品，如胰島素突變體Humulog、Lantus、NovoLog等；又如EPO產(chǎn)品Epogen和EPO突變體產(chǎn)品 Aranesp。（非基因重組產(chǎn)物）等生物制品，也不包括FDA定義的New Biotech Drug中可引起細(xì)胞凋亡的物質(zhì)，如三氧化砷注射液（Trisenox）、硝酸鎵注射液（Ganite）等無機(jī)鹽、Fuzeon等化學(xué)合成多肽，小分子有機(jī)物質(zhì)Gleevec、Hepsera、Leustatin等。比較了美國、歐盟和中國生物制藥的特點(diǎn)。美國FDA批準(zhǔn)的以基因工程產(chǎn)品、抗體工程產(chǎn)品和細(xì)胞工程產(chǎn)品為主要代表的生物技術(shù)藥物共79種(18種為大腸桿菌表達(dá)，8種為酵母表達(dá)，53種為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn))，其中基因重組蛋白質(zhì)藥物為64種。歐盟批準(zhǔn)了49種基因重組酶、激素或細(xì)胞因子，11種基因重組治療性抗體和5種基因重組疫苗。關(guān)鍵詞：生物制藥產(chǎn)業(yè)，生物技術(shù)藥物，比較美國、歐盟和中國的藥管部門每年批準(zhǔn)的藥物中有很大一部分是已上市藥物的新適應(yīng)癥，有一部分是不同公司生產(chǎn)的相同產(chǎn)品，許多相同藥物重復(fù)計(jì)算，造成了統(tǒng)計(jì)上的很多混淆，使人誤認(rèn)為現(xiàn)在已批準(zhǔn)上市的生物技術(shù)藥物有幾百種，而實(shí)際上只有不到100種，即人們想象的生物技術(shù)藥物數(shù)量要遠(yuǎn)高于實(shí)際的數(shù)量。（3） 由于目前全球只有一種反義寡核苷酸藥Vitravene，并且它是化學(xué)合成藥物，不在本文統(tǒng)計(jì)范疇。（7） 劑型的改變、添加其他成分或化學(xué)修飾都視為一種產(chǎn)品。1 美國FDA批準(zhǔn)的生物技術(shù)藥物表1為截止到2004年2月美國FDA批準(zhǔn)的所有狹義的生物技術(shù)藥物。（2）酵母表達(dá)的基因重組生物技術(shù)藥物有8種，分別是：尿酸水解酶rasburicase、胰高血糖素GlucaGen、GMCSF、血小板衍生生長因子(rhPDGFBB)、乙肝疫苗(小S)、胰島素Novolin及其突變體NovoLog、水蛭素等。酶有7種，分別是組織型纖溶酶原激活劑（tPA）、尿激酶（urokinase）、粘多糖aL艾杜糖醛酸水解酶（laronidase）、葡糖腦苷脂酶（Imiglucerase）、半乳糖苷酶b（Algasidase beta）、DNA酶（dornase alfa）、tPA突變體TNKtPA等。有5種體內(nèi)診斷用抗體CEAScan、MyoScint、OncoScint、ProstaScint、Verluma。FDA在2000年以后批準(zhǔn)的創(chuàng)新生物技術(shù)藥物，用酵母表達(dá)的有2種，用大腸桿菌表達(dá)的產(chǎn)品只有4種，而通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的生物技術(shù)產(chǎn)品則有22種[2]，除了兩種組織工程產(chǎn)品外，其余都是蛋白類產(chǎn)品，這些蛋白都是分子量大、二硫鍵多、空間結(jié)構(gòu)復(fù)雜的糖蛋白，只有使用CHO等哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，這些蛋白的生產(chǎn)才成為可能。如果將氨基酸序列相同的產(chǎn)品視為一種產(chǎn)品，即E 、E 、BHK細(xì)胞和CHO細(xì)胞表達(dá)的凝血因子VIII、E ，那么，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的基因重組生物技術(shù)藥物只有60種，當(dāng)然，由于蛋白質(zhì)復(fù)性等限制，表達(dá)相同蛋白，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品比活性往往高于E ，如干擾素b，哺乳動(dòng)物細(xì)胞CHO細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品AVONEX174。107IU/mg。s病Algasidase beta，半乳糖苷酶bFabrazyme (CHO)GenzymeFabry39。s淋巴瘤Basiliximab (AntiCD25)Simulect (嵌合，鼠骨髓瘤)Novartis腎移植急性排斥Palivizumab(AntiF protein of RSV) Synagis (人源化，NS0)MedImmune防治小兒下呼吸道合胞病毒感染Omalizumab (AntiIgE)Xolair (人源化，CHO)Genentech/ Tanox/ Novartis中重度持續(xù)性哮喘Daclizumab (AntiCD25)Zenapax (人源化，CHO)HoffmannLa Roche腎移植急性排斥Ibritumomab tiuxetan (AntiCD20)Zevalin (鼠源，雜交瘤)IDECB細(xì)胞nonHodgkin39。因此，即便是歐盟，生物制藥的水平與美國相比仍有相當(dāng)差距。從表2還可看出，在生物制藥的發(fā)展初期，相同的藥物如胰島素、EPO、tPA、GCSF、干擾素、生長激素等EMEA批準(zhǔn)的時(shí)間比FDA晚56年時(shí)間，但在1990年代后期，同一產(chǎn)品批準(zhǔn)上市時(shí)間歐盟只比美國相差1年左右，而最近兩年批準(zhǔn)的治療性抗體藥物Alemtuzumab(Campath174。除了與FDA批準(zhǔn)的相同的生物技術(shù)藥物外，歐盟也批準(zhǔn)了幾種還未在美國獲準(zhǔn)上市的藥物（表2中帶*者），不過這些藥物并沒有特別之處，許多只是相同蛋白的不同亞型，如美國只批準(zhǔn)了EPOa，而歐盟除EPOa外，還批準(zhǔn)了EPOb 和EPOd；又如FDA只批準(zhǔn)了Algasidaseb治療Fabry’s病，而歐盟同時(shí)批準(zhǔn)了Algasidasea和b。nePoulencRorer GmbHChugai10/1993CHOtissue plasminogen activator，組織型纖溶酶原激活劑 (tPA) 急性心肌梗死Dr. Karl Thomae04/1994CHOGlucocerebrosidase，葡糖腦苷脂酶Gaucher39。)nonHodgkin39。腎移植急性排斥Roche02/1999CHOPalivizumab (Synagis174。)慢性淋巴細(xì)胞白血病Millenium/Ilex03/2001CHOAdalimumab(Humira174。表3是我國SFDA批準(zhǔn)上市的所有生物技術(shù)藥物（參考文獻(xiàn)[10]，有補(bǔ)充和修改），它反映了我國生物制藥的現(xiàn)狀；而表4是截止至2004年5月所有在中檢所完成或正在進(jìn)行的生物技術(shù)藥物[9]，它不僅反映了我國生物制藥的現(xiàn)狀，更反映了我國生物制藥的未來，因?yàn)樗羞M(jìn)行臨床前試驗(yàn)、臨床試驗(yàn)和生產(chǎn)的生物技術(shù)藥物都必須先通過中檢所的質(zhì)量控制和檢定，即表4就是我國生物制藥的全部。由于大腸桿菌的發(fā)酵技術(shù)以及產(chǎn)物的純化技術(shù)都是相對簡單的生物制藥生產(chǎn)技術(shù)，容易掌握，而這些產(chǎn)品的基因及蛋白序列都沒有專利保護(hù)（生產(chǎn)工藝的專利幾乎對產(chǎn)品的開發(fā)沒有任何限制作用），因此大腸桿菌表達(dá)的干擾素、白介素、GCSF、腫瘤壞死因子等生長因子在國內(nèi)都是十幾家甚至幾十家生產(chǎn)商，而生產(chǎn)規(guī)模均在十幾克甚至幾克/年水平即實(shí)驗(yàn)室規(guī)模，鮮有超過100g重組蛋白/年這種只能稱為中試規(guī)模生產(chǎn)能力的生產(chǎn)商。而CHO表達(dá)的乙肝疫苗雖然早在1989年便獲得新藥證書，而且國家和企業(yè)也投入了巨資使其產(chǎn)業(yè)化，但是動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)仍未很好解決，市場上至今仍難以看到基因重組乙肝疫苗(CHO)產(chǎn)品。以tPA生產(chǎn)為例，其CHO工程細(xì)胞表達(dá)水平為50mg/(106cellsd)[11]，要達(dá)到10kg tPA/年的規(guī)模，需要6個(gè)7000L反應(yīng)器[12]，加上幾級種子罐，總反應(yīng)器規(guī)模超過50000L，即反應(yīng)器生產(chǎn)能力為1kg重組蛋白/5000L反應(yīng)器/年，加上我國基因重組技術(shù)水平所限，得到的工程細(xì)胞的表達(dá)水平一般比國外低幾倍，只有幾十幾mg/(106cellsd)，因此如果全盤照抄并且要全面熟練掌握國外極為昂貴和復(fù)雜的大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，要達(dá)到100g/年規(guī)模，反應(yīng)器總規(guī)模起碼需要1000L以上，由于我國構(gòu)建的工程細(xì)胞系的表達(dá)水平較美國低510倍，生產(chǎn)成本則可能達(dá)到60000美元/g重組蛋白藥物，這種生產(chǎn)成本連美國都無力承擔(dān)，如果照搬國外的動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)，在中國發(fā)展以哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)為主流和趨勢的生物制藥產(chǎn)業(yè)是極不現(xiàn)實(shí)也是沒有前途的。我們的CHO工程細(xì)胞系的表達(dá)水平只有5mg proUK /(106cellsd)，與tPA相差10倍，對于50mg級/人使用劑量的產(chǎn)品，在國外這種表達(dá)水平的工程細(xì)胞系一般是沒有開發(fā)價(jià)值的，因?yàn)榘凑漳壳皣H上所謂最先進(jìn)和最通行的動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)，用表達(dá)水平為5mg/(106cellsd)的細(xì)胞系生產(chǎn)10kg/年產(chǎn)品需要反應(yīng)器的規(guī)模是500000升，即現(xiàn)在全球動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器的總和。 歐美出現(xiàn)拮抗作用為主的新生物技術(shù)藥物，而我國生物制藥仍是以細(xì)胞因子等激動(dòng)劑為主天然IL1拮抗劑、單抗中和作用類、受體類TNFαRII:Fc，抑制HIV1與CD4+細(xì)胞融合的融合蛋白Pro542等以拮抗作用，在臨床治療中表現(xiàn)出副作用小、療效好等突出特點(diǎn)。在中國由于構(gòu)建基因工程哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生物技術(shù)上游技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)等下游技術(shù)的落后，拮抗劑類藥物的研究開發(fā)非常有限，而以大腸桿菌表達(dá)的細(xì)胞因子類產(chǎn)品卻如火如荼（見表4），這種過多重復(fù)研發(fā)低分子量、結(jié)構(gòu)簡單的蛋白藥物，而基本放棄高分子量、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的蛋白質(zhì)的表達(dá)和生產(chǎn)的做法，嚴(yán)重背離了生物制藥發(fā)展的主流，將對我國生物制藥的未來帶來嚴(yán)重危害。退一步講，即便有專利保護(hù)，但2000年后許多生物技術(shù)藥物的專利已過期或即將過期[4, 18]，如EPO、tPA、胰島素、生長激素、干擾素a、b、GCSF、Cerezyme、Synagis等等，專利問題甚至成了我國生物制藥發(fā)展滯后的漂亮借口。毫無疑問，目前最好的溶栓藥物仍是tPA及其突變體，鏈激酶（SK）和葡激酶（SAK）是兩種細(xì)菌性蛋白，使用時(shí)有引發(fā)強(qiáng)烈過敏反應(yīng)的可能，只是價(jià)格便宜、容易生產(chǎn)而在中國等經(jīng)濟(jì)相對落后的國家和地區(qū)有部分市場。不過，歐美發(fā)達(dá)國家疫苗開發(fā)的重點(diǎn)一般集中在病毒性疫苗領(lǐng)域，細(xì)菌性疫苗主要集中在鼠疫、炭疽或傷寒等可制造生物恐怖的領(lǐng)域。只有在出現(xiàn)鼠源抗體人源化技術(shù)之后，治療性抗體的研究與開發(fā)才進(jìn)入飛速發(fā)展期?？傊?，我國目前生物制藥的發(fā)展嚴(yán)重偏離了全球生物制藥的發(fā)展方向，給人一種拾遺補(bǔ)缺的感覺，并沒有抓住生物制藥的主流，甚至和主流有漸行漸遠(yuǎn)的傾向，這種發(fā)展是非常令人擔(dān)憂的。）參考文獻(xiàn)[1] 胡顯文，陳惠鵬，湯仲明，馬清鈞. 生物制藥的現(xiàn)狀和未來（一）：歷史與與現(xiàn)實(shí)市場. 中國生物工程雜志. 2004[2] The Biopharmaceutical Industry: Overview, Prospects and Competitiveness Challenges. 2001. (hppt:/ /) [3] Bibby K, Davis J and Jones C. Biopharmaceuticals – Moving to Centre Stage. 2003 BioPeople North American Biotechnology Industry and Suppliers’ Guide. 311, 2003.