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微生物檢測手段及注意事項-wenkub

2023-04-19 23:25:22 本頁面
 

【正文】 出原菌液的含菌數(shù)。該法常用于食品中微生物的檢測,例如飲用水和牛奶的微生物限量檢查。這種計數(shù)方法比較粗放。借助不同的染料對菌體進行適當?shù)娜旧?,可以更方便的在顯微鏡下進行活菌計數(shù)。通過油鏡觀察,統(tǒng)計一定大格內(nèi)微生物的數(shù)量,即可算出1 mL菌液中所含的菌體數(shù)。菌絲長度測量法對于絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養(yǎng)基上測定一定時間內(nèi)菌絲生長的長度,或是利用一只一端開口并帶有刻度的細玻璃管,到入合適的培養(yǎng)基,臥放,在開口的一端接種微生物,一段時間后記錄其菌絲生長長度,借此衡量絲狀微生物的生長。將側(cè)臂插入光電比色計的比色座孔中,即可隨時測定其生長情況,而不必取菌液?!嫦抡婵崭稍?,干燥后稱重。干燥可用烘箱在105這種方法比較粗放,簡便,快速,但需要設(shè)定一致的處理條件,否則偏差很大,由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營養(yǎng)物,結(jié)果會有一定偏差。微生物計量法所以有必要介紹一下微生物生長情況的檢測方法。微生物的生長不同于其他生物的生長,微生物的個體生長在科研上有一定困難,通常情況下也沒有實際意義。一個微生物細胞在合適的外界條件下,不斷的吸收營養(yǎng)物質(zhì),并按自己的代謝方式進行新陳代謝。如果同化作用的速度超過了異化作用,則其原生質(zhì)的總量(重量,體積,大小)就不斷增加,于是出現(xiàn)了個體的生長現(xiàn)象。微生物是以量取勝的,因此,微生物的生長通常指群體的擴增。既然生長意味著原生質(zhì)含量的增加,所以測定的方法也都直接或間接的以次為根據(jù),而測定繁殖則都要建立在計數(shù)這一基礎(chǔ)上。體積測量法又稱測菌絲濃度法,通過測定一定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。稱干重法可用離心或過濾法測定?!婊?00如用過濾法,絲狀真菌可用濾紙過濾,細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾,過濾后用少量水洗滌,在40比濁法微生物的生長引起培養(yǎng)物混濁度的增高。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長監(jiān)測。2.這種方法簡便,直觀,快捷,但只適宜于單細胞狀態(tài)的微生物或絲狀微生物所產(chǎn)生的孢子進行計數(shù),并且所得結(jié)果是包括死細胞在內(nèi)的總菌數(shù)。如酵母活細胞計數(shù)可用美藍染色液,染色后在顯微鏡下觀察,活細胞為無色,而死細胞為藍色。并且需要配制已知顆粒濃度的懸液做標準。一般以直徑9 cm的平板上出現(xiàn)50~500個菌落為宜。試劑紙在平板計數(shù)法的基礎(chǔ)上,發(fā)展了小型商品化產(chǎn)品以供快速計數(shù)用。試劑紙法計數(shù)快捷準確,相比而言避免了平板計數(shù)法的人為操作誤差。間接測定法微生物的生長伴隨著一系列生理指標發(fā)生變化,例如酸堿度,發(fā)酵液中的含氮量,含糖量,產(chǎn)氣量等,與生長量相平行的生理指標很多,它們可作為生長測定的相對值。根據(jù)含氮量,即可測定粗蛋白的含量。測定含碳量將少量(~ mg)生物材料混入1 mL水或無機緩沖液中,用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100還原糖測定法還原糖通常是指單糖或寡糖,可以被微生物直接利用,通過還原糖的測定可間接反映微生物的生長狀況,常用于大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長的常規(guī)監(jiān)測。根據(jù)培養(yǎng)液中氨基氮的含量,可間接反映微生物的生長狀況。如在BMP2的發(fā)酵生產(chǎn)上,隨時監(jiān)測溶氧量的變化和酸堿度的變化,判斷細菌的長勢。試劑盒,培養(yǎng)基等手段抗干擾培養(yǎng)基和微生物數(shù)量快速檢測技術(shù)結(jié)合解決了傳統(tǒng)微生物檢測手段不能解決的難題,為建立一套完整的抗干擾微生物檢測系統(tǒng)奠定了堅實的基礎(chǔ)。如微生物生長時可將培養(yǎng)基中的大分子營養(yǎng)物經(jīng)代謝轉(zhuǎn)變?yōu)榛钴S小分子,電阻抗法可測試這種微弱變化,從而比傳統(tǒng)平板法更快速監(jiān)測微生物的存在及數(shù)量。都是微生物測定的范圍,需要紫外分光光度計測最大吸收波長??瞻兹缬盟觯枰x心洗滌菌體;空白如用不接種的培養(yǎng)基做就不需要洗滌,但是不接種的培養(yǎng)基要和接種的同時培養(yǎng)以求條件一致,另,用分光光度計測微生物的OD值為什么要把波長設(shè)為600 nm這個波長其實只是針對濁度,而分光光度計在600 nm處對濁度的反應(yīng)比較靈敏。%,%,(NH4)2SO4%,蛋白胨%,MgSO44%,酵母粉℃,發(fā)酵周期72 h,發(fā)酵液最高粘度14600 mPas左右。%,KH2PO4細菌纖維素菌種:Acetobacter%,蔗糖%,MgSO4菌種:。%,Na2HPO41%。發(fā)酵完畢后過濾收集粗纖維,再用4% NaOH溶液沖洗,%乙酸反復(fù)沖洗,即獲細菌纖維素。發(fā)酵參考環(huán)境:5~100噸罐,攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分,最高通風量1:1/分,pH在6左右,周期150小時。加入豆油能較大幅度地提高螺旋霉素的發(fā)酵效價。10%,液化淀粉%,各種無機鹽適量。4%,葡萄糖培養(yǎng)基B:黃豆餅粉%,NaC1 %,MgSO4發(fā)酵培養(yǎng)基:黃豆餅粉4%,NaCl %,CaCO3%。℃。%,淀粉%,每罐外加CoCl22%,面粉%,%。培養(yǎng)基:大豆蛋白胨發(fā)酵時間96 h左右。2%,黃豆餅粉%,每罐外加CoCl2培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件:玉米淀粉%,CaCO3%,豆油℃%,玉米
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