多殺菌素的生物合成-wenkub
2023-04-19 23:18:35 本頁(yè)面
【正文】 異，對(duì)主要害蟲進(jìn)行專門的抗性治理戰(zhàn)略。此外，多殺菌素對(duì)薊馬、虱、白蟻以及許多膜翅目害蟲也有較好的效果。表2數(shù)據(jù)表明，多殺菌素的用量和毒性均低于目前常用的幾種儲(chǔ)糧殺蟲劑。表2 多殺菌素與其它儲(chǔ)糧殺蟲劑的毒性比較特性多殺菌素甲基溴殺螟松磷化氫用量1ppm6－8ppm2ppmNA急性口服毒性LD503783－5000mg/kg （大鼠）1414mg/kg(老鼠)500900mg/kg(老鼠)急性皮膚毒性LD502000 mg/kg（兔子）2000mg/kg（老鼠）5000 mg/kg（老鼠）20005000 mg/kg（兔子）禽類急性口服毒性LD502000 mg/kg（麻鴨）1695mg/kg（麻鴨）2000 mg/kg（鵪鶉）（麻鴨）魚類急性口服毒性LD5030ppm（虹鱒魚） ppm（虹鱒魚）－103ppm（虹鱒魚）103ppm（虹鱒魚）4 多殺菌素的發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)利用放線菌多刺糖多孢菌發(fā)酵生產(chǎn)多殺菌素的研究在國(guó)內(nèi)還處于起步階段，產(chǎn)素水平比較低，距工業(yè)化生產(chǎn)還有較大的距離。孢子鏈外觀為珠狀，有孢子殼，孢子殼表面為針狀，這些針狀物約1mm，環(huán)繞在末端上。 菌種選育與其它抗生素產(chǎn)生菌一樣，多殺菌素產(chǎn)生菌的產(chǎn)素水平主要也決定于環(huán)境條件和自身的遺傳因子兩個(gè)方面。特別是在一些抗生素產(chǎn)生菌的遺傳背景和生物合成途徑尚未清楚的情況下，這種傳統(tǒng)的誘變方法仍是提高產(chǎn)量、改變菌種不良性狀的有效手段。 多殺菌素的搖瓶發(fā)酵將保藏于冷凍干燥管或液氮安瓿瓶中的菌種轉(zhuǎn)接斜面或平皿，斜面培養(yǎng)基及平皿分離培養(yǎng)基為：酪蛋白水解物，牛肉膏，葡萄糖，瓊脂。之后以5%的接種量接種于搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基。 多殺菌素的攪拌式生物反應(yīng)器發(fā)酵用來(lái)培養(yǎng)多刺糖多孢菌生產(chǎn)多殺菌素的培養(yǎng)基可以是多種培養(yǎng)基中的任意一種，但是從生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)、產(chǎn)率和產(chǎn)物易分離的角度看，需要優(yōu)選出某些培養(yǎng)基。菌體生長(zhǎng)的必需微量元素一般作為雜質(zhì)存在于培養(yǎng)基的其它成分中，其含量足以滿足微生物的生長(zhǎng)需要。由于多殺菌素的生產(chǎn)是一個(gè)需氧發(fā)酵過(guò)程，因此大規(guī)模發(fā)酵時(shí)應(yīng)通過(guò)通氣量和攪拌速度來(lái)維持罐內(nèi)溶氧在65％以上[8, 23]。 HPLC跟蹤檢測(cè)法：在發(fā)酵液中加入等體積的丙酮萃取，過(guò)濾除去菌體；濾液用NaOH調(diào)pH至13；上HP20ss吸附樹脂，用含0%～95%的甲醇∶乙腈＝1∶1(%乙酸鈉)溶液梯度洗脫多殺菌素A和D組分，利用HPLC跟蹤檢測(cè)，分段收集洗脫液；將多殺菌素洗脫液濃縮得濃縮液；將濃縮液用石油醚稀釋，上硅膠層析柱，用石油醚和甲醇梯度洗脫，利用HPLC跟蹤檢測(cè)，分段收集洗脫液，分別得到多殺菌素A和D的洗脫液[10, 24]。5 多殺菌素在儲(chǔ)糧害蟲防治中的應(yīng)用多殺菌素作為一種生物殺蟲劑，兼具生物農(nóng)藥的安全性和化學(xué)合成農(nóng)藥的速效性特點(diǎn)，目前有73個(gè)國(guó)家已注冊(cè)在250多種的作物上應(yīng)用。由于多殺菌素能有效防治主要儲(chǔ)糧害蟲，以及對(duì)環(huán)境無(wú)污染，被認(rèn)為是儲(chǔ)糧防護(hù)劑中最好的藥劑。研究結(jié)果總結(jié)于表表4和表5。多殺菌素通過(guò)破壞儲(chǔ)糧害蟲的各個(gè)蟲態(tài)來(lái)防止害蟲侵襲及其后代的生長(zhǎng)，因此，在實(shí)驗(yàn)室的研究不能完全說(shuō)明它的防治效果。在同樣條件下溫度從10到32℃變化時(shí)，沒(méi)有明顯的損失。表5 多殺菌素作為儲(chǔ)糧防護(hù)劑（1mg/kg）實(shí)驗(yàn)總結(jié)成蟲控制子代控制印度谷蛾－＋＋＋米蛾－＋＋＋粉斑螟－＋＋＋麥蛾－＋＋＋谷蠹＋＋＋＋＋＋雜擬谷盜＋＋＋＋＋＋銹赤扁谷盜＋＋＋＋＋＋米扁蟲＋＋＋＋＋＋米象＋＋＋＋ ＋＋＋赤擬谷盜＋＋＋＋鋸谷盜＋＋＋ ＋＋＋玉米象＋＋＋＋ ＋＋＋注：＋＋＋表示1ppm多殺菌素幾乎可以完全控制害蟲。在田間作物上，多殺菌素由于太陽(yáng)光照的紫外線引起光降解[32]，在1周后就失去活性[33]，而在倉(cāng)庫(kù)中，由于沒(méi)有光照，多殺菌素在1年的儲(chǔ)藏期內(nèi)幾乎不分解，殺蟲活性也幾乎沒(méi)有降低，持效時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)1～2年[28]。把多殺菌素噴灑在糧庫(kù)表面、縫隙或糧食加工廠的設(shè)備上，就能有效地防治各種儲(chǔ)糧害蟲。%菜喜懸浮劑對(duì)嗜蟲書虱、鋸谷盜和米象三種主要儲(chǔ)糧害蟲的毒力。它的優(yōu)越性能包括：防治范圍廣，對(duì)大部分儲(chǔ)糧害蟲具有極高的活性；應(yīng)用劑量低；對(duì)哺乳動(dòng)物、魚類、鳥類低毒；對(duì)益蟲安全；化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制獨(dú)特，無(wú)交互抗性。參考文獻(xiàn)[1] 靳祖訓(xùn). 中國(guó)加入WTO以后糧食儲(chǔ)藏科學(xué)與技術(shù)研究發(fā)展方向. 糧食儲(chǔ)藏, 2002,（4）：5～10.[2] 曾伶. 儲(chǔ)糧害蟲對(duì)磷化氫抗性的研究進(jìn)展. 昆蟲天敵, 1996, 18(4): 3742.[3] 梁權(quán). 引人注目的儲(chǔ)糧害蟲防治研究進(jìn)展評(píng)述. 糧食儲(chǔ)藏, 2001, (1): 6～11.[4] Thompson GD, Dutton R and Sparks TC. Spinosad—a case study: an example from a natural products discovery programme. Pest Manag Sci, 2000, 56(8): 696~702.[5] Salgado VL, Sheers JJ, Watson GB, et al. Studies on the mode of action of spinosad: the internal effective concentration and the concentration dependence on neural excitation. Pestic Biochem Physiol, 1998, 60: 103110.[6] Thompson GD, Michel KH, Yao RC, et al. The discovery of Saccharopolyspora spinosa and a new class of insect control products. Down to Earth, 1997, 52(1): 15.[7] Boeck LD, Chio H, Eaton TE, et . Eur Patent Appl,
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