【正文】 大吸收波長）——吸收曲線中，吸光度最大處的波長，是定性鑒別物質(zhì)的基礎(chǔ)。非光譜法——物質(zhì)與輻射相互作用時，測量輻射的某些性質(zhì)，如折射、散射、干涉、衍射、偏振等變化的分析方法。包括：紫外可見分光光度法（UVVis）、紅外光譜法（IR）、分子熒光光譜法（MFS）、分子磷光光譜法（MPS）等。 M+ hn散射光譜法——利用物質(zhì)對光的散射來進(jìn)行分析的方法。174。物質(zhì)分子中存在一系列電子能級，而每個電子能級中又包含一系列的振動和轉(zhuǎn)動能級。光是一種電磁輻射，具有波粒二象性。L1時測得的電池電動勢（電位）。原電池——電極反應(yīng)可以自發(fā)進(jìn)行，化學(xué)能被轉(zhuǎn)換為電能，化學(xué)體系的自由能降低。（二）電位分析法電化學(xué)——研究化學(xué)反應(yīng)中的電現(xiàn)象，電能與化學(xué)能的相互轉(zhuǎn)化及其規(guī)律的學(xué)科.電化學(xué)分析——利用物質(zhì)的電學(xué)及電化學(xué)性質(zhì)來進(jìn)行物質(zhì)定性和定量分析的一類分析方法，也就是通過測量工作電池的電參數(shù)（電壓、電流、電量、電阻、電容）的變化從而確定樣品溶液的濃度、化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行的程度或者直接稱定電極上產(chǎn)物的重量，對樣品溶液中待測組分定性、定量分析的一類方法。一、基礎(chǔ)內(nèi)容（一）緒論儀器分析——使用較特殊儀器，以物質(zhì)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)為基礎(chǔ)的分析方法，分為物理分析法和物理化學(xué)分析法，具有靈敏、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。電位分析法——將合適的指示電極與參比電極插入被測溶液中組成原電池，通過測定電池電動勢或指示電極電位的變化進(jìn)行分析的方法，分為直接電位法和電位滴定法。電解池——電極反應(yīng)不能自發(fā)進(jìn)行，當(dāng)有適當(dāng)?shù)耐饧与妷簳r，電極反應(yīng)才可以進(jìn)行，電能被轉(zhuǎn)換為化學(xué)能，化學(xué)體系的自由能增加。（三）光學(xué)分析導(dǎo)論光學(xué)分析法——基于物質(zhì)發(fā)射的電磁輻射或物質(zhì)與輻射相互作用后產(chǎn)生的輻射或發(fā)生信號變化來測定物質(zhì)的性質(zhì)、含量和結(jié)構(gòu)的一類儀器分析方法。電磁波譜——電磁輻射按波長順序排列，包括從γ射線到無線電波。吸收光譜法——利用物質(zhì)吸收光后所產(chǎn)生的吸收光譜來進(jìn)行分析的方法。M*發(fā)光光譜法（發(fā)射光譜法）——物質(zhì)中的粒子用一定的能量（如光、電、熱等）激發(fā)到高能級后，當(dāng)躍遷回低能級時，便產(chǎn)生出特征的發(fā)射光譜，利用此發(fā)射光譜進(jìn)行分析的方法。原子光譜法——以測量氣態(tài)原子或離子外層或內(nèi)層電子能級躍遷所產(chǎn)生的原子光譜（表現(xiàn)形式為線光譜）進(jìn)行分析的方法。線狀光譜——由若干條強(qiáng)度不同的譜線和暗區(qū)相間而成的光譜。分光光度計（光譜儀）——用來研究吸收、發(fā)射或熒光的電磁輻射強(qiáng)度和波長關(guān)系的儀器，包括五部分：光源、單色器、樣品容器、檢測器和讀出器件。吸收曲線——以波長λ為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)作圖所得曲線。特點(diǎn)：1）紅外吸收只有振轉(zhuǎn)躍遷，能量低；2）應(yīng)用范圍廣；3）分子結(jié)構(gòu)更為精細(xì)的表征；4）固、液、氣態(tài)樣均可用，且用量少、不破壞樣品；6）分析速度快；7）與色譜等聯(lián)用具有強(qiáng)大的定性功能。分為對稱伸縮振動(νs)和不對稱伸縮振動(νas)。線性分子具有3n5種振動方式，非線性分子有3n6種?；鶊F(tuán)頻率——與一定的結(jié)構(gòu)單元相聯(lián)系的振動頻率。NMR定量方法：要求： ； ； ； ； ，取平均值。 通過求出樣品中某組質(zhì)子的峰高，求出樣品的含量。蛋白質(zhì)分子量測定： 多肽與蛋白質(zhì)的ESIMS分析采用正離子方式進(jìn)行，ESIMS可以產(chǎn)生多電荷離子峰使檢測的分子質(zhì)量范圍擴(kuò)大。振動弛豫——同一電子能級電子通過與溶劑分子碰撞從高的振動能級返回到最低的振動能級。熒光熄滅——指熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或溶質(zhì)分子相互作用，引起熒光強(qiáng)度降低的現(xiàn)象。Stokes位移——熒光波長大于激發(fā)光波長的現(xiàn)象。熒光熄滅法——利用熒光強(qiáng)度的減小與熒光熄滅劑的濃度呈線性關(guān)系來進(jìn)行測定含量的方法。定量分析方法：工作曲線法；比例法；聯(lián)立方程式法（多組分）紫外可見光法也有工作曲線法和聯(lián)立方程式法，兩者也都有單波長和雙波長法。原子能級：原子有原子核和核外電子組成，核外電子按照一定規(guī)律排列在一定軌道繞核運(yùn)動，由于不同軌道的能級不同，所以每個電子的能量也由它所處的能級所決定的，意即不同能量的電子發(fā)生躍遷時所需的激發(fā)能是不一樣的。由于不同元素原子由基態(tài)向第一激發(fā)態(tài)躍遷所需能量不同，因而這種共振線也各具特征，稱為第一共振吸收線，也稱為元素的特征譜線。色譜流出曲線或色譜圖——樣品注入色譜柱后，信號隨時間變化的曲線。流動相平均流速： ，L為柱長保留時間(tR )——試樣從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰極大值時的時間。即t’R = tR t0死體積(V0)——色譜柱管內(nèi)固定相顆粒間空隙、色譜儀管路和連接頭間空隙和檢測器間隙的總和。r2,1只與柱溫和固定相性質(zhì)有關(guān)，而與柱內(nèi)徑、柱長、填充情況及流動相流速無關(guān)，又稱選擇因子或者分離因子α：反映兩組分間的分離情況，α=1，則兩組分無法分離，而α越大則分離越好。峰（底）寬W——色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)上切線與基線的交點(diǎn)間的距離。塔板理論假定：1）塔板之間不連續(xù)；2）塔板之間無分子擴(kuò)散；3）組分在各塔板內(nèi)兩相間的分配瞬間達(dá)到平衡（達(dá)一次平衡所需柱長為理論塔板高度H）；4）某組分在所有塔板上的分配系數(shù)相同；5）流動相以不連續(xù)方式加入（以一個一個的塔板體積加入）。色譜分離條件選擇：兩組份峰間距足夠遠(yuǎn)：由各組份在兩相間的分配系數(shù)（k）決定，即由色譜過程的熱力學(xué)性質(zhì)決定。相同沸點(diǎn)的極性組分先出。能形成氫鍵的試樣氫鍵型氫鍵力按形成氫鍵的能力大小出柱。（2）Dg與載氣的分子量的平方根成反比，隨柱溫升高而增大，隨柱壓增大而減小。色譜柱評價色譜柱效率——峰尖 評價：理論板高(H)、理論塔板數(shù)(n) 對策：將Van Deemter 各因素優(yōu)化選擇性——峰的分離度 評價：分離因子或分離度(R) 對策：選擇極性相當(dāng)?shù)墓潭ㄏ喾宓膶ΨQ性——吸附現(xiàn)象 評價：拖尾因子(f) 對策：色譜柱進(jìn)一步老化柱溫選擇原則：不超過固定液最高使用溫度；在良好分離前提下，盡可能采用低柱溫。進(jìn)樣速度快，試樣不超載。固定相GC一般選定一種載氣，然后通過改變色譜柱（固定相）以及操作參數(shù)（柱溫和載氣流速）來優(yōu)化分離；LC則往往是選定色譜柱后，通過改變流動相的種類、組成以及操作參數(shù)（柱溫）來優(yōu)化分離。（十二）高效液相色譜法高效液相色譜法（HPLC）——在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，引入了氣相色譜法的理論和實(shí)驗技術(shù)，以高壓輸送流動相，采用高效固定相及高靈敏度檢測器，發(fā)展而成的現(xiàn)代液相色譜分析方法。（II）HPLC與GC比較相同：兼具分離和分析功能，均可以在線檢測 區(qū)別：分析對象和流動相的差別GC：分析可氣化、熱穩(wěn)定性好且沸點(diǎn)較低的樣品；采用惰性氣體為流動相，組分與流動相無親合作用力，只與固定相作用；實(shí)驗過程常需加溫。其均一性和穩(wěn)定性好；柱效高，重現(xiàn)性好；分離選擇性高。非極性鍵合相：表面基團(tuán)為非極性烴基，如十八烷基（C18）、辛烷基（C8）和苯基等，最常用是C18（ODS）?；瘜W(xué)鍵合相色譜法可分為正相色譜法和反相色譜法，最常用的是反相色譜法。適合于分離非極性或弱極性化合物，可用于分子型化合物及離子型或可離子化的化合物（加入抑制劑）的分離。反相鍵合相色譜中，組分極性越弱，疏水性越強(qiáng)，與固定相的親和力越大，越后洗脫出柱；流動相極性越小，洗脫能力越強(qiáng)，保留時間越短（水增多，保留時間增加）。使用前，需用微孔濾膜過濾，同時還要脫氣。為降低流動相的傳質(zhì)阻抗，應(yīng)降低固定相的粒度，同時選用粘度比較小的流動相，使得分子擴(kuò)散比較容易。等度洗脫——在同一分析周期內(nèi)流動相組成保持恒定的洗脫方式。梯度洗脫可以縮短分析時間、提高分離度、改善