蛋白質(zhì)類藥物的分離純-wenkub
2023-01-21 08:54:22 本頁(yè)面
【正文】 透析 層析 分子篩 超速離心 2）蛋白質(zhì)的分離純化方法 定 義： 加入大量中性鹽以破壞 Pr的穩(wěn)定因素并 使從溶液中沉淀析出的現(xiàn)象 。 ● 去除變性因素后，恢復(fù)原有空間構(gòu)象和生物活性。 ? 改變?nèi)芤旱臈l件，將影響蛋白質(zhì)的溶解性質(zhì) ? 在適當(dāng)?shù)臈l件下，蛋白質(zhì)能夠從溶液中沉淀出來(lái) 蛋白質(zhì)沉淀 —— 蛋白質(zhì)的肽鏈相互聚集，從溶液中析出。 ① 兩性解離與等電點(diǎn) P rN H 3 +C O O HP rN H 3 +C O OP rN H 2C O OO HH +O HH +兼 性 離 子p H = p I陽(yáng) 離 子p H p I陰 離 子p H p I 利用蛋白質(zhì)兩性電離的性質(zhì)，可通過(guò)電泳、離子交換層析、等電聚焦等技術(shù)分離蛋白質(zhì)。四 .生物藥物的制備 生產(chǎn)過(guò)程 上游構(gòu)建 （基因工程） 發(fā)酵生產(chǎn) (發(fā)酵工程 ) 純化制備 ● 來(lái)源：微生物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞； ● 分離和純化過(guò)程都必須在溫和條件下進(jìn)行。 蛋白質(zhì)分子量很大，分子粒徑為 1～ 100nm，屬親水膠體在水中能形成穩(wěn)定膠體溶液。 + + 蛋白質(zhì)膠體顆粒的沉淀 + + + + + （沉淀） （疏水膠體） （疏水膠體） ● 沉淀過(guò)程中，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)都不發(fā)生變化， 在適當(dāng)條件下，可以重新溶解形成溶液。 蛋白質(zhì)的非變性沉淀 天 然 狀 態(tài) ，有 催 化 活 性非 折 疊 狀 態(tài) ，無(wú) 活 性 ，二 硫 鍵 被 還 原天 然 狀 態(tài) ，二 硫 鍵 恢 復(fù) ，而 且 正 確 配 對(duì) 尿 素 或2 巰 基 乙 醇 去 除變 性 因 素核糖核酸酶可逆變性 ?在強(qiáng)烈沉淀?xiàng)l件下，蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)均被破壞，沉淀不能重新溶解于水。 原 理： 破壞 Pr兩個(gè)穩(wěn)定因素：水化膜和電荷層 。 原理： ● Pr分子在溶液中可帶凈負(fù)電荷或凈正電荷，可在電場(chǎng)中移動(dòng)。 ?? rEQV6?電泳過(guò)程示意圖
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