豬乙型腦炎及其防制-wenkub
2022-11-02 17:33:10 本頁(yè)面
【正文】 2 plaque purifications in PHK SA14142/PHK 9 passages and plague purificationsin PDK cell culture SA14142/PDK I 疫苗毒株的傳代減毒過(guò)程 The derivation of live attenuated vaccine clones of JEV by passage of the wildtype strain SA14 in cell culture ? 日本有 2種活疫苗供獸用 。 云南省的流行高峰也較華中推遲 1個(gè)月 。 ?JEV在 PHK、豬腎原代細(xì)胞、 BHK21和 Vero上可增殖到較高的滴度，而且有明顯的細(xì)胞病變 (CPE)，其特點(diǎn)主要是圓縮和脫落 。不同毒株血凝反應(yīng)的最適 pH不完全相同。 ? JEV在環(huán)境中不穩(wěn)定 ， 易被滅活 。 I 乙型腦炎的危害（豬） ?乙腦病毒 (Japanese encephalitis virus, JEV)的分離和鑒定最早報(bào)道于 1935年 （ 日本 ） 。 I 乙型腦炎的危害（人） ? 多種動(dòng)物如豬、馬、牛、山羊、綿羊、猴和家禽很易感染乙腦，其它如兔、大鼠、鴿、犬、鴨、野禽和爬行類也易感，小鼠和某些蜥蜴能被實(shí)驗(yàn)感染。 懷孕婦女感染后導(dǎo)致流產(chǎn) 。 I 乙型腦炎 乙腦對(duì)人類危害巨大，是人類中樞神經(jīng)系統(tǒng) (CNS)最常見(jiàn)的蟲(chóng)媒病之一，是包括印度次大陸在內(nèi)的整個(gè)亞洲引起人類死亡和殘疾的一個(gè)主要原因 。 1871年，日本。 ?夏秋季節(jié)流行，曾稱為“夏季腦炎”。 I 乙型腦炎的危害（人） 時(shí) 間 國(guó) 別 病 例 病死率 1924年 日本 6000 60% 1958年 越南 6897 1965年 日本 30005000 1999年 馬來(lái)西亞 I 我國(guó)是乙腦發(fā)病人數(shù)最多的國(guó)家，占世界總發(fā)病數(shù)的 80%以上。 ?全球每年感染乙腦人數(shù)超過(guò) 1千萬(wàn) ， 大多數(shù)呈隱性感染(亞臨床感染 )， 其發(fā)病率一般為 1:251:1000， 平均為1:200。其臨床癥狀隨患病動(dòng)物的種類不同而異，牛、羊、家禽多為隱性感染，馬可發(fā)生嚴(yán)重的腦炎。 ?黃病毒科 (Flaviviridae)。 I 乙型腦炎的分類及理化性質(zhì) ?JEV囊膜外表有穗狀突起，提純的穗狀突起具有血凝活性，其成分為糖蛋白。 I 血凝特性 JEV的抗原性較強(qiáng)，自然或人工感染的動(dòng)物一般都能產(chǎn)生較高效價(jià)的中和抗體、血凝抑制抗體和補(bǔ)體結(jié)合抗體。 ?目前國(guó)內(nèi)外用于增殖 JEV的細(xì)胞主要有 PHK， BHK21和鼠腦 。 I 流行季節(jié) Transmission cycle of JEV I 傳播循環(huán) 乙型腦炎的防制 ?滅蚊是控制乙腦流行的一項(xiàng)重要措施 藥物滅蚊法、生物學(xué)和生態(tài)學(xué)滅蚊法 ?免疫接種是一種最有效的預(yù)防措施 豬是 JEV的擴(kuò)增動(dòng)物，預(yù)防豬感染本病是防止人患乙腦的重要措施，在蚊蟲(chóng)活動(dòng)季節(jié)開(kāi)始前 1個(gè)月或配種前 1個(gè)月注射疫苗。 一為 M株，經(jīng)胎鼠皮膚培養(yǎng)傳代致弱，供豬用，亞洲其它國(guó)家有的也用此苗；一為 ML17株， JaOH0566株經(jīng) 37℃ →33 ℃ →30 ℃ →27 ℃ →25 ℃ 減毒而獲得 。第 2次免疫 1周后， HI抗體為 2， 2周為 8， 3周達(dá)到 16。疫苗在 20℃ 的保存期至少為 2年，在 4℃ 8℃ 可保存 1年半。 該病是我國(guó)及亞州地區(qū)的一種嚴(yán)重傳染病 ， 我國(guó)除少數(shù)省 ， 自治區(qū)外 ， 大部分地區(qū)都有 JE流行 。 ? 牛、羊及家禽多為隱性感染，馬可發(fā)生嚴(yán)重的腦炎 ? JE的病原為乙腦病毒 (Japanese encephalitis Virus,JEV) ? JEV原屬于報(bào)膜病毒科 (Tongaviridae)乙組蟲(chóng)媒病毒的黃病毒屬 (Flavivrius) ? 1984年另立為黃病毒科 (Flaviridae) ? JEV分三個(gè)清型： JaGAr,Nakayama和Mie(intremediate type) ? JEV粒子呈球形，呈 20而體對(duì)稱，有囊膜，毒粒直徑為 45nm50nm(核心 30nm)，是黃病毒科最小的病毒之一 ? JEV在環(huán)境中不穩(wěn)定 ? 10%滅活兔血清和 %乳白蛋白水解物等對(duì)病毒有較好的保護(hù)作用 ? JEV大多數(shù)毒株能凝集鵝、鴿及初生雛雞的紅細(xì)胞， pH以 ? 乙腦病毒可在 79日齡的雞胚和多種組織培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)增殖 ? 通常只在倉(cāng)鼠腎細(xì)胞、豬腎和羊胎腎細(xì)胞上恒定地引起細(xì)胞病變 (CPE) 乙腦病毒的分子生物學(xué)研究進(jìn)展 ? JEV為單股正鏈 RNA病毒，基因組長(zhǎng) 11Kb，沉降系數(shù)為 42S，具有感染性 ? 整個(gè)基因組由 5’端非編碼區(qū) (5’noncoding region,5’NCR)，一個(gè)幾乎跨越整個(gè)基因組的單一開(kāi)放閱讀框 (ORF)和 3’端非偏碼區(qū) (3’NCR)構(gòu)成，無(wú)亞基因組結(jié)構(gòu) ? ORF大小為 ，共編碼約 3430個(gè)氨基酸基 ? ORF編碼 1個(gè)多聚蛋白前體 ? C蛋白起調(diào)節(jié)蛋白和保護(hù)基因組免受核酸酶破壞的作用，與病毒的復(fù)制和生物合成密切相關(guān) ? M蛋白參與病毒的感染過(guò)程，它能誘生具有輕度中和作用的抗體 ? E蛋白為主要結(jié)構(gòu)蛋白，該蛋白在大多數(shù)黃病毒中是保守的，它是毒粒表面的重要成份，由它形成的表面抗原決定簇具有血凝活性和中活作用，能刺激機(jī)體產(chǎn)生血凝抑制抗體和中和抗體，可保護(hù)機(jī)體免受病毒的攻擊，與病毒的吸附，侵入，致病和誘導(dǎo)縮主的免疫應(yīng)答等作用密切相關(guān) ? NS1為分泌型糖蛋白，其具體功能不清，但認(rèn)為其參與病毒復(fù)制的早期階段 ,NS1還可能參與病毒的組裝和釋放，是主要的抗原成份之一。 ? 上清用冷丙酮沉淀 ， 離心后沉淀冷凍抽干 ,加入生理鹽水溶解 ， 上清作為病毒抗原 。 ? 在 490nm波長(zhǎng)下測(cè)定 OD值 。 ? 定性： S/P≥ 陽(yáng)性界限判為陽(yáng)性 ? 定量： S/P≥ 陽(yáng)性界限 的血清最高稀釋倍數(shù)作為效價(jià) 。 ? 采用 OD值之差作為病毒蛋白抗原與血清反應(yīng)產(chǎn)生的 OD
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