【正文】 ve a significant protective effect may be related to decreased inhibition of lipid peroxidation and antifree radical damage. Key words Ginkgo biloba extract。結(jié)合本文結(jié)果 ,我們認為 銀杏葉提取物 ( 黃酮類 )是一個很有前景的保肝藥物 ,值得進一步深入研究開發(fā)。較單純給予 CCL4腹腔注射的小鼠明顯減輕。黃酮類和菇類酷是發(fā)揮其獨特藥理活性的有效成分，且是銀杏葉及其中間品和植物藥制劑質(zhì)量標準化的重要依據(jù)，其余 70%成分為藥效不明顯或非藥物部分。 我們發(fā)現(xiàn) , EGB 的藥理作用銀杏 (GinkgobilobaL)是我國特產(chǎn)的古代孑遺植物之一，中醫(yī)藥中常用銀杏種子。對雄性小鼠來說，中高濃度的 EGB 比聯(lián)苯雙酯陽性藥的效果顯著，具有保護肝臟的作用。 綜合分析得出結(jié)果 聯(lián)苯雙酯陽性藥是一種治療肝炎的降酶藥物，即可減輕因 CCL4所致的肝臟損害，對 CCL4 所致的肝臟微粒體脂質(zhì)過氧化， CCL4代謝為 CO 有抑制作用，降低 MDA 的含量，升高 SOD 活性。雄性小鼠模型組與空白組相比較，模型組小鼠肝組織中 SOD活性無顯著差異。 SOD活力的變化的結(jié)果分析 結(jié)果顯示：雌性小鼠模型組與空白組相比較，模型組小鼠肝組織中 SOD活性非常顯著降低 (P )。 160 mg GP 10 mg 溶劑 %Tween80 177。 kg1 177。 kg1 177。 mg protein1) 雌 空白 — 177。模型組與吐溫對照組相比較，模型組小鼠肝組織中 MDA含量無顯著差異。模型組與吐溫對照組相比較，模型組小鼠肝組織中 MDA含量非常顯著上升 (P )。 kg1 177。 kg1 177。 模型 — 177。 ※※ 160 mg ※ GP 10 mg 吐溫 %Tween80 177。 50% 247。 計算： 血清（漿）、心肌灌流液、腎透析液、細胞培養(yǎng)液等總 SOD 活力計算： (1)定義：每亳升反應(yīng)液中 SOD 抑制率達 50%時所對應(yīng)的 SOD 量為一個 SOD 活力單位（ U）。 試劑五：粉劑 1 支，用時加 70℃ 80℃蒸餾水 溶解后備用，若加熱過程中水分 蒸發(fā)減少，此時必須用蒸餾水補充至 ，配好后的試劑避光 4℃冷藏保存 6 個月。 試劑四：液體 350ul1 支， 4℃保存，不可冷凍； 4 號稀釋液 5ml1 瓶， 4℃保存 6 個月。 顯色劑的配制：按試劑五：試劑六：冰乙酸 =3： 3： 2 的體積比配顯色劑， 4℃ 避光冷藏 3 個月。配好的試劑四 4℃保存，不可冷凍。 試劑二：液體 10ml1 瓶， 4℃保存 6 個月。 計算公式： ① 血清（漿）中 MDA 含量計算公式： 血清（漿）中 MDA 含量 測定管吸光度 測定空白管吸光度 （ nmol/ml） = 標準品濃度 樣本測定前 標準管吸光度 標準空白管吸光度 （ 10nmol/ml） 稀釋倍數(shù) ② 組織中 MDA 含量計算公式： 測定管吸光度 測定空白管吸光度 組織中 MDA 含量 = ——————————————— 標準品濃度 247。食油取 ,肝組織、心肌、肌肉組織、螺旋藻等，取 5%或 10%勻漿 較好。 規(guī)范操作方法： 操作表： 標準管 標準空白管 測定管 測定空白管 10nmol/ml 標準品（ ml） 無水乙醇（ ml） 測試樣品（ ml） 3 試劑一（ ml） 混勻（搖動幾下試管架） 試劑二（ ml） 3 3 3 3 試劑三（ ml） 1 1 1 50%冰醋酸 1 旋渦混勻器混勻，試管口用保鮮膜扎緊，用針頭刺一小孔， 95℃水?。ɑ蛴缅侀_蓋煮沸） 40 分鐘，取出后流水冷卻，然后 35004000 轉(zhuǎn) /分，離心 10 分鐘，（ 3000 轉(zhuǎn) /分以下離心時間需延 長，目的使沉淀完全）。 試劑三： 粉劑 1 支，用時將粉劑加入到 90℃ 100℃的熱雙蒸水 30ml 中，（在溶解過程中可適當加熱），充分溶解后用雙蒸水補足至 30ml 再加冰醋酸 30ml，混勻，配好的試劑避光冷藏。 [注 ]：冰醋酸又名乙酸，一般的醫(yī)藥公司、化劑公司均有售，要購 AR 級即分析純級的乙酸較好，乙酸含量為 99%以上。 試劑二：液體 12ml1 瓶，用時每瓶加 340ml 雙蒸水混勻， 4℃冷藏（注意不要碰到皮膚上）。 測試所需儀器設(shè)備 可見光分光光度計，可調(diào)到 95℃左右的恒溫水浴箱（或者鋁鍋內(nèi)放幾個去掉蓋子的易拉罐，將罐壁及底部穿數(shù)十個孔，以便水的進入，用來代替水浴箱。因而測試 MDA 的量常?？煞从硻C體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接地反映出細胞損傷的程度。如：醛基（丙二醛 MDA）、酮基、羥基、羰基、氫過氧基可內(nèi)過氧基，以及新的氧自由基等。 稱肝臟、脾 脫臼處死小鼠，剖取肝臟、脾稱重。 離心機（ KDC1044 低速離心機），科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司生產(chǎn)。 總蛋白測定試劑盒 北京北化康泰臨床 試劑有限公司 批號： 20202028 實驗動物 小白鼠 清潔級昆明種♀♂兼用，體重 24+2g，北京醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所提供，許可證號： SCXK（京） 20200001 儀器 電子稱： ACSAJJ 交直流電子計價秤，中航第一集團太原航空儀表有限公司生產(chǎn)。本實驗就是通過設(shè)計一系列的對比實驗，研究 EGB 是否確實有 此作用。藥理試驗表明銀杏黃酮類化合物有使冠狀血 管及其他血管擴張的作用。肝小葉中央壞死和肝細胞脂肪變性是其主要病變。 CCl4肝損傷小鼠 。方法 ： 清潔級昆明種 小鼠 ♀♂兼用， 隨機分為 空白對照組、吐溫對照組、模型對照組、聯(lián)苯雙酯陽性對照組、實驗組（銀杏葉提取物低濃度、銀杏葉提取物中濃度、銀杏葉提取物高濃度） ，用四氯化碳皮下注射法建立慢性肝損傷模型，分別用生理鹽水或藥物灌胃治療。 檢測肝組織中脂質(zhì)過氧化物丙二醛（ MDA） 的 含量和超氧化物歧化 酶 (SOD)的活力 并加以探討。 MDA 含量； SOD 活力 近幾年來由于大量有害物質(zhì)的產(chǎn)生，人們可能在不經(jīng)意間，接觸大量有害物質(zhì)，例如 CCL4, CCL4致急性中毒性肝炎、肝中毒四氯化碳進入肝細胞后，使線粒體膜的脂質(zhì)溶解，從而影響線粒體 的結(jié)構(gòu)和功能，使酶蛋白質(zhì)的合成減少，造成酶的破壞，因而影響代謝功能和能量的合成，致死。 有一種陽性藥聯(lián)苯雙酯，它 是一種治療肝炎的降酶藥物，即可減輕因 CCL4所致的肝臟損害，對CCL4 所致的肝臟微粒體脂質(zhì)過 氧化， CCL4 代謝為 CO 有抑制作用 ，對肝臟具有保護作用，雖治療肝臟的藥物很多，但效果不是很好。銀杏黃酮有抗自由基、抑制脂質(zhì)過氧化作用 。 1 材料與方法 實驗材料 藥物 銀杏葉提取物（黃銅類） 江蘇同源堂生物工程公司 批號： 老師幫填一下