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20xx年醫(yī)學(xué)專題—愛愛醫(yī)資源—免疫膠乳濁度分析在自動生化分析儀上應(yīng)用(已修改)

2024-11-12 00:30 本頁面
 

【正文】 免疫膠乳濁度分析 在自動(z236。d242。ng)生化分析儀上的應(yīng)用,第一頁,共四十八頁。,免疫(miǎny236。)比濁回顧 免疫膠乳濁度分析(immunolatex turbidimetry) 在生化分析儀上進(jìn)行測定的有關(guān)問題,2,第二頁,共四十八頁。,免疫(miǎny236。)比濁,3,免疫檢測的基礎(chǔ)(jīchǔ) 抗原抗體間的特異性反應(yīng) 手工操作 自動化分析,核心(h233。xīn)—基礎(chǔ),第三頁,共四十八頁。,免疫比濁技術(shù)是在免疫沉淀反應(yīng)(Precipitation)檢測法的基礎(chǔ)上建立的。 最早應(yīng)用的免疫沉淀反應(yīng)是Ouchterlony在1948年建立的瓊脂雙向擴(kuò)散法。 1965年Mancini等和Fahey等分別建立了可以定量的單向(輻射狀)免疫擴(kuò)散技術(shù)。 Laurell等1966年建立了電免疫擴(kuò)散法,使報(bào)告結(jié)果(jiē guǒ)的時(shí)間由單向免疫擴(kuò)散法的≥24h縮短到45h。,4,免疫(miǎny236。)比濁,第四頁,共四十八頁。,經(jīng)典的免疫沉淀試驗(yàn)通常是在抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)的終點(diǎn)判定結(jié)果,存在費(fèi)時(shí)(f232。ish237。)、操作繁瑣、敏感度低(10~100mg/L)、不能自動化等缺陷。 根據(jù)沉淀反應(yīng)時(shí),抗原抗體結(jié)合后可使反應(yīng)系統(tǒng)透光度發(fā)生改變,建立了以測定透光度為特征的微量免疫沉淀測定法法,既免疫濁度測定技術(shù)。,5,免疫(miǎny236。)比濁,第五頁,共四十八頁。,1967年由Richie首次報(bào)告,20世紀(jì)70年代逐步完善,80年代初期初步應(yīng)用(y236。ngy242。ng)臨床常規(guī)檢查。 抗原抗體在液相(特殊的緩沖液)中快速結(jié)合,形成抗原抗體復(fù)合物,反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。,6,免疫(miǎny236。)比濁,第六頁,共四十八頁。,液相中抗原與抗體的反應(yīng)結(jié)果與兩者的濃度比例有關(guān)。抗原或抗體顯著過量時(shí),都只能生成少量的可溶性免疫復(fù)合物,分子極小,不適于免疫比濁法檢測。 免疫比濁技術(shù)要求溶液中抗體要保持中等過量,此時(shí)免疫復(fù)合物(immunecomplex,IC)仍是可溶性的。 在這種情況下,抗原與抗體的反應(yīng)遵循質(zhì)量作用定律(d236。nglǜ)(Ag+Ab=Ag.Ab),形成IC的量是抗原或抗體的函數(shù)。 當(dāng)抗體固定時(shí),IC的量與抗原的量成正比。,7,免疫(miǎny236。)比濁,第七頁,共四十八頁。,8,LIGHT SOURCE,FILTER,REACTION CUVETTE,TURBIDIMETRIC DETECTOR,NEPHELOMETRIC DETECTOR,IC,散射(sǎnsh232。)比濁、透射比濁 光路圖,θ,透射(t242。u sh232。)光+散射光,散,光,射,平光線(guāngxi224。n),第八頁,共四十八頁。,目前,國內(nèi)開展的各項(xiàng)免疫檢驗(yàn),均求使用國家食品(sh237。pǐn)藥品監(jiān)督管理局(SFDA)準(zhǔn)入和批準(zhǔn)的儀器和試劑。這樣做不僅能使各項(xiàng)檢查更加統(tǒng)一,規(guī)范,各實(shí)驗(yàn)室之間檢查結(jié)果更具可比性,而且也可避免很多不必要的醫(yī)療糾紛。 免疫比濁技術(shù)中散射比濁法目前均用獲國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)批準(zhǔn)進(jìn)口的自動化分析儀器和配套的各種檢測項(xiàng)目的專用試劑。 透射比濁法(生化分析儀)可用國產(chǎn)試劑。,9,——全國臨床(l237。n chu225。nɡ)檢驗(yàn)操作規(guī)程 第3版,透射還是(h225。i shi)散射,第九頁,共四十八頁。,散射比濁 專用(zhuāny242。ng)儀器 專用配套試劑 原裝進(jìn)口試劑昂貴,透射比濁 生化分析儀 開放試劑(sh236。j236。) (可用國產(chǎn)試劑),10,速率(s249。lǜ)法和終點(diǎn)法測定; 速率法的靈敏度和特異性優(yōu)于終點(diǎn)法;終點(diǎn)法的穩(wěn)定性較好;,透射還是散射,第十頁,共四十八頁。,目前,由于技術(shù)的發(fā)展,兩種比濁法的靈敏度和特異性已接近,而全自動生化儀的自動化程度和精密度要勝于專用散射比濁儀,透射免疫比濁法在臨床上的應(yīng)用日益廣泛。生化分析儀通過免疫
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