動物細(xì)胞工程(使用)(已修改)
2025-03-16 16:15 本頁面
【正文】 動物細(xì)胞工程 ◆ 動物細(xì)胞培養(yǎng) ◆ 動物細(xì)胞融合 ◆ 單克隆抗體制備 ◆ 動物體細(xì)胞 核移植技術(shù)和克隆動物 動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞融合 單克隆抗體技術(shù) 核移植 動物細(xì)胞工程常用技術(shù) 其它動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ) 一、動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念： 概念： 動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物有機體中取出相關(guān)的 組織 ,將它分散成 單個細(xì)胞 ,然后 ,放在適宜的 培養(yǎng)基中 ,讓這些 細(xì)胞生長和增殖 . 原理： 細(xì)胞增殖 定義： 人們通常將動物組織 消化后 的初次培養(yǎng) 稱為原代培養(yǎng)。 胰蛋白酶處理 取出組織 胚胎或幼齡動物器官組織 剪碎 單個細(xì)胞 細(xì)胞懸液 轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng) （ 貼壁生長 長成單層細(xì)胞。有 接觸抑制 現(xiàn)象） 。 ① 原代培養(yǎng) 3：過程 圖示 原代培養(yǎng) 強調(diào)一：細(xì)胞貼壁過程 ■ 細(xì)胞貼壁： 在培養(yǎng)瓶懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。 ■ 培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求： 表面光滑、無毒、易于帖附。 ■ 當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時 ,細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。 強調(diào)二：接觸抑制 定義： 當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞處于 接觸抑制后 , 用 胰蛋白酶 處理 ,使細(xì)胞從瓶壁上 脫離 下來 ,然后加入新的培養(yǎng)液 ,將 細(xì)胞分離稀釋 ,并 從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi) ,這個過程稱 傳代培養(yǎng) .（ 分瓶培養(yǎng)的過程 ） ② 傳代培養(yǎng) 細(xì)胞懸浮液 10代細(xì)胞 50代細(xì)胞 無限傳代 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 知識點小結(jié)：各個新名詞之間的聯(lián)系 多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長和分裂。 隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會停止分裂增殖 : 1）無菌無毒 的環(huán)境： 適宜的溫度： 人和哺乳動物細(xì)胞最適溫度為177。 ℃ 。 適宜的酸堿度： PH： 液體合成培養(yǎng)基：（ 糖、氨基酸）、促生長因子、（水、無機鹽、微量元素） 等；通常還需加入 血漿、血清等 天然成分。 4）氣體環(huán)境： 2）營養(yǎng)： 3）溫度和 pH： “95％空氣 +5％ CO2”的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的； CO2維持培養(yǎng)液的 PH。 對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具 無菌處理； 培養(yǎng)液中 添加抗生素 防止培養(yǎng)過程中污染； 定期更換培養(yǎng)液 以清除代謝產(chǎn)物，防止對培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。 : 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 主要用于作為受體細(xì)胞 ，判斷某種物質(zhì)的毒性 、藥理、病理研究 如用于篩選抗癌藥物 植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：見導(dǎo)學(xué)教程 P31表 比較項目 植物組織培養(yǎng) 動物細(xì)胞培養(yǎng) 原理 細(xì)胞的全能性 細(xì)胞增殖 培養(yǎng)基性質(zhì) 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 促 動物血清 培養(yǎng)結(jié)果 植物體 細(xì)胞株、細(xì)胞系 培養(yǎng)目的 快速繁殖、培育無病毒植株 獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白 取材 植物幼嫩部分或花藥 胚胎或幼齡動物的器官或組織 其他條件 無菌無毒，適宜條件 無菌無毒，適宜條件 二、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物 定義： 動物核移植是將動物的 一個細(xì)胞的細(xì)胞核 ,移入一個已經(jīng) 去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中 .使其重組并發(fā)育成一個 新的胚胎 ,這個新的胚胎最終發(fā)育為 動物個體 . 分類： 胚胎核移植、
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