【正文】 1 石嘴山 市 第 一中 學(xué) 高三生物實驗總結(jié) 一、 生物實驗中試劑的作用及實驗方法總結(jié) （ 一）化學(xué)物質(zhì)的檢測方法 ①淀粉 ——碘液 (藍(lán)色 ) ②還原性糖 ——斐林試劑 \班氏試劑 (磚紅色 ) ③ CO2——Ca(OH) 2 溶液 (澄清石灰水變渾濁 ) ④乳酸 ——pH 試紙 ⑤ O2——余燼復(fù)然 ⑥蛋白質(zhì) ——被蛋白酶水解、雙縮脲試劑 (紫色 ) ⑦脂肪 ——蘇丹Ⅲ染液 (橘黃色）、蘇丹Ⅳ染液 (紅色） ⑧ DNA——二苯胺 (藍(lán)色 ) ⑨染色體 ——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液 （ 二 ）實驗條件的控制方法 加水中氧氣 ——泵入空氣或氧 氣或放入綠 色植物 減少水中氧氣 ——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水 除去容器中 CO2——NaOH 溶液 除去葉中原有淀粉 ——置于黑暗環(huán)境 除去葉中葉綠素 ——酒精水浴加熱 除去光合對呼吸干擾 ——給植株遮光 如何得到單色光 ——棱鏡色散或透明薄膜濾光 血液抗疑 ——加入檸檬酸鈉 線粒體提取 ——細(xì)胞勻漿離心 （ 三）實驗結(jié)果的顯示方法 ①光合速度 ——O2 釋放量或 CO2 吸收量或有機(jī)物生成量 ◆水生植物可依氣泡的產(chǎn)生量或產(chǎn)生速率； ◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時間內(nèi)上浮的葉片數(shù)目 ； ◆植物體上的葉片可依指示劑（如碘液）處理后葉片顏色深淺。 ② 呼吸速度 ——O2 吸收量或 CO2 釋放量或有機(jī)物消耗量 ③ 原子或分子轉(zhuǎn)移途徑 ——放射性同位素示蹤 ④ 細(xì)胞液濃度大小 、 植物細(xì)胞是否死亡 ——質(zhì)壁分離 ⑤ 甲狀腺激素 —動物耗氧量 ,發(fā)育速度等 ⑥ 生長激素 —生長速度 (體重、體長變化 )⑦ 胰島素作用 —動物活動狀態(tài) 四 、實驗中控制溫度的方法 還原糖， DNA 鑒定 ——沸水浴加熱 酶促反應(yīng) ——水浴保溫 用酒精溶解葉中的葉綠素 ——酒精要隔水加熱、 細(xì)胞和組織培養(yǎng) ——恒溫箱培養(yǎng) 五 、實驗中常用器材 和藥品的使用 NaOH：用于吸收 CO2 或改變?nèi)芤旱?pH Ca(OH) 2：鑒定 CO2 CaCl 2：提高細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性 HCl：解離或改變?nèi)芤旱?pH NaHCO3：提供 CO2 NaCl：配制生理鹽水或用于提取 DNA 瓊脂：激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基的凝固劑 酒精：用于消毒、提純 DNA、葉片脫色及配制解離液 蔗糖：測定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原 濾紙：過濾或紙層析 1紗布、尼龍布：過濾，遮光 1龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色 六 、一些常見的實驗方法 ⑴ 根據(jù)顏色來確定某種物質(zhì)的存在： 淀粉 +I2(藍(lán)色 )。還原性糖 +斐林試劑 (磚紅色 )。脂肪 +蘇丹 Ⅲ (橘黃 )或 +蘇丹 Ⅳ(紅色 )。蛋白質(zhì) +雙縮脲試劑 (紫色 )。 （ 2） 用熒光標(biāo)記法來證明細(xì)胞膜具有一定的流動性 （ 3） 同位素示蹤法：光合作用產(chǎn)生氧氣的來源 。 光合作用中二氧化碳的去向 。 噬菌體侵染細(xì)菌實驗證明 DNA 是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì) 。 DNA 的復(fù)制是半保留復(fù)制。 (4)獲得無籽果實的方法 :用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄 的子房，如無籽蕃茄 。誘導(dǎo)染色體變異，如無籽西瓜。 2 (5)確定某種激素功能的方法： 飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。 (6)確定傳入、傳出神經(jīng)的功能： 刺激 +觀察效應(yīng)器的反應(yīng)或測定神經(jīng)上的電位變化。 (7)植物雜交的方法 雌雄同花：花蕾期去雄 +套袋 +開花期人工授粉 +套袋 雌雄異花：花蕾期雌花套袋 +開花期人工授粉 +套袋 （ 8） 確定某一顯性個體基因型的方法：測交 。 該顯性個體自交。 (9)確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法： ① 具有一對相對性狀的純合體的雜交 ② 自交，觀察后代是否有性狀分離 （ 10） 確定某一個體是否具有抗性基因的方法： 確定小麥?zhǔn)欠窬哂锌逛P病基因，用銹病菌去侵染，一段時間后，觀察有無銹斑出現(xiàn)。 （ 11） 育種的方法：雜交育種 。人工誘變育種 。單倍體育種 ?；蚬こ逃N 。細(xì)胞工程育種 。多倍體育種等。 （ 12） 測定種群密度的方法：樣方法 。 標(biāo)志重捕法 （ 13） 生態(tài)瓶的制作方法 。瓶必須透明，且封閉 (14)測定細(xì)菌的數(shù)目 顯微計數(shù) 七 、實驗技術(shù) 光學(xué)顯微鏡的使用 ： 適用于觀察生物的微觀結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，包括光鏡下可看到的各種細(xì)胞器。 臨時裝片、切片和涂片的制作技術(shù) ： 適用于顯微觀察， 凡需在顯微鏡下觀察的生物材料，必須先制成臨時裝片、切片或涂片。如 “觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原的實驗 ”中要制作洋蔥表皮的臨時裝片，在生物組織中脂肪的鑒定中要制作花生種子的切片等。 研磨和過濾技術(shù) ： 適用于從生物組織中提取物質(zhì)，如酶、色素等。 研磨時要先將生物材料切碎，然后加入研磨劑〈常用 SiO2〉、提取液及其他必要物質(zhì)，充分研磨后，往往要進(jìn)行過濾，以除去濾渣，所用過濾器具則根據(jù)需要或或根據(jù)試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。 解離技術(shù) ： 用于破壞細(xì)胞壁，分散植物細(xì)胞，制作臨時裝 片。 恒溫技術(shù) ： 適用于有酶參加的生化反應(yīng)，一般用水浴或恒溫箱。根據(jù)題目要求選用。 紙層析技術(shù) ： 適用于溶液中物質(zhì)分離。重要步驟包括制備濾紙條、畫濾液細(xì)線、層析分離。 根尖培養(yǎng)技術(shù) ： 觀察植物根尖有絲分裂的實驗 二、 設(shè)計實驗步驟常用 “四步法 ”。 第一步：共性處理實驗材料，均等分組并編號。選擇實驗材料時要注意應(yīng)用一些表示等量的描述性語言，如： “生長一致的 ”， “年 齡相同的，體重一致的 ”等等。分成多少組要視題目中所給的信息而定，（一般情況分兩組）。編號最好用 A、 B、 C 或甲、乙、丙，而不用 3 避免 與實驗步驟相混淆。 第二步：遵循單因子變量原則，對照處理各組材料。方法為一組為對照組（往往為處于正常生理狀態(tài)的），其余為實驗組，對照組與實驗組只能有一個實驗條件不同（單因子變量），其他條件要注意強(qiáng)調(diào)出相同來，這是重要的得分點或失分點。至于變量是什么要根據(jù)具體題目來確定。 第三步：相同條件培養(yǎng)（飼養(yǎng)、保溫）相同時間。 第四步：觀察記錄實驗結(jié)果。 實驗結(jié)果的預(yù)測（預(yù)期）；首先要根據(jù)題目判斷該題是驗證性實驗還是探究性實驗，如果是驗證性實驗，則結(jié)果只有一個，即題目中要證明的內(nèi)容。如果是探究性實驗，則結(jié)果一般 有三種： ① 實驗組等于對照組，說明研究的條件對實驗無影響。 ② 實驗組大于對照組 ,說明研究的條件對實驗有影響 ,且影響是正相關(guān)。 ③ 實驗組小于對照組 ,說明研究的條件對實驗有影響 ,且影響是負(fù)相關(guān)。 三、教材中實驗總結(jié) （一） 用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞 3 實驗?zāi)康模?1）使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞，比較不同細(xì)胞的異同點 2）運(yùn)用制作臨時裝片的方法 實驗原理： 利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，例如：可以看到葉綠體、線粒體等細(xì)胞器，從而能夠區(qū)別不同的細(xì)胞。 方法步驟 ：第一步：轉(zhuǎn)動反光鏡使視野明亮 第二步：在低倍鏡下觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野中央 第三步：用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍物鏡 問（ 1）是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮？為什么？ （ 提示：低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數(shù)??；高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數(shù)高。 ） 問（ 2）為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？（ 提示：如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。 ） 問（ 3）用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后，轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋行不行？ （ 提示：不行。用高倍鏡觀察，只需微調(diào)即可。轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，容易壓壞玻片。 ） 第四步：觀察并用細(xì) 準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦。 （二） 觀察 DNA和 RNA在細(xì)胞中的分布 原理： 甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對 DNA 和 RNA 的親和力不同，甲基綠使 DNA 呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使 RNA 呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示 DNA 和 RNA 在細(xì)胞中的分布。 ① 鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞， ② 同時使染色體中的 DNA 與蛋白質(zhì)分離，有利于 DNA 和染色劑結(jié) 合。 實驗材料用具： 人的口腔上皮細(xì)胞或蠶豆葉表皮，洋蔥表皮 ， 大燒杯，小燒杯，溫度計，滴管，消毒牙簽，載玻片，蓋玻片，鐵架臺，石棉網(wǎng)，火柴，酒精燈，吸水紙，顯微鏡 、 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的 NaCl溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的鹽酸，吡羅紅甲基綠染色劑 實驗方法步驟： 取口腔上皮細(xì)胞制片 載玻片要潔凈，滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的 NaCl 溶液 用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞 將載玻片在酒精燈下烘干 防止污跡干擾觀察效果 保持細(xì)胞原有形態(tài) 消毒為防止感染， 漱口避免取材失敗 固定裝片 水解 1．在小 燒杯中加入 30 mL 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%的鹽酸，將烘干的載玻片放入小燒杯中； 2． 30 ℃水浴保溫 5 min。 改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，促進(jìn)染色體的DNA 與蛋白質(zhì)分離而被染色 沖冼 用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片 10S 洗去殘留在外的鹽酸 染色 1．用吸水紙吸去載玻片上多余的水分； 2．用吡羅紅甲基綠染色劑 2滴染色 5 min； 3．吸去多余的染色 4．蓋上