第四章(質(zhì)粒載體)(已修改)
2025-08-27 20:32 本頁面
【正文】 第四章 質(zhì)粒載體? 第一節(jié) 質(zhì)粒載體概況? 第二節(jié) 質(zhì)粒 DNA的復(fù)制與拷貝數(shù)的控制? 第三節(jié) 質(zhì)粒載體的構(gòu)建? 第四節(jié) 重要的質(zhì)粒載體? 第五節(jié) 質(zhì)粒載體的穩(wěn)定性問題第一 節(jié) 質(zhì) 粒 載 體的概況? 一 質(zhì)粒的定義、命名、分類、分布? 二 質(zhì)粒的基本生物學(xué)特性? 三 質(zhì)粒的分離與純化 一、質(zhì)粒的定義、命名、分類、分布? 定義：質(zhì)粒是一類寄宿于細(xì)胞內(nèi)，獨(dú)立于染色體外的自我復(fù)制并穩(wěn)定遺傳的環(huán)狀雙鏈 DNA分子。? 命名：小寫字母 p代表質(zhì)粒，兩個(gè)大寫字母代表發(fā)明者，后接實(shí)驗(yàn)編號，? 分類：? 分布：1）根據(jù)質(zhì)粒的性狀特征 ① F質(zhì)粒： 又叫 F因子或性質(zhì)粒 (sexplasmid)。 ② R質(zhì)粒： 通稱抗藥性因子。編碼有一種或數(shù) 種抗菌素抗性基因， ? Co1質(zhì)粒 ： 產(chǎn)生大腸桿菌素因子。編碼 有控制大腸桿菌素合成的基因質(zhì)粒分類? 2）根據(jù)質(zhì)粒的傳遞性? 3）根據(jù)質(zhì)粒的拷貝數(shù)? 4）根據(jù)質(zhì)粒和細(xì)菌的關(guān)系? 、大小和數(shù)目二、質(zhì)粒的基本特性? ? 2．質(zhì)粒 DNA構(gòu)型 ? 3． 質(zhì)粒 DNA編碼的表型 ? 4．質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)移 ? 5． 質(zhì)粒 DNA的遷移作用 ? 6．質(zhì)粒 DNA的復(fù)制類型 ? 7．質(zhì)粒的不親和性? 8. 其他特性 質(zhì)粒的基本生物學(xué)特性? ? 2．質(zhì) 粒 DNA? (圖 4—1 )大腸桿菌質(zhì)粒分子的結(jié)構(gòu)示意圖質(zhì)粒 DNA分子具有 三種構(gòu)型? SC構(gòu)型 : 共價(jià)閉合環(huán)形 DNA(cccDNA)， ? 超螺旋的 SC構(gòu)型 ；? OC構(gòu)型 : 開環(huán) DNA(ocDNA)， OC構(gòu)型 ；? L構(gòu)型 : 發(fā)生雙鏈斷裂而形成線性分子? (LDNA)， L構(gòu)型 。（圖 4－ 2）環(huán)形雙鏈DNA質(zhì)粒分子的三種構(gòu)型 質(zhì)粒 DNA的分子構(gòu)型 質(zhì)粒 DNA瓊脂糖 凝膠電泳模式圖 (a) (b)OC SCL DNA編碼的表型? 抗性特征 、 代謝特征 、 修飾寄主生活方式的因子，? 質(zhì)粒 DNA編碼的基因有 產(chǎn)生抗菌素的基因 、芳香族化合物降解基因 、 糖酵解基因、產(chǎn)生腸毒素基因、重金屬抗性基因、產(chǎn)生細(xì)菌素的基因、誘發(fā)植物腫瘤基因、產(chǎn)生硫化氫基因，以及寄主控制的限制與修飾系統(tǒng)的基因等4．質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)移? (1) 接合型質(zhì)粒的自我傳遞? (2) F質(zhì)粒? (3 )質(zhì)粒 DNA的接合轉(zhuǎn)移? ① 細(xì)胞交配對的形成? ② 質(zhì)粒 DNA的轉(zhuǎn)移細(xì)菌的接合作用? 在合適的條件下，雄性細(xì)胞和雌性細(xì)胞混合培養(yǎng)，形成 雌 — 雄細(xì)胞配對過程為細(xì)菌的接合作用 (conjugation)。? 在雌雄細(xì)胞配對期間，雄性細(xì)胞中的 F因子按滾環(huán)復(fù)制模式 (rolling circle replication model)，(1) 接合型質(zhì)粒的自我傳遞? 格蘭氏陰性細(xì)菌的質(zhì)粒分成接合型和非接合型。? 接合型的質(zhì)粒 (conjugative plasm
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