組培實驗外植體選擇處理及接種培養(yǎng)(已修改)
2025-08-17 11:07 本頁面
【正文】 4 無菌操作技術 一、外植體的選擇與處理 二、外植體的接種和培養(yǎng) 三、試管苗的馴化與移栽 四、常見問題與解決措施 一、外植體的選擇與處理 （一） 外植體的選擇 （二） 外植體的處理 （三）污染問題及解決措施 （一）外植體的選擇 植物組織培養(yǎng)的主要作業(yè)大致包括：外植體的選擇與處理、培養(yǎng)基的制備、器具的消毒、無菌操作和環(huán)境條件的調(diào)控。 1. 選擇優(yōu)良的種質(zhì) 無論是離體培養(yǎng)繁殖種苗，或者是進行生物技術研究，培養(yǎng)材料的選擇都要從主要的植物入手，選取性狀優(yōu)良的種質(zhì)，或特殊的基因型。對材料的選擇要有明確的目的，具有一定的代表性，提高成功機率，增加其實用價值。 2. 選擇健壯的植株 組織培養(yǎng)用的材料 ， 最好從生長健壯的無病蟲的植株上 ， 選取發(fā)育正常的器官或組織 。 因為這些器官或組織代謝旺盛 ， 再生能力強 ， 比較容易培養(yǎng)成功 。 組織培養(yǎng)選擇材料時 ， 要注意植物的生長季節(jié)和植物的生長發(fā)育階段 。 如快速繁殖時應在植株生長的最適時期取材 ， 這樣不僅成活率高 ， 而且生長速度快 ， 增殖率高；花藥培養(yǎng)應在花粉發(fā)育到單核期時取材 ， 這時比較容易形成愈傷組織 。 建立無菌材料時，取材的大小根據(jù)不同植物材料而異。 材料太大易污染，也不需要；材料太小，多形成愈傷組織，甚至難于成活。一般 選取培養(yǎng)材料的大小，在 。如果是胚胎培養(yǎng)或脫毒培養(yǎng)的材料，則應更小。 (二 )外植體的處理 外植體在接種前先要滅菌， 在滅菌前， 又先要進行預處理。 植物材料一般采取的預處理方法是，先對植物組織進行修整，去掉不需要的部分，將準備使用的植物材料在流水中沖洗干凈。 經(jīng)過預處理的植物材料，其表面仍有很多細菌和真菌，因此還需進一步滅菌。 常規(guī)的表面滅菌處理方法 ① 把材料放進 75%的酒精中約 30～ 60s。 ② 用 %的 CaCl0（次氯酸鈣）溶液浸泡 15～ 20min。 ③ 無菌蒸餾水沖洗 3～ 5次。 ④ 滅菌時進行搖動，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸。
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