12核苷酸代謝(已修改)
2025-08-16 07:30 本頁面
【正文】 12 核苷酸代謝 核苷酸的生物學(xué)功能 核酸合成的原料（ DNA和 RNA） 提供能量 （ ATP、 GTP、 CTP、 UTP） 代謝調(diào)節(jié) （ cAMP、 cGMP） 組成輔酶 （ NAD、 NADP、 FAD、 CoA） 活性載體 （ UDP、 CDP） 第一節(jié)、核酸的酶促降解 第二節(jié)、核苷酸的生物合成 第三節(jié)、核苷酸的分解代謝 第一節(jié)、核酸的酶促降解 核糖或脫氧核糖（戊糖） 嘌呤或嘧啶（堿基） 核苷酶 （核苷磷酸化酶，核苷水解酶） 磷酸 核苷（堿基－戊糖） 核苷酸酶 （磷酸單酯酶） 核苷酸（堿基－戊糖－磷酸） 核酸酶 食物核蛋白 核酸（ DNA和 RNA） 蛋白質(zhì) 胃酸及蛋白酶 核糖核酸酶 脫氧核糖核酸酶 核酸酶? 根據(jù)對(duì)底物專一性 內(nèi)切核酸酶 (限制性內(nèi)切酶 ) 外切核酸酶 根據(jù)作用部位 核酸酶 ? ⑵ 內(nèi)切核酸酶 作用于核酸鏈的 一端 ，逐個(gè)水解下核苷酸，是非特異性的磷酸二酯酶 例 1 例 2 特異地水解多核苷酸 內(nèi)部各鍵 ，是 特異性強(qiáng)的磷酸二酯酶 例 1 例 2 ⑴ 外切核酸酶 脫氧核糖核酸酶 ? 專一水解 DNA ? 作為內(nèi)切酶：切斷雙鏈，或切斷單鏈 ? 作為外切酶： 539。 ?339。切割或 339。?539。切割 DNaseⅠ （牛胰脫氧核糖核酸酶） 產(chǎn)物： 539。磷酸為末端的寡核苷酸 DNaseⅡ （牛脾脫氧核糖核酸酶） 產(chǎn)物： 339。磷酸為末端的寡核苷酸 限制性內(nèi)切酶 阿爾伯 (1929～ ) 瑞士微生物遺傳學(xué)家 (1931～ ) 美國分子生物學(xué)家、遺傳學(xué)家 內(nèi)森斯 (1928～ ) 美國微生物遺傳學(xué)家 通過凝膠電泳可觀察 到 DNA分子經(jīng)過剪 切后形成的片斷 科學(xué)家們正在制備限制性內(nèi)切酶， 限制性內(nèi)切酶被稱為是基因工程 中的“分子剪刀”。 限制性核酸內(nèi)切酶 存在于細(xì)菌體內(nèi) 識(shí)別水解外源雙鏈 DNA 限制外源 DNA，保護(hù)自身 DNA，對(duì)細(xì)菌遺傳性狀有穩(wěn)定作用 甲基化酶 限制 修飾體系 限制性核酸內(nèi)切酶 ? 識(shí)別 雙鏈 DNA內(nèi)部特異位點(diǎn)并裂解磷酸二酯鍵 ? 位點(diǎn)長度： 4～ 8堿基對(duì)，通常具有 回文結(jié)構(gòu) ? 出現(xiàn)兩種末端 粘性末端 粘端 平頭末端 平端 ? 分類： Ⅰ 型、 Ⅱ 型、 Ⅲ 型 ? 命名： EcoRⅠ (E：屬名； co：種名；R：株； Ⅰ ：序號(hào) ) 粘性末端 與平頭末端 E co R ⅠG A A T T CC T T A A G5′ 3′5′3′5′ GC T T A AA A T T CG3′3′5′粘性末端S m a ⅠC C C G G GG G G C C C5′3′3′5′5′ C C CG G GG G GC C C3′3′5′平頭末端 常用工具酶 酶 功 能 限制性核酸內(nèi)切酶 識(shí)別特異序列，切割 DNA DNA連接酶 催化 DNA中相鄰的 5’磷酸基和 3’羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，使 DNA切口封合或使兩個(gè) DNA分子或片段連接 DNA聚合酶 Ⅰ 1）合成雙鏈 cDNA的第二條鏈； 2）缺口平移制作高比活探針 3） DNA序列分析 4）填補(bǔ) 3’末端 反轉(zhuǎn)錄酶 1）合成 cDNA 2）替代 DNA聚合酶 I進(jìn)行填補(bǔ)、標(biāo)記或
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