【正文】
擬南芥基因克隆的策略與途徑擬南芥(Arabidopsis thaliana)是一種模式植物,具有基因組?。?25 Mbp)、生長周期短等特點(diǎn),而且基因組測序已經(jīng)完成(The Arabidopsis Genomic Initiative, 2000)。同時(shí),擬南芥屬十字花科(Cruciferae),具有高等植物的一般特點(diǎn),擬南芥研究中所取得成果很容易用于其它高等植物包括農(nóng)作物的研究,產(chǎn)生重大的經(jīng)濟(jì)效益,特別是十字花科中還有許多重要的經(jīng)濟(jì)作物,與人類的生產(chǎn)生活密切相關(guān),因此目前擬南芥的研究越來越多地受到國際植物學(xué)及各國政府的重視?;?gene)是遺傳物質(zhì)的最基本單位,也是所有生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。不論要揭示某個(gè)基因的功能,還是要改變某個(gè)基因的功能,都必須首先將所要研究的基因克隆出來。特定基因的克隆是整個(gè)基因工程或分子生物學(xué)的起點(diǎn)。本文就基因克隆的幾種常用方法介紹如下。圖位克隆Mapbased cloning, also known as positional cloning, first proposed by Alan Coulson of the University of Cambridge in 1986, Gene isolated by this method is based on functional genes in the genome has a relatively stable loci, in the use of genetic linkage analysis or chromosomal abnormalities of separate groups will queue into the chromosome of a specific location, By constructing highdensity molecular linkage map, to find molecular markers tightly linked with the aimed gene, continued to narrow the candidate region and then clone the gene and to clarify its function and biochemical mechanisms.圖位克?。╩apbased clonig)又稱定位克?。╬ositoinal cloning),1986年首先由劍橋大學(xué)的Alan Coulson提出。用該方法分離基因是根據(jù)功能基因在基因組中都有相對(duì)較穩(wěn)定的基因座,在利用分離群體的遺傳連鎖分析或染色體異常將基因佇到染色體的1個(gè)具體位置的基礎(chǔ)上,通過構(gòu)建高密度的分子連鎖圖,找到與目的基因緊密連鎖的分子標(biāo)記,不斷縮小候選區(qū)域進(jìn)而克隆該基因,并闡明其功能和生化機(jī)制。用該方法分離基因是根據(jù)目的基因在染色體上的位置進(jìn)行的,無需預(yù)先知道基因的DNA序列,也無需預(yù)先知道其表達(dá)產(chǎn)物的有