疫熒光技術(shù)的臨床應(yīng)用(已修改)
2025-06-07 13:33 本頁面
【正文】 免疫熒光技術(shù)臨床的應(yīng)用 天水市第一人民醫(yī)院 檢驗科 李杰 隨著人們生活水平和意識的不斷提 高，各種因素的影響，近年來 每 31個人 中就有一個人 在受到 自身免疫性疾病 的 折磨， 臨床表現(xiàn)復(fù)雜，不易早期發(fā)現(xiàn)。 自身免疫性疾病涉及多學(xué)科 （ 風(fēng)濕免疫科、內(nèi)分泌科、血液科、婦產(chǎn)科、皮膚科、腎病科、消化科等等） 自身免疫性疾病涉及多病種 (混合結(jié)締組織病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、磷脂綜合癥、原發(fā)性系 統(tǒng)性血管炎、韋格納肉芽腫、壞死性新月體腎小球腎炎、顯 微多動脈炎、習(xí)慣性流產(chǎn)、干燥綜合征、皮肌炎、多肌炎、 原發(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性膽管炎等等） 自身免疫性疾病的共同特征： ? 患者血清中有多種自身抗體或自身反應(yīng)性致敏淋巴細(xì)胞存在，患者組織器官的病理特征為免疫炎癥，用相同抗原在某些動物實(shí)驗中可復(fù)制出相似的疾病模型，多數(shù)病因不明，疾病有重疊現(xiàn)象，即一個病人可同時患一種以上自身免疫病，病程一般較長，多遷延為慢性，有遺傳傾向。 ? 鑒于自身免疫性疾病的共同特征， 通過檢測自身抗體可以有效準(zhǔn)確的診斷自身免疫性疾病 ，為臨床提供高效準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。 自身抗體檢測的開展，不僅讓我院在 自身免疫性疾病 診斷治療上有很大的提高 ，還可為隴東南地區(qū) 400萬人口提 供 更準(zhǔn)確、更丏業(yè)的自身免疫性疾病診斷服務(wù) 。節(jié)省患者去 外院檢測診斷所花費(fèi)的時間和費(fèi)用，使我院在整個地區(qū)具有 一定的影響力，也會為醫(yī)院帶來可觀的經(jīng)濟(jì)效益。鑒于此， 我院完全有必要應(yīng)用間接免疫熒光技術(shù)開展自身抗體項目的 檢測。 2 酶聯(lián)免疫吸附法（ ELISA） 1 間接免疫熒光法（ IFA Indirect Fluorescent Assay ） 3 免疫印跡法（ IB）Westernblot LIA 4 其它： IDA、RIA等 間接免疫熒光法實(shí)驗原理 ? 細(xì)胞、組織切片戒純化的、生化性質(zhì)明確的物質(zhì)均可作為檢測自身抗體戒病原體抗體的抗原基質(zhì)。 ? 如標(biāo)本為陽性，已稀釋血清中的特異性抗體將與包被在固相上的抗原結(jié)合。 ? 第二步，已結(jié)合的抗體與熒光素標(biāo)記的抗人抗體結(jié)合，然后 在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。 ? 陽性標(biāo)本經(jīng)系列稀釋后可測出其滴度。 最適稀釋因子為 （ 10的平方根），這樣，每隔一步就出現(xiàn)一個 10的整數(shù)倍數(shù)（ 1: 1:3 1:100、 1:31:1000、 1:3200, 1:10000等 間接免疫熒光法檢測的特點(diǎn) ? 特異性高： 陽性與陰性標(biāo)本的熒光強(qiáng)度差別明顯。每種已結(jié)合的抗體在相應(yīng)抗原的位置產(chǎn)生 典型的熒光模型 。 ? 基質(zhì)中抗原譜完整，可檢測多種抗體，并且檢出率高。 ? 可在一種生物基質(zhì)上同時檢測多種抗不同生化特性抗原的抗體。 ? 當(dāng)酶免試劑所需要的抗原難以制備或無法獲得時，可選擇間接免疫熒光法。 ? 自身抗體檢測的 標(biāo)準(zhǔn)和最經(jīng)典的實(shí)驗方法 是 間接免疫熒光檢測法（ IFA)。 ? 需要熒光顯微鏡。 ? 操作者需要一定的丏業(yè)知識。 ? 操作者需要一定的工作經(jīng)驗。 顯微鏡下的結(jié)果判斷為綜合知識的體現(xiàn)，到目前為止，尚沒有任何儀器可取代人工讀片。 國內(nèi) 現(xiàn)狀 ?自身抗體的測定不普遍 ?欠規(guī)范 ?對其意義了解尚少 ?缺乏研究 自身抗體種類繁多 常見自身抗體： ? 抗核抗體譜 (ANAS)檢測 ? 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ ANCA）檢測 ? 類風(fēng)濕因子和抗 CCP抗體 ? 自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體檢測 Tankertanker Design
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