【正文】 DB33/T —2003DB33浙江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局　 發(fā)布20040101實施20031209發(fā)布飼料添加劑飼料用復(fù)合酶制劑Feed additivesComplex enzymatic preparation for feedDB33/T 459—2003浙江省地方標準ICS B 46備案號：147782004XIXDB33/T 459—2003目 次前言 III引言 IV1 范圍 12 規(guī)范性引用文件 13 術(shù)語和定義 14 產(chǎn)品分類、酶種范圍及安全性 25 要求 26 試驗方法 37 檢驗規(guī)則 48 標志、標簽 59 包裝、運輸、貯存 5 原理 6 試劑和溶液 6 儀器和設(shè)備 7 測定步驟 7 酶活力計算 8 精密度 8附錄B 9 原理 9 試劑和溶液 9 儀器和設(shè)備 9 測定步驟 10 酶活力計算 11 精密度 11附錄C 12 原理 12 試劑和溶液 12 儀器和設(shè)備 12 測定步驟 13 酶活力計算 14 精密度 14附錄D 15 原理 15 試劑和溶液 15 儀器和設(shè)備 15 測定步驟 16 酶活力計算 17 精密度 17附錄E 18 國際酶活力單位 18 輕工部行業(yè)標準酶活力單位 18 國內(nèi)其它資料酶活力單位 19III前 言本標準的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D為規(guī)范性附錄，附錄E為資料性附錄。本標準由浙江省飼料與動物保健品協(xié)會提出。本標準由浙江省飼料工業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本標準負責起草單位：浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護與微生物研究所。本標準參加起草單位：浙江省飼料監(jiān)察所、浙江王景寶飼料股份有限公司、長興藍鑫生物技術(shù)有限公司、長興大洋生物飼料有限公司。本標準主要起草人：許堯興、樓洪興、方阿慶、蘇衛(wèi)琴、王有良、宣士榮、汪剛?！∫? 言本標準是針對以微生物發(fā)酵法生產(chǎn)、含有二種或二種以上主要功效酶成分、經(jīng)配置而成的飼料用復(fù)合酶制劑?？紤]到市場上的飼料用復(fù)合酶制劑品種繁多，等級不一，酶活標示方法各不相同，故制定本標準，以統(tǒng)一我省飼料用復(fù)合酶制劑中主要酶系的酶活力單位定義，相關(guān)酶系的酶活力測定方法的及產(chǎn)品中各種酶的最低酶活指標，便于科研、生產(chǎn)、銷售和使用單位的相互交流和使用。產(chǎn)品分類中，飼料用復(fù)合酶制劑根據(jù)畜禽種類和日糧類型不同而分為通用、豬用、禽用及水產(chǎn)動物用幾種類型。而每種類型又可根據(jù)具體的日糧或畜禽生長階段細分成若干種類型。適用本標準中飼料用復(fù)合酶制劑的主要酶種有：酸性蛋白酶、中性蛋白酶、木聚糖酶、β葡聚糖酶和纖維素酶。本標準特別強調(diào)了飼料用復(fù)合酶制劑的安全性，指出：由發(fā)酵法，特別是固體發(fā)酵法生產(chǎn)獲得的飼料用復(fù)合酶的酶源，需說明相應(yīng)酶種的產(chǎn)生菌種及安全性。采用的產(chǎn)酶菌種應(yīng)是我國農(nóng)業(yè)部105號公告公布的允許使用的12種飼料級微生物菌種，或應(yīng)符合食品添加劑使用的菌株為酶源的發(fā)酵菌株。附錄A所述的“蛋白酶活力測定方法”是參照輕工部行業(yè)標準QB 1805《工業(yè)用蛋白酶制劑》的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。附錄B、附錄C、附錄D是通過測定幾種非淀粉多糖酶（木聚糖酶、β－葡聚糖酶、纖維素酶）分解相應(yīng)底物生成的還原糖來反映幾種酶的總酶活力。附錄E是資料性附錄，將本標準中幾種非淀粉多糖酶的酶活力與國際酶活力及國內(nèi)其它單位表示方法所獲得的酶活力之間的換算。生產(chǎn)者和使用者可根據(jù)不同產(chǎn)品酶活力表示方法，進行相互換算，以資比較。由于飼料用酶制劑基本上采用微生物發(fā)酵生產(chǎn)，酶系組成、相關(guān)濃度和化學(xué)結(jié)構(gòu)的不確定性，以及作用底物（飼料原料）的多樣性，各種終產(chǎn)物的不斷形成及反饋控制等因素的影響，因此，各實驗室嚴格按照標準規(guī)定的底物、pH、反應(yīng)時間與溫度等條件操作是十分重要的。本標準的衛(wèi)生指標部分參照了FAO/WHO下屬的JECF食品添加劑綱要第一卷中食品工業(yè)用酶制劑通則中的“衛(wèi)生指標”,以及國家輕工部行業(yè)標準《工業(yè)用酶制劑通用試驗方法》中有關(guān)食品級酶制劑的衛(wèi)生指標；本標準酶活力的測定，參考了國家有關(guān)行業(yè)推薦的方法及國內(nèi)外、省內(nèi)外相關(guān)企業(yè)標準的測定方法和國內(nèi)外相關(guān)資料，通過反復(fù)試驗，修改而成。飼料添加劑飼料用復(fù)合酶制劑1　 范圍本標準規(guī)定了飼料添加劑飼料用復(fù)合酶制劑的術(shù)語和定義、產(chǎn)品分類、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則和標志、標簽、包裝、運輸、貯存條件。本標準適用于在浙江省境內(nèi)生產(chǎn)、銷售、使用的飼料用復(fù)合酶制劑產(chǎn)品。2　 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T 1912000 包裝、儲運、圖示標志GB/T 59171986　配合飼料粉碎粒度測定方法GB/T 64351986　飼料水分的測定方法GB 10648 飼料標簽GB/T 13079－1999　飼料中總砷的測定GB/T 13080－1991 飼料中鉛的測定方法GB/T 13082－1991 飼料中鎘的測定方法GB/T 130912000 飼料中沙門氏菌的檢測方法GB/T 17480－1998　飼料中黃曲霉毒素B1的測定　酶聯(lián)免疫吸附法GB/T 188692002 飼料中大腸菌群的測定QB/T 1803　工業(yè)用酶制劑通用試驗方法　國家技術(shù)監(jiān)督局(1995)第43號令《定量包裝商品計量監(jiān)督規(guī)定》3　 術(shù)語和定義下列術(shù)語、定義適用于本標準。　飼料用酶制劑 Enzymatic Preparation for Feed飼料用酶制劑是通過產(chǎn)酶微生物發(fā)酵工程或含酶動、植物組織提取技術(shù)生產(chǎn)加工而成，具有一種或幾種底物清楚的酶催化活性，有助于改善動物對飼料營養(yǎng)成分的消化、吸收等，并有生物學(xué)評定依據(jù)，符合安全性要求，作飼料添加劑用的酶制劑產(chǎn)品。　飼料用復(fù)合酶制劑 Complex Enzymatic Preparation for Feed產(chǎn)品中含有二種或二種以上主要功效酶成分，這些酶是依據(jù)飼料原料和動物消化生理不同而特定復(fù)配，對飼料中多種成分具有酶催化作用的飼料用酶制劑?！≡厦?Material Enzyme以微生物為產(chǎn)酶菌種，采用固體發(fā)酵工程途徑生產(chǎn)，經(jīng)低溫干燥所獲得的、未添加任何其它載體的固體酶曲，定義為原料酶?！∶富顔挝?Enzymatic Unite根據(jù)作用底物的不同，對飼料用復(fù)合酶中相關(guān)酶種的酶活單位作如下定義?！〉鞍酌? Protanase在（40177。）℃、相應(yīng)的pH條件下(,)，在1min內(nèi)水解酪蛋白底物，產(chǎn)生相當于1微克酚類化合物（由酪氨酸等同物表示）的酶量，為1個酶活單位，以u/g(u/ml)表示?！∧揪厶敲?Xylanse在（40177。）℃、pH ，在1min內(nèi)水解木聚糖底物，產(chǎn)生相當于1微克木糖的還原糖的酶量，為1個酶活單位，以u/g(u/ml)表示?！ˇ缕暇厶敲?βglucanase在（40177。）℃、pH ，在1min內(nèi)水解β葡聚糖底物，產(chǎn)生相當于1微克葡萄糖的還原糖的酶量，為1個酶活單位，以u/g (u/ml)表示?！±w維素CMC酶 Cellulase在（40177。）℃、pH ，在1min內(nèi)水解羧甲基纖維素鈉底物，產(chǎn)生相當于1微克葡萄糖的還原糖的酶量，為1個酶活單位，以u/g(u/ml)表示。4　 飼料用復(fù)合酶制劑的分類、酶種范圍及安全性　 飼料用復(fù)合酶制劑的分類飼料用復(fù)合酶制劑根據(jù)畜禽種類和日糧類型不同而分為通用、豬用、禽用及水產(chǎn)動物用幾種類型。而每種類型又可根據(jù)具體的日糧或畜禽生長階段細分成若干種類型(詳見表1)?！?飼料用復(fù)合酶制劑的酶種范圍適用本標準中飼料用復(fù)合酶制劑的主要酶種有：酸性蛋白酶、中性蛋白酶、木聚糖酶、β葡聚糖酶和纖維素酶。其它酶種可根據(jù)需要適當調(diào)整?！?飼料用復(fù)合酶制劑的安全性由發(fā)酵法，特別是固體發(fā)酵法生產(chǎn)獲得的飼料用復(fù)合酶的酶源，需說明相應(yīng)酶種的產(chǎn)生菌種及安全性。采用的產(chǎn)酶菌種應(yīng)是我國農(nóng)業(yè)部105號公告公布的允