hplc儀器ppt課件(已修改)
2025-05-13 18:16 本頁面
【正文】 2022/5/29 高效液相色譜法 (HPLC) high performance liquid chromatograph 2022/5/29 高效液相色譜法（ HPLC）是 20世紀(jì) 60年代末 70年代初發(fā)展起來的一種新型分離分析技術(shù)，它是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上，引入了氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用了 高壓驅(qū)動流動相 、高效固定相和高靈敏度 檢測器，因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動化的特點(diǎn)。 概述 2022/5/29 發(fā)展： 1960年代，由于氣相色譜對高 沸點(diǎn) 有機(jī)物分析的局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。 1960年代末科克蘭（ Kirkland）、哈伯、荷瓦斯 (Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上第一臺高效液相色譜儀，開啟了高效液相色譜的時(shí)代。 2022/5/29 ?高效液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時(shí)甚至幾十分鐘內(nèi)完成。 1971年科克蘭等人出版了 《 液相色譜的現(xiàn)代實(shí)踐 》 一書，標(biāo)志著高效液相色譜法 (HPLC)正式建立。 2022/5/29 ? 1970年后，適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點(diǎn)。 1980年后，改善分離的選擇性成為 色譜 工作者的主要問題，人們越來越認(rèn)識到改變流動相的組成事提高選擇性的關(guān)鍵。 2022/5/29 一、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 ?主要區(qū)別：固定相差別 ， 輸液設(shè)備和檢測手段 1． 經(jīng)典 LC：僅做為一種分離手段 柱內(nèi)徑 13cm， 固定相粒徑 100μm 且不均勻 常壓輸送流動相 柱效低 （ H↑ ， n↓ ） 分析周期長 無法在線檢測 2． HPLC：分離和分析 柱內(nèi)徑 26mm， 固定相粒徑 10μm （ 球形 ， 勻漿裝柱 ） 高壓輸送流動相 柱效高 （ H↓ ， n↑ ） 分析時(shí)間大大縮短 可以在線檢測 2022/5/29 2022/5/29 二、 HPLC與 GC差別 1． 分析對象 GC： 能氣化 、 熱穩(wěn)定性好 、 且沸點(diǎn)較低的樣品 ，
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