hplc儀器ppt課件-展示頁
2025-05-10 18:16本頁面
【正文】 局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。 2022/5/29 ?高效液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內(nèi)完成。 2022/5/29 ? 1970年后，適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點(diǎn)。 2022/5/29 一、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 ?主要區(qū)別：固定相差別 ， 輸液設(shè)備和檢測手段 1． 經(jīng)典 LC：僅做為一種分離手段 柱內(nèi)徑 13cm， 固定相粒徑 100μm 且不均勻 常壓輸送流動相 柱效低 （ H↑ ， n↓ ） 分析周期長 無法在線檢測 2． HPLC：分離和分析 柱內(nèi)徑 26mm， 固定相粒徑 10μm （ 球形 ， 勻漿裝柱 ） 高壓輸送流動相 柱效高 （ H↓ ， n↑ ） 分析時(shí)間大大縮短 可以在線檢測 2022/5/29 2022/5/29 二、 HPLC與 GC差別 1． 分析對象 GC： 能氣化 、 熱穩(wěn)定性好 、 且沸點(diǎn)較低的樣品 ， 高沸點(diǎn) 、 揮發(fā)性差 、 熱穩(wěn)定性差 、 離子型及 高聚物的樣品不可檢測 占有機(jī)物的 20% HPLC： 溶解后能制成溶液的樣品 ， 不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制 ,分子量大 、 難氣化 、 熱穩(wěn)定性差及高分子和離子型樣品均可檢測 ,用途廣泛 ， 占有機(jī)物的 80% 2022/5/29 ?相同：兼具分離和分析功能 ， 均可以在線檢測 ?主要差別：分析對象的差別和流動相的差別 2022/5/29 2． 流動相差別 ?GC：流動相為惰性氣體 ?組分與流動相無親合作用力 ， 只與固定相作用 ?HPLC：流動相為液體 ?流動相與組分間有親合作用力 ， 為提高柱的選擇性 、 改善分離度增加了因素 ， 對分離起很大作用 ?流動相種類較多 ， 選擇余地廣 ?流動相極性和 pH值的選擇也對分離起到重要作用 3． 操作條件差別 GC： 加溫操作 HPLC：室溫；高壓 （ 液體粘度大 ， 峰展寬小
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