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bd流式基礎(chǔ)知識-qj(已修改)

2025-05-08 08:52 本頁面
 

【正文】 流式細胞術(shù) For FCM Training BD: 錢 璟 重慶 流式細胞術(shù)? 對于處在流動狀態(tài)中的細胞或顆粒各項特性進行檢測 Flow Cyto metry in motion cell measure ? 特點: 速度快 (≥ 10000cells/s) 特異性強,靈敏度高 ( MRD:1/10000 ) 多參數(shù)分析、活細胞分選 ? 研究對象 : 單細胞懸液 可檢測的樣本種類多樣:外周血、骨髓、細胞穿刺液、洗脫液、實體組織、培養(yǎng)細胞、藻類等 流式細胞術(shù) FACSVerse Accuri C6 LSR forttesa 現(xiàn)代流式細胞儀 (Flow cytometer) FL2 PE SSC FSC 電子系統(tǒng) 計算機系統(tǒng) FL3 PerCP, Cy5 FL1 FITC Light detectors 液流系統(tǒng) 光學系統(tǒng) laser 流式細胞儀工作流程 流式細胞儀的構(gòu)造 1. 細胞樣本成單列依次通過光檢測區(qū) 液流系統(tǒng) 2. 激發(fā)并收集各種光信號 3. 光信號轉(zhuǎn)換成電信號,數(shù)字化處理 4. 數(shù)字信號傳入計算機 光學系統(tǒng) 電子系統(tǒng) 計算機系統(tǒng) 分選系統(tǒng) 5. 活細胞分選 液流系統(tǒng) 流動室( Flow cell) Laser Sample 流體動力學聚焦 鞘液: sheath Sheath Sample Stream Cell — 樣本流和鞘液流的驅(qū)動一般采用加正壓的方法 — 鞘液壓力恒定,流速不變 — 通過調(diào)節(jié)樣本壓力調(diào)節(jié)樣本進樣速率 液流系統(tǒng) 液流驅(qū)動系統(tǒng) 調(diào)節(jié)樣本進樣速度 樣本流與鞘液壓力差改變,樣本流直徑改變,細胞間距改變 10 psi 10 psi 10 psi 10 psi 10 psi psi psi psi 壓力差 樣本流 進樣速度 分辨率 Hi Lo Med Low pressure High pressure 細胞周期 FL3 0 1024 2048 3072 4096 Count 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 . G0/G1 CV= 2 . 42 G2/M S phase G0/G1 FL3 0 1024 2048 3072 4096 Count 340 320 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 GO/G1 CV= 7 . 79 . 流式細胞儀的構(gòu)造 1. 細胞樣本成單列依次通過光檢測區(qū) 2. 激發(fā)并收集各種光信號 液流系統(tǒng) 光學系統(tǒng) 光學系
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