【正文】 ELSD檢測器的選擇和主要的應(yīng)用介紹 GRACE 格雷斯公司探索科技 ~ Davison 從分析到制備的解決方案 ?美國奧泰公司 (Alltech)于 2022年 8月并入 Grace公司，隸屬于三大 分支之一的 Davison旗下的探索科技部門。 ?Davison是全球最大的硅膠生產(chǎn)商，能夠為 LC,GC和 LC的應(yīng)用提供從小規(guī)模研發(fā)到大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)的一站式解決方案。 HPLC和 GC柱，配件和儀器 硅膠基色譜填料 HPLC毛細柱和微徑柱 HPLC柱和小型儀器 制備級和工業(yè)級 LC柱和裝柱服務(wù) 生物分離專用 HPLC柱和填料 GRACE 大綱 ?常規(guī)檢測器的回顧 ?ELSD的檢測原理 ?ELSD與常規(guī)檢測器的比較 ?ELSD在分析上的優(yōu)點 ?Alltech ELSD的介紹 ?ELSD的維護 ?質(zhì)量保證 ?總結(jié) GRACE 其它檢測器的介紹 紫外可見 UV/Vis 示差折光 RI 熒光 Fluorescence 質(zhì)譜 Mass Spectrometry GRACE 檢測器是高效液相色譜（ HPLC） 的核心部件之一，被喻為 HPLC的眼睛。它的作用是將色譜柱流出物中樣品含量的變化轉(zhuǎn)換為可供觀測的信號，通常是轉(zhuǎn)換為電信號，以便自動記錄下來進行定性定量分析 。 檢測器的應(yīng)用分布 紫外可見 65% 示差和蒸發(fā)光 10% 電化學(xué) 10% 熒光 8% 質(zhì)譜 4% 其它 3% GRACE 紫外 /可見檢測器 UV/VIS 優(yōu)點： ? 易于操作 ? 可靠性 ? 費用相對低廉 ? 溶劑梯度兼容 ? 對樣品沒有破壞性 ? 相對靈敏度高 GRACE 局限性： ? 沒有好的發(fā)光基團 的化合物響應(yīng)較差 ? 溶劑的使用上受紫外截止波長的限制 熒光檢測器 Fluorescence 優(yōu)點： ?很好的靈敏度 ?很好的選擇性 ?受流速和溫度的變化影響很小 GRACE 局限性： ?線性范圍窄 ?操作復(fù)雜 需要對化合物和儀器的變化了解透徹 ?某些物質(zhì)如氧氣會熄滅熒光必須嚴(yán)格脫氣 ?能夠自然產(chǎn)生熒光的化合物不是很多 ?衍生方法復(fù)雜 示差折光檢測器 RI 優(yōu)點 ： ?通用性 對幾乎所有的物質(zhì)具有相應(yīng) ?寬的動態(tài)線性范圍 104 ?易于操作 GRACE 局限性 : ?檢測靈敏度不高 ?對于溫度和壓力的波動敏感 ?平衡慢 ?檢測既有正峰也有負峰 ?不能進行梯度洗脫 ?流動相預(yù)先混合后的效果好于泵在線混合的 質(zhì)譜 MS 優(yōu)點 : ?靈敏度高 ?選擇性好 ?提供化學(xué)結(jié)構(gòu)信息 GRACE 局限性 : ?購買費用高 ?操作復(fù)雜 ?需要經(jīng)常維護 ?定量分析困難 蒸發(fā)光散射檢測器 ELSD ?發(fā)展歷史 ?檢測原理 ?局限性 ?優(yōu)點 ?在分析中的應(yīng)用 GRACE 發(fā)展歷史 : ? 第一臺商業(yè)化的產(chǎn)品出現(xiàn)在 80年代初期 ? 最早的應(yīng)用集中在聚合物的分析上 ? 90年代初期，更多其它方面的應(yīng)用 ? 目前 ,應(yīng)用在廣泛的領(lǐng)域 GRACE ELSD行業(yè)超過 20年的領(lǐng)先制造經(jīng)驗 : GRACE 500 型 2022 型 800 型 2022ES型 3300 型 獨特的檢測方法： 檢測三部曲 : ?霧化 ?溶劑的蒸發(fā) ?檢測 GRACE ELSD可以對所有揮發(fā)性低于流動相的物質(zhì)作出準(zhǔn)確檢測，而與被檢測物質(zhì)的化學(xué)基團關(guān)系不大，物理性質(zhì)類似的物質(zhì)響應(yīng)一致，響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比。 第一步：霧化 ?色譜柱流出物通過噴霧器針孔 ?與氮氣混合 ?形成均勻的霧狀液滴 (氣溶膠 ) GRACE 第二步：溶劑的蒸發(fā) ?液滴通過加熱的漂移管 ?流動相蒸發(fā) ?干燥的樣品顆粒保留 GRACE 第三步：檢測 ?樣品顆粒通過流動池 ?激光 “ 撞擊 ” 顆粒被散射 ?光電二極管檢測散射光 檢測角度為 90℃ ，避免虛假 信號 (90℃ 折射 /衍射光； 90℃ 反射光 ) GRACE 兩種類型氣溶膠處理方式： A型 所有液滴進入漂移管及流動池 (又稱為“ 無氣溶膠分流 No Aerosol Splitting”) B型 部分液滴分流排掉；只有一部分進入漂移管及流動池 (“ 氣溶膠分流 Aerosol Splitting”) GRACE A型 ELSD氣溶膠不分流操作 ?所有樣品從噴霧器進入漂移管及流動池 ?需要較高溫度才能完全蒸發(fā)流動相； ?A型 ELSD只有不分流一種操作模式 GRACE B型 ELSD氣溶膠分流操作 ?部分樣品被排掉 ?較低的溫度已足夠蒸發(fā)所有溶劑 ? B型 ELSD只有 分流一種操作模式 GRACE Alltech 2022(ES)型 ELSD 唯一提供兩種操作模式的 ELSD， 在任何流動相及樣品分析條件下均達到最佳結(jié)果 GRACE 一臺儀器，兩種操作模式： ?撞擊器 (Impactor)關(guān) 所有液滴進入漂移管及流動池 (A型 ELSD無分流 ) ?撞擊器 (Impactor)開 部分液滴被排除，只有一部分進入漂移管及流動池 (B型 ELSD氣溶膠分流 ) ?采用新型專利 “ 氣溶膠分流技術(shù) ” US Patent 6229605 GRACE 撞擊器 關(guān) 模式 ?撞擊器與氣溶膠流向平行 ?所有樣品流過漂移管到達流通池 ?最適用于非揮發(fā)性樣品及揮發(fā)性溶劑 (大部分為有機 ) Drive Shaft Nebulizer Optics Impactor ‘Off’ GRACE Nebulizer Drive Shaft Impactor ‘Off’ Optics Exhaust Drift Tube Nebulizer Impactor Drain 撞擊器 開 模式 ?撞擊器垂直于氣溶膠流向，部分液滴碰上撞擊器從廢液管排掉 。其余穿過撞擊器，經(jīng)過漂移管到達流動池 ?最適用于半揮發(fā)性樣品及低揮發(fā)性溶劑 (大部分為水溶液 ) Drive Shaft Nebulizer Impactor ‘On’ Optics GRACE Nebulizer Drive Shaft Impactor ‘On’ Nebulizer Drain Impactor Drift Tube Exhaust Optics 撞擊器 關(guān) 最適合非揮發(fā)性樣品 Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10181。m, Mobile Phase: 100% Water Flowrate: 1. 蜜三糖 (50181。g/mL) 2. 乳糖 (50181。g/mL) 3. 葡萄糖 (50181。g/mL) 4. 甘露糖 (50181。g/mL) Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10181。m, Mobile Phase: 100% Water Flowrate: 9206 9205 Impactor ‘On’ Impactor ‘Off’ 碳水化合物 非揮發(fā)性樣品在撞擊器“關(guān)”的情況下也不揮發(fā)，全部進入流動池，得到最高靈敏度 GRACE 撞擊器 關(guān) 最適合揮發(fā)性溶劑 有機溶劑在較低溫度蒸發(fā)，在撞擊器 “ 關(guān) ” 的情況下，也會完全蒸發(fā)， B型 ELSD 任何條件下均分流，造成樣品損失，降低檢測靈敏度 Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: 1. n癸基 bD吡喃糖苷 (5181。g/mL) 2. n辛基 bD吡喃糖苷 (5181。g/mL) 3. n十二烷基 bD吡喃糖苷 (5181。g/mL) 葡萄糖苷分析 Impactor ‘On’ Impactor ‘Off’ 9180 9179 GRACE 撞擊器 開 最適合半揮發(fā)性樣品 在撞擊器開情況下，可以較低溫蒸發(fā)溶劑，防止半揮發(fā)性樣品蒸發(fā) 防腐劑分析 Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: 1. 羥基苯甲酸甲酯 2. 羥基苯甲酸乙酯 3. 羥基苯甲酸丙酯 4. 羥基苯甲酸丁酯 9202 Impactor ‘Off’ Impactor ‘On’ 9201 GRACE 撞擊器 開 在幾乎室溫下檢測半揮發(fā)樣品 Column: Prevail? Carbohydrate ES, 5181。m, 250 x Mobile Phase: Ac