【正文】 ELSD檢測器的選擇和主要的應用介紹 GRACE 格雷斯公司探索科技 ~ Davison 從分析到制備的解決方案 ?美國奧泰公司 (Alltech)于 2022年 8月并入 Grace公司，隸屬于三大 分支之一的 Davison旗下的探索科技部門。 ?Davison是全球最大的硅膠生產商，能夠為 LC,GC和 LC的應用提供從小規(guī)模研發(fā)到大規(guī)模工業(yè)生產的一站式解決方案。 HPLC和 GC柱，配件和儀器 硅膠基色譜填料 HPLC毛細柱和微徑柱 HPLC柱和小型儀器 制備級和工業(yè)級 LC柱和裝柱服務 生物分離專用 HPLC柱和填料 GRACE 大綱 ?常規(guī)檢測器的回顧 ?ELSD的檢測原理 ?ELSD與常規(guī)檢測器的比較 ?ELSD在分析上的優(yōu)點 ?Alltech ELSD的介紹 ?ELSD的維護 ?質量保證 ?總結 GRACE 其它檢測器的介紹 紫外可見 UV/Vis 示差折光 RI 熒光 Fluorescence 質譜 Mass Spectrometry GRACE 檢測器是高效液相色譜（ HPLC） 的核心部件之一，被喻為 HPLC的眼睛。它的作用是將色譜柱流出物中樣品含量的變化轉換為可供觀測的信號，通常是轉換為電信號，以便自動記錄下來進行定性定量分析 。 檢測器的應用分布 紫外可見 65% 示差和蒸發(fā)光 10% 電化學 10% 熒光 8% 質譜 4% 其它 3% GRACE 紫外 /可見檢測器 UV/VIS 優(yōu)點： ? 易于操作 ? 可靠性 ? 費用相對低廉 ? 溶劑梯度兼容 ? 對樣品沒有破壞性 ? 相對靈敏度高 GRACE 局限性： ? 沒有好的發(fā)光基團 的化合物響應較差 ? 溶劑的使用上受紫外截止波長的限制 熒光檢測器 Fluorescence 優(yōu)點： ?很好的靈敏度 ?很好的選擇性 ?受流速和溫度的變化影響很小 GRACE 局限性： ?線性范圍窄 ?操作復雜 需要對化合物和儀器的變化了解透徹 ?某些物質如氧氣會熄滅熒光必須嚴格脫氣 ?能夠自然產生熒光的化合物不是很多 ?衍生方法復雜 示差折光檢測器 RI 優(yōu)點 ： ?通用性 對幾乎所有的物質具有相應 ?寬的動態(tài)線性范圍 104 ?易于操作 GRACE 局限性 : ?檢測靈敏度不高 ?對于溫度和壓力的波動敏感 ?平衡慢 ?檢測既有正峰也有負峰 ?不能進行梯度洗脫 ?流動相預先混合后的效果好于泵在線混合的 質譜 MS 優(yōu)點 : ?靈敏度高 ?選擇性好 ?提供化學結構信息 GRACE 局限性 : ?購買費用高 ?操作復雜 ?需要經常維護 ?定量分析困難 蒸發(fā)光散射檢測器 ELSD ?發(fā)展歷史 ?檢測原理 ?局限性 ?優(yōu)點 ?在分析中的應用 GRACE 發(fā)展歷史 : ? 第一臺商業(yè)化的產品出現在 80年代初期 ? 最早的應用集中在聚合物的分析上 ? 90年代初期，更多其它方面的應用 ? 目前 ,應用在廣泛的領域 GRACE ELSD行業(yè)超過 20年的領先制造經驗 : GRACE 500 型 2022 型 800 型 2022ES型 3300 型 獨特的檢測方法： 檢測三部曲 : ?霧化 ?溶劑的蒸發(fā) ?檢測 GRACE ELSD可以對所有揮發(fā)性低于流動相的物質作出準確檢測，而與被檢測物質的化學基團關系不大，物理性質類似的物質響應一致，響應值與樣品的質量成正比。 第一步：霧化 ?色譜柱流出物通過噴霧器針孔 ?與氮氣混合 ?形成均勻的霧狀液滴 (氣溶膠 ) GRACE 第二步：溶劑的蒸發(fā) ?液滴通過加熱的漂移管 ?流動相蒸發(fā) ?干燥的樣品顆粒保留 GRACE 第三步：檢測 ?樣品顆粒通過流動池 ?激光 “ 撞擊 ” 顆粒被散射 ?光電二極管檢測散射光 檢測角度為 90℃ ，避免虛假 信號 (90℃ 折射 /衍射光； 90℃ 反射光 ) GRACE 兩種類型氣溶膠處理方式： A型 所有液滴進入漂移管及流動池 (又稱為“ 無氣溶膠分流 No Aerosol Splitting”) B型 部分液滴分流排掉；只有一部分進入漂移管及流動池 (“ 氣溶膠分流 Aerosol Splitting”) GRACE A型 ELSD氣溶膠不分流操作 ?所有樣品從噴霧器進入漂移管及流動池 ?需要較高溫度才能完全蒸發(fā)流動相； ?A型 ELSD只有不分流一種操作模式 GRACE B型 ELSD氣溶膠分流操作 ?部分樣品被排掉 ?較低的溫度已足夠蒸發(fā)所有溶劑 ? B型 ELSD只有 分流一種操作模式 GRACE Alltech 2022(ES)型 ELSD 唯一提供兩種操作模式的 ELSD， 在任何流動相及樣品分析條件下均達到最佳結果 GRACE 一臺儀器，兩種操作模式： ?撞擊器 (Impactor)關 所有液滴進入漂移管及流動池 (A型 ELSD無分流 ) ?撞擊器 (Impactor)開 部分液滴被排除，只有一部分進入漂移管及流動池 (B型 ELSD氣溶膠分流 ) ?采用新型專利 “ 氣溶膠分流技術 ” US Patent 6229605 GRACE 撞擊器 關 模式 ?撞擊器與氣溶膠流向平行 ?所有樣品流過漂移管到達流通池 ?最適用于非揮發(fā)性樣品及揮發(fā)性溶劑 (大部分為有機 ) Drive Shaft Nebulizer Optics Impactor ‘Off’ GRACE Nebulizer Drive Shaft Impactor ‘Off’ Optics Exhaust Drift Tube Nebulizer Impactor Drain 撞擊器 開 模式 ?撞擊器垂直于氣溶膠流向，部分液滴碰上撞擊器從廢液管排掉 。其余穿過撞擊器，經過漂移管到達流動池 ?最適用于半揮發(fā)性樣品及低揮發(fā)性溶劑 (大部分為水溶液 ) Drive Shaft Nebulizer Impactor ‘On’ Optics GRACE Nebulizer Drive Shaft Impactor ‘On’ Nebulizer Drain Impactor Drift Tube Exhaust Optics 撞擊器 關 最適合非揮發(fā)性樣品 Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10181。m, Mobile Phase: 100% Water Flowrate: 1. 蜜三糖 (50181。g/mL) 2. 乳糖 (50181。g/mL) 3. 葡萄糖 (50181。g/mL) 4. 甘露糖 (50181。g/mL) Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10181。m, Mobile Phase: 100% Water Flowrate: 9206 9205 Impactor ‘On’ Impactor ‘Off’ 碳水化合物 非揮發(fā)性樣品在撞擊器“關”的情況下也不揮發(fā)，全部進入流動池，得到最高靈敏度 GRACE 撞擊器 關 最適合揮發(fā)性溶劑 有機溶劑在較低溫度蒸發(fā)，在撞擊器 “ 關 ” 的情況下，也會完全蒸發(fā)， B型 ELSD 任何條件下均分流，造成樣品損失，降低檢測靈敏度 Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: 1. n癸基 bD吡喃糖苷 (5181。g/mL) 2. n辛基 bD吡喃糖苷 (5181。g/mL) 3. n十二烷基 bD吡喃糖苷 (5181。g/mL) 葡萄糖苷分析 Impactor ‘On’ Impactor ‘Off’ 9180 9179 GRACE 撞擊器 開 最適合半揮發(fā)性樣品 在撞擊器開情況下，可以較低溫蒸發(fā)溶劑，防止半揮發(fā)性樣品蒸發(fā) 防腐劑分析 Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: Column: Alltech Econosphere174。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: 1. 羥基苯甲酸甲酯 2. 羥基苯甲酸乙酯 3. 羥基苯甲酸丙酯 4. 羥基苯甲酸丁酯 9202 Impactor ‘Off’ Impactor ‘On’ 9201 GRACE 撞擊器 開 在幾乎室溫下檢測半揮發(fā)樣品 Column: Prevail? Carbohydrate ES, 5181。m, 250 x Mobile Phase: Ac