【正文】 組分 *中檢所抗生素室 GRACE 銀杏葉提出物中內(nèi)酯含量的 ELSD測(cè)定 (中國(guó)藥典 2022) 銀杏葉提出物的內(nèi)酯類(lèi)成份決定了其藥理作用， HPLCRI法靈敏度與穩(wěn)定性均不理想；若采用紫外分析因?yàn)閮?nèi)酯類(lèi)成份吸收差，最大吸收波長(zhǎng)在 219nm， 受試劑末端吸收影響很大。 Alltima? C18, 5181。 C 1. Ethinamate () 10438 GRACE ELSD對(duì)流動(dòng)相的組成改變不響應(yīng)，允許在極端梯度條件下的快速分離 1. Ephedrine 2. Acetylsalicylic acid 3. Diphenhydramine 4. Trimipramine Column: Alltech174。m, 250 x (Part No. 99210) Mobile Phase: A: 5mM Heptafluorobutyric Acid, w/% TFA B: Acetonitrile Gradient: Time: 0 6 8 25 %B: 0 0 15 35 Flow Rate: GRACE ELSD對(duì)無(wú)衍生氨基酸分析 雖然 MS是通用性的檢測(cè)器， ELSD也有自己的優(yōu)勢(shì) 對(duì)于色譜條件的要求在 ELSD和 MS上是相似的，所以ELSD方法能夠方便的應(yīng)用在 MS上不需要修改。 C 10446 10447 GRACE ELSD比 UV更能準(zhǔn)確反映樣品實(shí)際的量 1:1 混合物 1. Ephedrine 麻黃素 2. Caffeine 咖啡因 10450 10449 Column: Alltima? HP EPS C18, 5181。 ?在無(wú)合適對(duì)照品的情況下，采用另外一種含量已知的物質(zhì)作內(nèi)標(biāo)，測(cè)定未知物含量成為可能。 C GRACE 載氣流速與漂移管溫度 GRACE 載氣流速和漂移管溫度是 ELSD中可以調(diào)節(jié)的兩個(gè)重要參數(shù)，建立適當(dāng)?shù)?HPLCELSD分析方法需要對(duì)這兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。 C Triethylamine三乙胺 176。, C18, 5181。m, 150 x mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate: Column: Alltech Econosphere174。其余穿過(guò)撞擊器，經(jīng)過(guò)漂移管到達(dá)流動(dòng)池 ?最適用于半揮發(fā)性樣品及低揮發(fā)性溶劑 (大部分為水溶液 ) Drive Shaft Nebulizer Impactor ‘On’ Optics GRACE Nebulizer Drive Shaft Impactor ‘On’ Nebulizer Drain Impactor Drift Tube Exhaust Optics 撞擊器 關(guān) 最適合非揮發(fā)性樣品 Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10181。 ?Davison是全球最大的硅膠生產(chǎn)商，能夠?yàn)?LC,GC和 LC的應(yīng)用提供從小規(guī)模研發(fā)到大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)的一站式解決方案。g/mL) 3. 葡萄糖 (50181。g/mL) 2. n辛基 bD吡喃糖苷 (5181。 C Formic Acid甲酸 176。C Pyridinium Acetate乙酸吡啶翁 Ammonium Carbonate (for reverse phase) 碳酸胺 (用于反相 ) (adjusted) Ammonium Carbonate碳酸胺 and GRACE 揮發(fā)性的流動(dòng)相改性劑 2 Volatile Mobile Phase Modifiers pKa pKb pH Range BP MP IonPair Reagents Pentafluoropropionic Acid五氟丙酸 ~ 9697176。低于某一溫度，基線(xiàn)水平較高，因?yàn)榈陀谶@一溫度，流動(dòng)相得不到充分揮發(fā)，而鹽的加入將會(huì)提高這一溫度，因?yàn)辂}的揮發(fā)需要更高的溫度，但并不是漂移管溫度越高越好，因?yàn)闇囟忍邥?huì)使流動(dòng)相沸騰，反而會(huì)增加背景噪音，同時(shí)還有可能導(dǎo)致溶質(zhì)的部分揮發(fā)，降低信噪比。m, 53 x 7mm (Part No. 35104) Mobile Phase: Acetonitrile:Water (75:25) Flowrate: Column Temp: 30176。m, 250 x (Part No. 88056) Mobile Phase: A: Acetonitrile B: Dichloromethane Gradient: Time: 0 40 %B: 30 50 Flow Rate: Triglycerides in Evening Primose Oil 月見(jiàn)草油中的甘油三酯 GRACE 二氯甲烷對(duì)于高分子量的甘油三酯溶解度高 . 熒光檢測(cè)器的局限性 ?大多需要柱前或柱後衍生 ?無(wú)需衍生 熒光檢測(cè)器的限制 ELSD的優(yōu)點(diǎn) GRACE 柱前衍生法分析氨基酸 — 紫外 amp。 C Chrom 10456 10458 10457 GRACE 總結(jié) :用 ELSD替代或補(bǔ)充現(xiàn)有檢測(cè)器的益處 ?消除衍生簡(jiǎn)化方法 ?比 RI有更好的靈敏度和穩(wěn)定性 ?給其它檢測(cè)器作補(bǔ)充，能夠看到哪些物質(zhì)沒(méi)有檢測(cè)到 ?能夠比 UVamp。 C 10451 GRACE 主要的應(yīng)用領(lǐng)域 GRACE Pharmaceuticals 藥物 Nonchromophoric drugs 沒(méi)有發(fā)光團(tuán)的藥品 Excipients 賦性劑 Impurities 雜質(zhì) Amino acids氨基酸 Aminoglycoside antibiotics 氨基糖甙類(lèi) Nutraceuticals 天然產(chǎn)物 Ginseng 人參 Astragaloside IV 黃芪甲苷 Ginkgolides 銀杏 Glucosamine氨基葡萄糖 Polymers/Surfactants聚合物 /表面活性劑 PEGs Polysorbate聚山梨酸酯 Tween PVA聚乙烯醇 GPEC Dimethicone Lipids 脂類(lèi) Phospholipids磷脂 Triglycerides 甘油三酸酯 Fatty acids 脂肪酸 Carbohydrates碳水化合物 Simple sugars單糖 Oligomers 寡糖 Sugar alcohols糖醇 2022版中國(guó)藥典中用 ELSD檢測(cè)的藥品名稱(chēng) 序號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 檢測(cè)化合物 色譜條件 藥典頁(yè)碼 1 地膚子 地膚子皂苷 甲醇－水－冰醋酸 =85:15: 一部 P81 2 路路通 路路通酸 甲醇－水－冰醋酸 =87:13: 一部 P205 3 黃芪 黃芪甲苷 C18柱，乙腈：水 =32： 68 一部 P212 4 炙黃芪 黃芪甲苷 C18柱，乙腈：水 =32： 68 一部 P213 5 銀杏葉 萜類(lèi)內(nèi)酯 白果內(nèi)酯 C18柱，甲醇 :四氫呋喃：水 =25： 10： 65 一部 P220 6 銀杏葉提取物 萜類(lèi)內(nèi)酯 白果內(nèi)酯 C18柱， 正丙醇：四氫呋喃：水 =1： 15： 84 一部 P282 7 知母 拔契皂苷元 C18柱，甲醇：水 =95： 5 一部 P1 48 8 意苡仁 甘油三油酸酯 C18柱，乙腈：二氯甲烷 =65： 35 一部 P260 9 浙貝母 貝母素 C18柱，乙腈：水：二乙胺 =70： 30： 一部 P205 10 乙肝寧顆粒 黃芪甲苷 甲醇－水 =75:25 一部 P290 11 玉屏風(fēng)口服液 黃芪甲苷 乙腈－水 =35:65 一部 P409 12 補(bǔ)中益氣丸 （水丸 ） 黃芪甲苷 C18柱，乙腈：水 =35： 65 一部 P480 13 銀杏葉片 萜類(lèi)內(nèi)酯 白果內(nèi)酯 C18柱， 正丙醇：四氫呋喃：水 =1： 15： 84 一部 P597 GRACE 2022版中國(guó)藥典中用 ELSD檢測(cè)的藥品名稱(chēng) 序號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 檢測(cè)化合物 色譜條件 藥典頁(yè)碼 13 硫酸卡那霉素 卡那霉素 C18柱， ：甲醇 =95： 5 二部 P724 14 硫酸慶大霉素 慶大霉素 小諾霉素 C18柱， ：甲醇 =92： 8 二部 P730 15 硫酸依替米星 依替米星 奈替米星 C18柱， ：甲醇 =84： 16 二部 P740 16 硫酸小諾霉素 小諾霉素 /慶大霉素C1a C18柱， ：甲醇 =94： 6 二部 P718 GRACE ELSD對(duì)氨基葡萄糖有比 RI和 UV更好的響應(yīng) Column: Prevail? Carbohydrate ES, 5181。m, 250 x (Part No. 35101) Mobile Phase: A: Acetonitrile B: Water Gradient: Time: 0 15 %B: 35 50 Flow Rate: 無(wú)需衍生檢測(cè)橄欖油中的甘油三酯 GRACE 1. 1,2Dilinoleyl3Oleylracglycerol (LLO) 2. 1,2Dilinoleyl3Palmitylracglycerol (LLP) 3. 1,2Dioleyl3linoleinracglycerol (OOL) 4. 1Palmityl2Olein3linoleinracglycerol (POL) 5. 1,2Dipalmityl3linoleinracglycerol (PPL)