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最新設計rtpcr引物方法免費下載(已修改)

2025-04-19 23:13 本頁面
 

【正文】 設計RTPCR引物方法要鑒定某一個基因在mRNA水平上的表達,需要使用QPCR的方法。引物設計是很重要的一環(huán),要進行QPCR時,獲得引物的途徑有很多種,其中最為方便的是使用NCBI和primer bank,首先介紹這一方法:比如你要檢測某藥物對小鼠細胞中IL2的表達影響,通過QPCR檢測,要設計引物。① 登陸NCBI,選擇gene,在選框中輸入 IL2 mus(搜索小鼠IL2基因)點擊搜索獲得結果如下:選擇第一個基因,打開,可以獲得gene的ID利用primer bank和ncbi的gene ID就可以獲得前人已經(jīng)設計好的引物② 登陸primer bank (),按下圖選擇NCBI gene ID 選擇物種 mouse ,在 for text中輸入前面獲得的你要檢測基因的ID(NCBI的編號)點擊submit 查詢,獲得如下結果可以看到其它人設計的好幾對引物,基本上是通過實驗驗證的,做QPCR的話直接拿來用就行了,點擊綠色高亮的鏈接可以看到其他人使用這對引物做QPCR獲得的結果。二、自己設計QPCR引物方法比如要檢測CXCR3的表達,做QPCR的擴增目的條帶在1
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