細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(已修改)
2025-04-19 04:01 本頁面
【正文】 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)編者 梁亦龍 張繼承生物信息學(xué)院2004年9月前言 細(xì)胞是一切生物(包括人類)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。生命科學(xué)中的各個(gè)學(xué)科領(lǐng)域，甚至非生命科學(xué)的許多學(xué)科領(lǐng)域中的學(xué)者們，越來越多地投入到對(duì)細(xì)胞生命現(xiàn)象的研究。細(xì)胞是生命的載體，不理解細(xì)胞就不理解生命。在現(xiàn)代生命科學(xué)教學(xué)中，不設(shè)置細(xì)胞生物學(xué)課，所培養(yǎng)出來的學(xué)生就稱不上是完全的生命科學(xué)家。在細(xì)胞生物學(xué)放學(xué)中，實(shí)驗(yàn)課不可或缺。實(shí)驗(yàn)課的基本任務(wù)是，讓學(xué)生學(xué)習(xí)細(xì)胞生物學(xué)基本技術(shù)，使他們具有一定的實(shí)驗(yàn)操作技能，并培養(yǎng)他們樹立獨(dú)立設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的思考觀念和進(jìn)行科研的基本素質(zhì)。我們借鑒兄弟院校的經(jīng)驗(yàn)編寫了這本《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》，供我院開設(shè)的各專業(yè)選用。 由于我們主客觀條件所限，而且編寫時(shí)間倉促，肯定會(huì)有不少缺點(diǎn)和錯(cuò)誤，請(qǐng)?zhí)岢雠u(píng)意見，幫助我們不斷改進(jìn)教學(xué)。 編者 梁亦龍 2004年9月目錄實(shí)驗(yàn)是規(guī)則與操作要求 1實(shí)驗(yàn)一 細(xì)胞形態(tài)及大小的觀測(cè) 2實(shí)驗(yàn)二 相差和暗視野顯微鏡的原理、使用及標(biāo)本觀察 5實(shí)驗(yàn)三 熒光顯微鏡原理及應(yīng)用 9實(shí)驗(yàn)四 電鏡參觀 12實(shí)驗(yàn)五 植物細(xì)胞骨架的顯示及光鏡觀察 14實(shí)驗(yàn)六 人淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本制作 15實(shí)驗(yàn)七 人淋巴細(xì)胞姐妹染色體區(qū)分染色 17實(shí)驗(yàn)八 堿性磷酸酶的顯示 19實(shí)驗(yàn)九 葉綠體的制備及其對(duì)染料的還原 22實(shí)驗(yàn)十 人體細(xì)胞核型圖的制作 24實(shí)驗(yàn)十一 線粒體的分離及活性測(cè)定 27實(shí)驗(yàn)十二 聯(lián)會(huì)復(fù)合體的染色與觀察 32實(shí)驗(yàn)十三 細(xì)胞融合 33實(shí)驗(yàn)十四 死、活細(xì)胞鑒別 39實(shí)驗(yàn)十五 細(xì)胞固定染色法41實(shí)驗(yàn)十六 早熟染色體凝集（PCC） 43實(shí)驗(yàn)十七 細(xì)胞同步化46實(shí)驗(yàn)十八 動(dòng)物染色體分帶技術(shù) 48實(shí)驗(yàn)十九 線粒體的顯示 50實(shí)驗(yàn)二十 植物愈傷組織培養(yǎng)以及再分化52實(shí)驗(yàn)二十一 腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟 57實(shí)驗(yàn)二十二 細(xì)胞器的分離 62實(shí)驗(yàn)二十三 石蠟切片的制作66實(shí)驗(yàn)室規(guī)則與操作要求為獲得較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，避免發(fā)生差錯(cuò)與意外事故，特制定以下規(guī)則與要求，希望實(shí)驗(yàn)者能嚴(yán)格遵守。（一）顯微鏡的使用及保護(hù)① 顯微鏡是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主要觀察工具，使用時(shí)必須注意保持外觀整潔、防濕、防高溫、防藥品侵蝕，使用時(shí)勿使染液或其它溶液沾污鏡頭，一旦沾污，及時(shí)用擦鏡紙蘸上鏡頭清洗液（無水乙醚：無水乙醇＝7：3）輕輕擦拭干凈。② 帶光源的顯微鏡待電壓穩(wěn)定后，將電源的光亮度調(diào)節(jié)器調(diào)至最小，再打開顯微鏡的電源，緩慢調(diào)節(jié)光亮度適當(dāng)進(jìn)行量度觀察，觀察完畢后，則先將光亮度調(diào)節(jié)器調(diào)至最小，然后再關(guān)閉顯微鏡電源開關(guān)。③ 鏡頭的清洗：實(shí)驗(yàn)完畢后，鏡頭的清洗很重要。用擦鏡紙蘸取少量鏡頭清洗液，先從鏡頭的中央開始清洗，輕輕旋轉(zhuǎn)擦至鏡頭的邊緣部分，如此重復(fù)2－3次。④ 載物臺(tái)必須保持清潔，必要時(shí)亦可用擦鏡紙蘸少量清洗液擦試載物臺(tái)。聚光器上的污物的去除亦可采用類似的方法。⑤ 使用完畢后，玻片一律取下。本桌的顯微鏡一律不準(zhǔn)搬離本實(shí)驗(yàn)桌。若需使用者，可到該桌使用，使用后務(wù)必保持該顯微鏡的清潔。如若發(fā)現(xiàn)違章使用情況，必追究使用者責(zé)任，本次實(shí)驗(yàn)作零分計(jì)。（二）實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，一律不準(zhǔn)高聲喧嘩整潔，保持室內(nèi)安靜，認(rèn)真操作，仔細(xì)做好各項(xiàng)觀察與記錄。（三）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一切儀器、物品必須愛護(hù)。節(jié)約材料、藥品，取用時(shí)不要過量。公用物品不得獨(dú)自占用，用后歸還原處。（四）注意安全。使用有毒物品、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等，應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程。易燃物品遠(yuǎn)離火源。禁止?jié)袷帜萌‰娫撮_關(guān)或接觸電源。如發(fā)生觸電等事故，及時(shí)報(bào)告。（五）取用各種試劑，要用及時(shí)蓋上瓶蓋。按獻(xiàn)寶取出所需之藥品或溶液后，不得將原液倒回瓶內(nèi)。滴管、玻棒、吸管不可混用。（六）實(shí)驗(yàn)中如有丟失、損壞儀器設(shè)備及用具，及時(shí)登記并報(bào)告，凡違反操作規(guī)程造成不應(yīng)有的損失者，視其情節(jié)輕重，態(tài)度好壞，按有關(guān)規(guī)定處理。（七）本實(shí)驗(yàn)室歡迎各位實(shí)驗(yàn)者對(duì)每一實(shí)驗(yàn)本身提出新的看法與做法，至于能否采用，視具體情況而定。任何人未經(jīng)老師許可，不得自作主張，改動(dòng)任何實(shí)驗(yàn)步驟與操作方法。（八）實(shí)驗(yàn)完畢后，須擺齊藥品，洗凈器皿，做好本桌清潔。整個(gè)實(shí)驗(yàn)室清潔由本班班長安排。離開前要關(guān)好門、窗、水、電。 實(shí)驗(yàn)一、細(xì)胞形態(tài)及大小的觀測(cè)一、 目的：1. 觀測(cè)細(xì)胞形態(tài)及大小，了解細(xì)胞的分類2. 學(xué)習(xí)顯微測(cè)量的方法3. 學(xué)習(xí)使用油鏡二、 測(cè)微技術(shù)的原理：顯微側(cè)微尺分為物鏡測(cè)微尺（簡(jiǎn)稱物微尺或臺(tái)微尺）和目鏡測(cè)微尺（簡(jiǎn)稱目微尺）。目鏡測(cè)微尺是一個(gè)可以放入目鏡內(nèi)的特制園玻片，玻片中央刻的刻度長5或10mm，將其分成50或100格（也有刻成十字形的）如下圖。物微尺為一載片上貼著一圓形玻片中央帶有刻度、長度為1mm，等分為100格，（圖一）。當(dāng)測(cè)量細(xì)胞的大小時(shí)，不能用物微尺直接測(cè)量細(xì)胞，而只能使用目微尺。因目微尺測(cè)量的是細(xì)胞經(jīng)物鏡放大后的像，因而它每格所代表的實(shí)際長度隨物鏡的放大率而變，在測(cè)量時(shí)需先用物微尺標(biāo)定，求出某一放大率時(shí)目微尺每格所代表的實(shí)際長度，然后再用以測(cè)量細(xì)胞大小。 三
化學(xué)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1