【正文】 您現(xiàn)在不能檢查保護(hù)文檔或打印文檔，請(qǐng)根據(jù)以下三個(gè)步驟操作： 1)如果您是Word2000或以上版本用戶(hù)，請(qǐng)把Word宏的安全性設(shè)為:中 方法: Word菜單工具宏安全性安全級(jí),設(shè)置為中 (如果您是Word97用戶(hù)，繼續(xù)執(zhí)行以下步驟) 2)關(guān)閉本文檔，重新打開(kāi)本文檔 3)點(diǎn)擊啟用宏按鈕，即可開(kāi)始填寫(xiě)本文檔或打印了申請(qǐng)代碼：受理部門(mén)： 收件日期：受理編號(hào)：20 / 20國(guó)家自然科學(xué)基金申 請(qǐng) 書(shū)資助類(lèi)別： 亞類(lèi)說(shuō)明： 附注說(shuō)明： 項(xiàng)目名稱(chēng)： 申 請(qǐng) 者： 電話(huà)： 依托單位： 通訊地址： 郵政編碼： 單位電話(huà)： 電子郵件： 申報(bào)日期： 2004年3月9日國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)基本信息yEKHuo0AOsK申 請(qǐng) 者 信 息姓名性別 出生年月 年 月民族 學(xué)位 職稱(chēng) 主要研究領(lǐng)域 電話(huà) 電子郵件 傳真 個(gè)人網(wǎng)頁(yè) 工作單位 在研項(xiàng)目批準(zhǔn)號(hào) 依托單位信息名稱(chēng)代 碼43007402 聯(lián)系人張婷姣 電子郵件kjcjcb@ 電話(huà)02787543437 網(wǎng)站地址 合作單位信息單 位 名 稱(chēng)代 碼00000000 項(xiàng) 目 基 本 信 息項(xiàng)目名稱(chēng)資助類(lèi)別面上項(xiàng)目 亞類(lèi)說(shuō)明自由申請(qǐng)項(xiàng)目 附注說(shuō)明 申請(qǐng)代碼C03030303:普通外科學(xué)C03031901:實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤學(xué)基地類(lèi)別 預(yù)計(jì)研究年限2005年1月 — 2007年12月研究屬性應(yīng)用基礎(chǔ)研究 摘 要項(xiàng)目研究?jī)?nèi)容和意義簡(jiǎn)介（限400字）：細(xì)胞粘附分子Tcadherin（Tcad）基因在肝癌、肺癌、乳腺癌等多種腫瘤中因啟動(dòng)子甲基化而失活，其表達(dá)顯著下降或缺失，推測(cè)其可能為一新的腫瘤抑制基因。申請(qǐng)人首次證實(shí)Tcad基因在腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤C6細(xì)胞中的腫瘤抑制基因功能，并揭示其分子機(jī)制。本研究將在肝癌細(xì)胞株進(jìn)一步研究Tcad基因失活與肝癌細(xì)胞的增殖及侵襲等惡性生物學(xué)特征的關(guān)系，并調(diào)查其分子機(jī)制；在臨床切除的肝癌標(biāo)本中研究Tcad基因失活與肝癌惡性分化程度、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)等惡性生物學(xué)特征的關(guān)系，明確Tcad基因失活與臨床肝癌預(yù)后的關(guān)系；在肝癌細(xì)胞株和肝癌裸鼠模型上證實(shí)去甲基化藥物是否能重新誘導(dǎo)Tcad分子表達(dá)并抑制肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲等惡性生物學(xué)特征，探索去甲基化藥物對(duì)肝癌的治療價(jià)值。該研究對(duì)進(jìn)一步揭示肝癌發(fā)病的分子機(jī)制、設(shè)計(jì)合理的治療藥物及判斷預(yù)后，提高我國(guó)肝癌的治療水平具有重要意義。關(guān) 鍵 詞(用分號(hào)分開(kāi)，最多5個(gè))Tcadherin；腫瘤抑制基因；肝癌 項(xiàng)目組主要成員(杰出青年科學(xué)基金不填此欄)編號(hào)姓 名出生年月性別職 稱(chēng)學(xué) 位單位名稱(chēng)電話(huà)電子郵件項(xiàng)目分工每年工作時(shí)間（月）1 2 3 4 5 6 7 8 9 總?cè)藬?shù)高級(jí)中級(jí)初級(jí)博士后博士生碩士生10321121說(shuō)明: 1. 高級(jí)、中級(jí)、初級(jí)、博士后、博士生、碩士生人員數(shù)由申請(qǐng)者負(fù)責(zé)填報(bào)，總?cè)藬?shù)自動(dòng)生成。說(shuō)明: 2. 項(xiàng)目組主要成員不包括項(xiàng)目申請(qǐng)者。經(jīng)費(fèi)申請(qǐng)表 （金額單位：萬(wàn)元）科目申請(qǐng)經(jīng)費(fèi)備注（計(jì)算依據(jù)與說(shuō)明）（1）測(cè)試/計(jì)算/分析費(fèi)統(tǒng)計(jì)分析及數(shù)據(jù)處理費(fèi)（2）能源/動(dòng)力費(fèi)水電費(fèi)（3）會(huì)議費(fèi)/差旅費(fèi)參加國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議45人次（4）出版物/文獻(xiàn)/信息傳播費(fèi)論文準(zhǔn)備及發(fā)表（5）其它（1）原材料/試劑/藥品購(gòu)置費(fèi)購(gòu)置各種抗體、脂質(zhì)體（2）其它購(gòu)買(mǎi)氚標(biāo)胸腺嘧啶、去甲基化試劑、合成引物（1）購(gòu)置購(gòu)買(mǎi)小型冰凍切片機(jī)、動(dòng)物解剖器材及消耗性器材（2）試制各種常規(guī)試劑建立動(dòng)物解剖工作臺(tái)及同位素實(shí)驗(yàn)專(zhuān)區(qū)委托動(dòng)物中心維持約100只裸鼠約1年的飼養(yǎng)及管理；流試細(xì)胞儀分析參加國(guó)際會(huì)議一次邀請(qǐng)Gutmann教授來(lái)院指導(dǎo)課題進(jìn)展及專(zhuān)題講座23次合 計(jì)與本項(xiàng)目相關(guān)的其他經(jīng)費(fèi)來(lái)源國(guó)家其他計(jì)劃資助經(jīng)費(fèi)其他經(jīng)費(fèi)資助（含部門(mén)匹配）其他經(jīng)費(fèi)來(lái)源合計(jì) 報(bào)告正文（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)原發(fā)性肝癌是高度惡性的腫瘤，盡管采取積極手術(shù)治療，但絕大多數(shù)病人仍難免死于腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，其死亡率高居我國(guó)腫瘤死亡率的第二位。研究已表明肝癌的發(fā)生乙肝、丙肝感染及攝入黃曲霉素污染的食物有密切關(guān)系, 其發(fā)生發(fā)展與多種癌基因過(guò)度表達(dá)，以及腫瘤抑制基因失活密切相關(guān)。但目前對(duì)其發(fā)生發(fā)展的精確分子機(jī)制尚不完全清楚。因此, 進(jìn)一步探索研究新的基因功能改變與肝癌發(fā)生發(fā)展及其惡性特征的關(guān)系，對(duì)揭示其發(fā)生發(fā)展的精確分子機(jī)制、設(shè)計(jì)合理的治療藥物及判斷預(yù)后， 進(jìn)一步提高我國(guó)肝癌的治療水平具有重要意義。Tcadherin分子屬細(xì)胞粘附分子cadherin超家族。 Cadherin超家族分子為細(xì)胞表面糖蛋白，其功能主要包括調(diào)節(jié)鈣介導(dǎo)的細(xì)胞粘附、細(xì)胞極性及形態(tài)形成，以及參與細(xì)胞間的識(shí)別和信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制(1,2,3,4)。經(jīng)典的Cadherin分子如Ecadherin和Ncadherin由細(xì)胞外鈣結(jié)合區(qū)及跨膜區(qū)兩部分組成，而Tcadherin因缺失經(jīng)典Cadherin分子所具有的跨膜區(qū)而經(jīng)糖基磷脂酰肌醇分子附著于細(xì)胞膜上（5）,故而命名truncatedcadherin（即Tcadherin，又稱(chēng)CDH13或Hcadherin）。近年來(lái)對(duì)經(jīng)典的Cadherin分子的深入研究發(fā)現(xiàn)，E，Ncadherin分子缺失或突變與多種腫瘤如肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移特征密切相關(guān)（6，7，8,9,10）。將Ecadherin分子重新導(dǎo)入缺失Ecadherin分子表達(dá)的腫瘤細(xì)胞，則腫瘤細(xì)胞的增殖及侵犯能力顯著受抑（11）。近年已開(kāi)始有Tcadherin分子在肝癌、乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌、卵巢癌及皮膚鱗癌中表達(dá)顯著下降、缺失的報(bào)導(dǎo)（12，13，14，15,16,17,18），推測(cè)Tcadherin分子在這些腫瘤中可能扮演腫瘤抑制基因角色,但尚無(wú)人對(duì)其在不同腫瘤中的基因功能及其分子機(jī)制進(jìn)行研究。2003年，申請(qǐng)人（黃志勇）最新研究表明，將Tcadherin基因?qū)肴笔П磉_(dá)Tcadherin分子的大鼠腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤C6細(xì)胞使其過(guò)度表達(dá)Tcadherin分子，C6細(xì)胞的增殖及侵襲能力顯著受抑，首次證實(shí)Tcadherin在大鼠腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的腫瘤抑制基因功能，并進(jìn)一步揭示其抑制機(jī)制是Tcadherin分子通過(guò)誘導(dǎo)P21 CIP1/WAF1表達(dá)致使腫瘤細(xì)胞于細(xì)胞周期G2期阻滯。該文發(fā)表于Molecular and Cellular Biology 2003,23:566578（19）。這一研究發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步研究Tcadherin分子在肝癌中的功能、分子機(jī)制及臨床意義奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。腫瘤抑制基因啟動(dòng)子甲基化導(dǎo)致基因失活在腫瘤的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用（20，21，22，23）。Tcadherin基因在乳腺癌、結(jié)直腸癌及肺癌中并未發(fā)生缺失突變，但由于其啟動(dòng)子異常甲基化導(dǎo)致Tcadherin基因失活，進(jìn)而導(dǎo)致其蛋白表達(dá)水平顯著下降或缺失（13,16,24）。Tcadherin基因位于染色體16q24，肝癌的發(fā)生與染色體16q24的缺失、突