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對多巴胺敏感的溶膠-凝膠-植物組織生物傳感器的研制(已修改)

2025-04-16 23:19 本頁面
 

【正文】 基于溶膠-凝膠固定技術(shù)的生物組織傳感器宣俊 陳利興 許長流(中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院2000級,廣州51027500)指導(dǎo)老師:蔡沛祥教授摘要:報道一個關(guān)于制備生物組織傳感器的新技術(shù),將溶膠-凝膠與植物液汁按一定比例結(jié)合,使天然植物中的多酚氧化酶被固定于溶膠-凝膠中,將其滴涂于預(yù)先涂有一層Nafion膜的鉑盤電極表面,構(gòu)成帶有Nafion-溶膠凝膠-植物液汁的復(fù)合修飾膜的生物傳感器,用于測定神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺。采用循環(huán)伏安法和線性掃描伏安法考察了傳感器的電化學(xué)特性,比較了不同植物品種、不同組織位置的生物催化活性,研究了乙醇用量、水酯比、植物液汁用量等因素的影響,考察了Nafion膜的防干擾功能。采用差示脈沖伏安法對多巴胺進行定量分析,線性范圍為2ⅹ106~1ⅹ104mol/L,ⅹ107mol/L。與傳統(tǒng)的組織電極相比,本傳感器具有一系列特點。關(guān)鍵詞: 溶膠凝膠,固定化技術(shù),植物組織傳感器,多巴胺前言多巴胺(DA)是人體一種重要的神經(jīng)遞質(zhì),其濃度的大小可直接引發(fā)起人體的一些精神性疾病。如:抑郁癥、老年癡呆、帕金森等。因此,為了更準(zhǔn)確靈敏地檢測多巴胺濃度的大小,人們從多方面對其進行研究。生物傳感器是化學(xué)傳感器的一個分支。生物傳感器成功的關(guān)鍵是生物材料固定技術(shù)。組織電極(包括植物組織電極、動物組織電極)是生物傳感器的一種。植物組織電極問世于八十年代初,是利用天然植物中存在的酶直接作為生物催化劑的一種生物傳感器。從文獻可以看到,以往人們對植物組織電極的研究,從電極結(jié)構(gòu)來看,主要有切片組織電極和碳糊電極兩種類型。切片的組織電極采用夾心面包式的物理固定法將植物組織切片固定,需要特定的基礎(chǔ)電極(如O2電極、NH3電極等)作為轉(zhuǎn)換器,組裝時還需要在組織片與基礎(chǔ)電極之間設(shè)置透氣膜,在組織片外加上保護網(wǎng)等,電極的制作比較繁瑣。碳糊電極的制作比較簡單。只要將植物組織磨成漿,按一定的比例與石墨粉混合調(diào)成碳糊,填入電極桿下端,磨平后即可使用。雖然碳糊電極制作簡單,但是生物活性物質(zhì)易從電極表面流失,而且碳糊在溶液中浸泡時容易松散脫落,更經(jīng)不起攪拌時溶液的沖擦?;谝陨蟽煞N電極的存在問題,我們提出了關(guān)于植物組織電極固定生物材料的新技術(shù)——溶膠凝膠技術(shù)。溶膠凝膠玻璃是由烷氧基硅烷(如Si(OCH3)4)或類似的有機金屬烷氧化物(如異丙氧基鈦或異丙氧基鋁)在常溫下水解和縮聚而成的透明的玻璃狀物質(zhì)。網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的硅烷聚合物能包埋各種生物活性物質(zhì),并能讓它們在孔隙中自由地移動或與孔隙內(nèi)表面的硅醇基團進行某種程度上的相互作用。溶膠凝膠材料具有物理剛性、化學(xué)惰性、高熱穩(wěn)定性和輕微溶脹性,它的低溫聚合過程的特點更是有利于生物材料的固定。實驗中,我們對不同植物組織汁進行了比較實驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在各種植物組織中,以蘋果內(nèi)部組織最好,且用同一根生物電極可多次重復(fù)檢測不同濃度的待測樣品,具有較好的實驗研究價值。研究內(nèi)容 儀器和試劑CHI 750A型電化學(xué)工作站(上海辰華儀器公司),超聲波清洗器(明珠電器有限公司),三電極系統(tǒng):所研制的多巴胺傳感器為工作電極,飽和甘汞電極為參比電極,鉑絲電極為對電極。正硅酸乙酯(TEOS,Aldrich公司),Triton X100(Research公司),Nafion117(5%的乙醇溶液,F(xiàn)luka公司),鹽酸多巴胺(DA,Sigma公司),鹽酸多巴胺注射液(江蘇林海藥業(yè)有限公司制造分公司),鹽酸腎上腺素注射液(EP,廣州明興制藥廠),抗壞血酸(維生素C藥片,AA,廣東華南制藥廠)
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