【正文】
Section A 細(xì)胞與大分子簡述復(fù)雜大分子的生物學(xué)功能及與人類健康的關(guān)系。Section C 核酸的性質(zhì)?A 發(fā)生在閉環(huán)雙鏈DNA分子上B DNA雙鏈軸線高卷曲,與簡單的環(huán)狀相比,連接數(shù)發(fā)生變化C 當(dāng)DNA扭曲方向與雙螺旋方向相同時(shí),DNA變得緊繃,為正超螺旋,反之變得松弛為負(fù)超螺旋。自然界幾乎所有DNA分子超螺旋都為負(fù)的,因?yàn)槟芰孔畹?。A 核酸的穩(wěn)定性:由于核酸中堿基對的疏水效應(yīng)以及電荷偶極作用而趨于穩(wěn)定 B 酸效應(yīng):在強(qiáng)酸和高溫條件下,核酸完全水解,而在稀酸條件下,DNA的核苷鍵被選擇性地?cái)嗔焉擅撪堰屎怂酑 堿效應(yīng):當(dāng)PH超出生理范圍時(shí)(78),堿基的互變異構(gòu)態(tài)發(fā)生變化D 化學(xué)變性:一些化學(xué)物質(zhì)如尿素,甲酰胺能破壞DNA和RNA二級結(jié)構(gòu)中的而使核酸變性。E 粘性:DNA的粘性是由其形態(tài)決定的,DNA分子細(xì)長,稱為高軸比,可被機(jī)械力和超聲波剪切而粘性下降。F 浮力密度:^3,因此可利用高濃度分子質(zhì)量的鹽溶液進(jìn)行純化和分析G 紫外線吸收:核酸中的芳香族堿基在269nm 處有最大光吸收H 減色性,熱變性,復(fù)性。思考題:提取細(xì)菌的質(zhì)粒依據(jù)是核酸的哪些性質(zhì)?質(zhì)粒是抗性基因,在基因組或者質(zhì)粒DNA中用堿提取法。Sectio C 課前提問,取出10 μL稀釋至1000 μL后進(jìn)行檢測,測得A260=。問(1):試管中的DNA濃度是多少?問(2):如果測得A280=, .A260/A280=? 說明什么問題?(1) 稀釋前的濃度:稀釋后的濃度:(2)〉,說明DNA中混有RNA樣品。(native:非變性的;denatured:變性的)圖一表示dsDNA和RNA的熱變性,中間的Tm值表示解鏈溫度。隨著溫度的升高,DNA和RNA逐漸變性形成單鏈,因此光吸收率逐漸增大,然而隨著溫度的升高RNA中雙鏈部分的堿基堆積逐漸減少,其光吸收率不規(guī)則地增大。較短的堿基配對區(qū)域具有更高的熱力學(xué)活性,比較長的區(qū)域變性快。圖二表示的是快速慢速降溫下的DNA復(fù)性,在溫度緩慢下降時(shí),DNA可以經(jīng)堿基配對逐漸形成雙鏈,但在快速降溫時(shí),DNA只形成局部區(qū)域的dsDNA,經(jīng)堿基配對或者在DNA內(nèi)部或者DNA之間短的互補(bǔ)區(qū)域的退火而形成,因此A260的下降很小。Sectio E 提問大腸桿菌的DNA聚合酶主要有哪幾種?它們有哪些特點(diǎn)?DNA聚合酶I:切除引物,修復(fù)DNA聚合酶II:修復(fù)DNA聚合酶III:復(fù)制Section E DNA復(fù)制1. 細(xì)胞周期(The cell cycle)(1)什么是細(xì)胞周期?細(xì)胞周期包括DNA復(fù)制后的細(xì)胞分裂,即從一個(gè)母細(xì)胞產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。(2)細(xì)胞分裂是有序的還是無序的?為什么?細(xì)胞周期是一個(gè)有序的過程,受細(xì)胞周期機(jī)制的控制。(Checkpoints and their regulation)(1)細(xì)胞如何從G0進(jìn)入G1?G0期是指非增殖的休眠狀態(tài),稱為沉默期。G1期有一限制點(diǎn)(R點(diǎn))細(xì)胞會(huì)對環(huán)境進(jìn)行評估,然后決定是否進(jìn)入另一個(gè)分裂周期。細(xì)胞在到達(dá)R點(diǎn)之前具有胞外生長分子促細(xì)胞分裂原即可使細(xì)胞從G0進(jìn)入G1期。(2)限制點(diǎn)(R點(diǎn))G1期,細(xì)胞會(huì)對環(huán)境進(jìn)行評估,然后決定是否進(jìn)入另一個(gè)分裂周期,G1期的這一點(diǎn)稱為限制點(diǎn)。Section F DNA損傷、修復(fù)與重組思考題(1)5’GTATCTTCTGATGGCTCGTGTACAAACACG3’3’CATAGAAGACTACCGAGCACATGXXXGTGC5’根據(jù)Holliday 模型在什么時(shí)候可以被修復(fù)? 該損傷的DNA鏈“XXX”部分本為“TTT”,修復(fù)時(shí)與另一個(gè)正常的DNA分子同源重組,“XXX”段將通過重組被正常的姐妹鏈上相應(yīng)區(qū)域的“TTT”替代修復(fù),而正常鏈上因此產(chǎn)生的缺口會(huì)被個(gè)填平。因?yàn)樗膶γ鏇]有損傷,可通過正常的切除去掉,這樣子就修復(fù)了。(2)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)以區(qū)別細(xì)菌遺傳轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)移