中科院分子生物學(xué)試題庫題庫3(已修改)
2025-04-16 23:08 本頁面
【正文】 七、問答題1．闡述原核生物的轉(zhuǎn)錄終止。 (1)轉(zhuǎn)錄終止的兩種主要的機制是什么? (2)描述翻譯怎樣能調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄終止。 (3)為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少涉及到Pho因子? (4)怎樣能阻止轉(zhuǎn)錄的終止?2．復(fù)制 DNA的聚合酶(DNA依賴的 DNA聚合酶)也有校正功能，解釋為什么RNA聚合酶沒有這種功能。3．討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反應(yīng)定向的重要性。假如核糖體從3’端到5’端讀它的模板 mRNA的話，那么將會發(fā)生什么情況?4．概括細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄過程。5. 概括典型原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)和功能，并解釋什么是保守序列。6．轉(zhuǎn)錄如何在基因或基因組末端終止?7．(1)如何區(qū)分由啟動子起始轉(zhuǎn)錄的RNA片段與5’端被加工過的RNA片段。 (2)證明多肽是從氨基端到羧基端方向合成的。8．比較 E．coli rRNA和 tRNA的轉(zhuǎn)錄和加工。9．區(qū)別可誘導(dǎo)和可阻遏的基因調(diào)控。10．衰減作用如何調(diào)控E. coli中色氨酸操縱子的表達(dá)?11．比較并指出細(xì)菌和真核生物RNA 翻譯機理的異同。12．什么是搖擺假說?13．。14．S．N Cohen于1973年構(gòu)建了三個重組體， pSC102， pSC105， pSC109請說明這三個重組體是如何獲得的?各說明了什么?15．基因克隆是如何使含有單個基因的 DNA片段得到純化的?16．什么是細(xì)菌的限制—修飾系統(tǒng)(restrictionmodificaton system, RM system)17．細(xì)菌的限制—修飾系統(tǒng)有什么意義? 18．說明限制性內(nèi)切核酸酶的命名原則要點。19．Ⅰ類限制酶具有哪些特點?在基因工程中有什么作用?20．Ⅲ類限制酶有哪些特點?21．何謂限制性內(nèi)切核酸酶的切割頻率?22．什么是限制性內(nèi)切核酸酶的星號活性?受哪些因素影響?23．雙酶消化法(double digests)繪制限制性內(nèi)切核酸酶酶譜的原理。24．什么是 DNA多態(tài)性(DNA polymorphism)?25．限制性片段長度多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)。26．計算下列三種酶各自在某染色體 DNA序列上識別位點間的平均距離： Alu Ⅰ：5’AGCT 3” EcoR Ⅰ: 5’GAATTC 3’ 3 TCGA 5’ 3’CTTAGG 5’AcyⅠ:5’GPuCGPyC 3’ 3’CPyGCPu5’ (注： Py=任何一種嘧啶； Pu=任何一種嘌呤)1～2：HindⅢ 切割；3～4：ＥcoRV 切割；5～6：Hind Ⅲ+Ｅco RV；5是質(zhì)粒 DNA： 6是15號克隆。27．在細(xì)菌質(zhì)粒 pBP1的四環(huán)素抗性基因 tetR的中間有一個HindⅡ的切點。用HindⅢ 切割果蠅基因組 DNA，以 pBP1為載體構(gòu)建基因組文庫。分子雜交證明克隆15帶有果蠅的目的基因。用HindⅢ和EcoRV對克隆15進(jìn)行了酶切分析，(用酶切的 pBP1質(zhì)粒DNA作對照)，旁邊標(biāo)出了片段的大小。 (1)繪制含有插入片段和不含插入片段時的 pBPl的限制性圖譜，并標(biāo)明四環(huán)素抗性 基因的位置—。 (2)如果用克隆在另一個與 pBP1完全不同源載體上的四環(huán)素抗性基因作為探針，進(jìn) 行 Southern印跡雜交，預(yù)測上述電泳圖會出現(xiàn)什么樣的雜交帶? (3)如果用克隆15的果蠅 DNA片段作為探針進(jìn)行 Southem印跡雜交，放射自顯影 的結(jié)果又是如何?28．為什么大多數(shù)內(nèi)切酶被稱為“限制”酶。29．據(jù)Science雜志報道:一種重要的遺傳疾病可由導(dǎo)致 DNA中堿基替換的誘變劑在體外進(jìn)行人工誘導(dǎo)。設(shè)計一種快速用以鑒定疾病基因型的檢測方法。30． BamH Ⅰ限制性片段的限制性圖譜，分別用EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ EcoR Ⅰ十 HpaⅡ消化這一片段的三個樣品，然后通過凝膠電泳分離 DNA片段，溴化乙錠染色后觀察DNA帶型()。請根據(jù)這些結(jié)果，繪制一個限制性圖譜， 用EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ單獨切割及用這兩種酶混合切割30kbBamHⅠ片段產(chǎn)生的 DNA帶 Ⅰ和HpaⅡ識別位點間的相對位置，以及它們之間的距離(kb)。31．1967年，有5個實驗室?guī)缀跬瑫r獨立發(fā)現(xiàn)了DNA 連接酶，每個實驗室的實驗有什么特點?32．簡述 DNA和RNA連接酶的催化反應(yīng)機制。33. 影響 DNA連接酶催化連接反應(yīng)的因素有哪些?34．什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?35. 如何利用 T4 DNA聚合酶制備3’隱含末端或雙鏈平末端?36. 如何利用 T4 DNA聚合酶進(jìn)行雙鏈 DNA的3’末端標(biāo)記?37．如何利用 T4 DNA聚合酶制備平末端?38．反轉(zhuǎn)錄酶有兩種類型，一是來源于禽類骨髓母細(xì)胞瘤病毒(AMY, aviam myeloblastosis virus)，另一種來源于鼠類莫洛尼氏白血病毒(M—MLV，Moloney murine leukemia virus)，它們之間有什么不同?39． RNA聚合酶相比，細(xì)菌噬菌體的 SP6RNA聚合酶、 T7 RNA聚合酶和 T3 RNA聚合酶具有哪些優(yōu)越性?40．什么是多核苷酸激酶的向前
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