【正文】 生物安全實驗室管理技術(shù)規(guī)范 浙江省疾病預(yù)防控制中心 翁景清 切記： ? 僅有先進(jìn)的設(shè)施、設(shè)備和裝備還不足以保證實驗室的生物安全，作為實驗室活動主體的操作者必須履行良好的行為規(guī)范才能最大限度保證實驗室的生物安全。 ? 良好的生物安全實驗室技術(shù)規(guī)范要滿足保護(hù)操作者和實驗環(huán)境的要求，必要時還要考慮對操作對象的保護(hù)。 ? 對于良好的實驗室操作技術(shù)規(guī)范每個操作者都必須時刻銘記在心。 ? 對于每一個新進(jìn)入實驗室的工作人員都應(yīng)該給予嚴(yán)格的訓(xùn)練，以使其掌握正確的要領(lǐng)，避免養(yǎng)成不良的習(xí)慣，從而保證以正確的意識、操作技術(shù)和工作習(xí)慣展開工作。 ? 養(yǎng)成正確的生物安全意識非常重要，它可以使操作者最大限度的保護(hù)自己，避免失誤和事故的發(fā)生，哪怕即使發(fā)生意外，也會進(jìn)行妥善的處理。 從事實驗活動都應(yīng)遵循下列基本原則： ? 不管是誰，從事實驗活動都應(yīng)遵循下列基本原則： ① 所有操作人員必須經(jīng)過培訓(xùn)，通過考核，獲得上崗證書； ②在開始相關(guān)工作之前，應(yīng)對所從事的病原微生物和其他危險物質(zhì)以及相關(guān)操作進(jìn)行危險評估，根據(jù)國家對于各種微生物操作的危險等級劃分和防護(hù)要求以及危險評估的結(jié)果，制定全面、細(xì)致的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和程序文件。 對于關(guān)鍵的危險步驟設(shè)計出可行的防護(hù)措施并對這些細(xì)節(jié)了然于胸； ? ③ 熟悉各級生物安全實驗室運(yùn)行的一般規(guī)則，掌握各種儀器、設(shè)備、裝備的操作步驟和要點，進(jìn)行正確的操作和使用，對于各種可能的危害應(yīng)非常熟悉； ? ④應(yīng)掌握各種感染性物質(zhì)和其他危險物質(zhì)操作的一般準(zhǔn)則和技術(shù)要點。 ? 實驗室的生物安全技術(shù)規(guī)范，包括但不僅限于實驗室運(yùn)行的基本規(guī)范、儀器設(shè)備的使用規(guī)范、針對感染性材料、危險化學(xué)品、放射性核素等的操作規(guī)范以及個人防護(hù)用品的使用規(guī)范等。 一、日常管理規(guī)范 ? 人員控制 ? 儀器設(shè)備搬入和移出 ? 防蟲及防節(jié)肢動物措施 ? 清潔與消毒 ? 水電安全管理 一）人員控制規(guī)范 人員專業(yè)和安全培訓(xùn)、持證上崗 禁止獨(dú)自進(jìn)入實驗室工作 有禁忌癥的人員不得進(jìn)入實驗室工作 孕婦暫時離開實驗崗 實習(xí)進(jìn)修人員不得獨(dú)自開展實驗活動 參觀、檢查人員須經(jīng)管理部門審批、持證進(jìn)入 后勤保障人員應(yīng)經(jīng)過相關(guān)培訓(xùn)、持證進(jìn)入 廠商維修人員須持管理部門準(zhǔn)入證進(jìn)入。 嚴(yán)禁在實驗室會客。 二）設(shè)備搬入和移出、擺放規(guī)范 實驗室應(yīng)為大型設(shè)備應(yīng)進(jìn)出留出通道（設(shè)備門） 實驗室應(yīng)有足夠的電力供應(yīng)設(shè)施 考慮設(shè)備的擺放空間 實驗室考慮足夠的承重水平 先前考慮設(shè)備的維修通道和位置 移出實驗室的設(shè)備應(yīng)經(jīng)過前面的消毒，消毒方法可采用擦洗表面和整體熏蒸的措施，消毒方法不應(yīng)損害設(shè)備的安全和使用性能。 擺放的位置應(yīng)符合要求 三）防蟲及防節(jié)肢動物措施規(guī)范 有自動閉門系統(tǒng) 有放昆蟲和節(jié)肢動物的設(shè)施，如紗窗、 擋板等 實驗室門窗的密閉性能應(yīng)符合要求 實驗室送、排風(fēng)管道有安全措施，防止小型動物或昆蟲從管道進(jìn)入實驗室； 四）清潔與消毒規(guī)范 實驗室應(yīng)保持整潔，定期進(jìn)行消毒。 實驗活動結(jié)束后及時清理實驗臺面，清理實驗器具，并進(jìn)行前面消毒。 實驗室消毒方法與消毒程序應(yīng)符合規(guī)定要求。 消毒劑應(yīng)采用符合國家標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)量合格的產(chǎn)品，不得使用未經(jīng)驗證和過期的消毒劑。 消毒時間應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定要求，不得隨意縮短或改變。 消毒劑應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，并在規(guī)定的時間內(nèi)使用。 消毒和滅菌方法應(yīng)根據(jù)消毒對象的具體情況進(jìn)行選擇。 五）水、電安全管理規(guī)范 實驗室應(yīng)加強(qiáng)對水、電的管理 避免常明燈、長流水等現(xiàn)象 禁止超負(fù)荷用電 設(shè)備使用后及時切斷電源 對需要連續(xù)通電的設(shè)備，要定期進(jìn)行巡視，特別是節(jié)假日期間更應(yīng)注意巡查。 使用電爐、滅菌器等設(shè)備時應(yīng)做到全程有人監(jiān)管。 實驗室發(fā)生斷電、停電、停水時應(yīng)及時檢查，切斷電源或關(guān)閉水龍頭，防止發(fā)生以外。 生物安全實驗室應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)，最好有雙路供電或有備用電源，保證重要設(shè)備的正常運(yùn)行和實驗室的安全。 二、實驗室安全管理規(guī)范 一）完善管理體系文件 制定相應(yīng)的安全管理制度和規(guī)定 制定實驗設(shè)備的管理制度和操作程序 制定實驗檢測規(guī)程和標(biāo)準(zhǔn)操作程序 制定實驗室人員準(zhǔn)入和項目準(zhǔn)入制度 制定實驗室進(jìn)、出程序 制定實驗廢棄物消毒、處理規(guī)程 制定實驗室意外事件處置預(yù)案和處置規(guī)程 建立實驗人員健康監(jiān)測與個人健康檔案制度 個人安全防護(hù)制度 實驗室事故報告制度和報告程序 1人員培訓(xùn)制度 1菌毒種安全管理和運(yùn)輸、保存制度 1樣本收樣、保存制度和操作程序等 二）人員管理規(guī)范 專業(yè)素質(zhì)和專業(yè)技能要求與培訓(xùn) 1）具備相關(guān)專業(yè)知識（操作技術(shù)、規(guī)程等） 2）具備必要專業(yè)技能（操作技能掌握） 3）檢測技術(shù)培訓(xùn)、特別是新技術(shù)、新方法的培訓(xùn) 安全知識和防護(hù)技能要求 1）經(jīng)過系統(tǒng)的生物安全培訓(xùn) 2）熟悉和掌握必要的安全防護(hù)知識和個人防護(hù)技能 3）了解從事崗位工作的風(fēng)險和防護(hù)要求 儀器設(shè)備操作與維護(hù)培訓(xùn)要求 1）、熟悉掌握相關(guān)設(shè)備的性能和操作要求 2）掌握設(shè)備操作程序 3）熟悉設(shè)備故障的保修和維護(hù)程序及要求 實驗室消毒與廢棄物處置培訓(xùn)等 1）經(jīng)過培訓(xùn)實驗人員掌握實驗室消毒方法、消毒程序及消毒劑的性能和特點 2）掌握各種實驗廢棄物的消毒滅菌要求和處理程序 五）、實驗室意外事件的處置培訓(xùn) 實驗操作意外事件處置 1）感染物質(zhì)外溢（污染臺面、地面等） 2）感染物質(zhì)的暴露（軀體或面部暴露） 意外損傷處置 1）刺傷 2）割傷 吸入感染物質(zhì)的處置 實驗設(shè)施發(fā)生的意外事件處置 1）停電 2）火災(zāi) 3）水災(zāi) 4）地震等 三、實驗操作技術(shù)規(guī)程 實驗人員應(yīng)熟悉掌握實驗室進(jìn)出程序、各種檢測技術(shù)、設(shè)備操作、消毒滅菌等操作規(guī)程和要求。 實驗室出、入操作規(guī)程 1）進(jìn)入準(zhǔn)備 2）個人防護(hù)用品使用及檢查程序 3）實驗室進(jìn)入、腿退出的規(guī)定程序 4）實驗室設(shè)施的開啟程序 實驗室檢測項目操作規(guī)程 病原學(xué)檢測 血清學(xué)檢測 分子生物學(xué)檢測 病毒培養(yǎng) 樣本離心、干燥、純化等操作程序 設(shè)備使用和操作規(guī)程 使用程序 維護(hù)程序 檢定程序 校準(zhǔn)程序 報廢程序 實驗室消毒滅菌規(guī)程 1）實驗室消毒 器具消毒 臺面消毒 地面消毒 實驗室空間消毒 送排風(fēng)管道消毒 消毒劑的配制等 2）實驗室廢棄物消毒滅菌操作程序 固體廢棄物消毒程序 廢液消毒程序 包裝材料消毒程序 3） 重點掌握消毒滅菌方法和時間及消毒劑種類與濃度 浸泡、高壓、焚燒、煮沸消毒等 消毒劑種類、使用濃度、消毒時間等 3）實驗室意外事故處置預(yù)案及處置程序、事故報告程序 實驗數(shù)據(jù)記錄和傳輸規(guī)程 1）實驗檢測的原始記錄 2）實驗檢測數(shù)據(jù)傳輸程序 3）實驗數(shù)據(jù)安全保密程序等 四、生物安全實驗室運(yùn)行的基本規(guī)范 ? 這些規(guī)范不能代替各實驗室的規(guī)章制度、程序文件和標(biāo)準(zhǔn)操作程序。各個實驗室應(yīng)遵照國家有關(guān)法律、法令、標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定，結(jié)合實際情況來制定相應(yīng)的管理文件和標(biāo)準(zhǔn)操作程序，確保實驗室生物安全符合國家的有關(guān)要求。 一） BSL2實驗室人員控制規(guī)范 ? 實驗室的進(jìn)入 實驗室負(fù)責(zé)人應(yīng)根據(jù)要求對進(jìn)入實驗室的人 員加以控制。未經(jīng)批準(zhǔn)或允許，任何人不得 擅自進(jìn)入實驗室。嚴(yán)禁兒童進(jìn)入實驗室工作 區(qū)域。 不允許可能增加獲得性感染的危險性或 感染后可能引起嚴(yán)重后果的人員進(jìn)入實驗室 或感染動物房。 ? BSL2實驗室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志，包括通用的生物危險性標(biāo)志，標(biāo)明傳染因子、實驗室負(fù)責(zé)人或其他人員姓名、電話以及進(jìn)入實驗室的特殊要求。 ? 實驗室的門應(yīng)保持關(guān)閉狀態(tài)。 ? 與實驗工作無關(guān)的動物不得帶入實驗室。 二）工作人員的防護(hù)規(guī)范 ? 在實驗室工作時，必須穿戴合適的工作服或防護(hù)服。 ? 工作人員可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物以及其他有害物質(zhì)的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。 ? 在處理完感染性實驗材料和動物以及其他有害物質(zhì)后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。 ? 為了防止眼睛或面部受到噴濺物的污染、碰撞或人工紫外線輻射的傷害，必須戴合適的安全眼鏡、面罩或其他防護(hù)設(shè)備。 ? 嚴(yán)禁穿著實驗防護(hù)服離開實驗室工作區(qū)域。 ? 不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋。 ? 禁止在實驗室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理角膜接觸鏡。 ? 禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。 ? 在實驗室內(nèi)用過的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。 三）有關(guān)操作的指導(dǎo)原則 ? 嚴(yán)禁用口吸移液管，嚴(yán)禁將實驗室材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。 ? 所有的實驗操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進(jìn)行。 ? 應(yīng)限制使用注射針頭和注射器。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實驗動物體液外，注射針頭和注射器不能用于移液或用作其他用途。 ? 實驗室應(yīng)制定并執(zhí)行處理溢出物的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人報告。實驗室應(yīng)如實記錄有關(guān)暴露和處理的情況，保存相關(guān)記錄。 ? 污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險評估結(jié)果準(zhǔn)備專門的污水處理系統(tǒng)。 ? 只有保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染的文件紙張才能帶出實驗室。 四）實驗室工作區(qū)的管理原則 ? 實驗室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實驗無關(guān)的物品。 ? 每天工作結(jié)束后應(yīng)清除工作臺面的污染。若發(fā)生具有潛在危險性的材料溢出應(yīng)立即清除污染。 ? 所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須先清除污染。 ? 感染性材料的包裝和運(yùn)輸應(yīng)遵循國家和 /或國際的相關(guān)規(guī)定。 ? 如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動物進(jìn)入的紗窗。 五）生物安全管理的指導(dǎo)原則 ? 實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計劃以及實驗室安全或 /和操作手冊。 ? 實驗室應(yīng)當(dāng)能提供常規(guī)的實驗室安全培訓(xùn)，并建立培訓(xùn)制度。 ? 實驗室負(fù)責(zé)人（或生物安全負(fù)責(zé)人）要將生物安全實驗室的特殊危害告知實驗室人員，同時要求他們閱讀生物安全或 /和操作手冊。所有實驗室人員必須經(jīng)過培訓(xùn)，了解所從事工作的危險、掌握有關(guān)的管理規(guī)定和操作手程序，通過考核后方可從事相關(guān)實驗室工作。 ? 應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動物和嚙齒動物的控制方案。 ? 如有必要，應(yīng)為所有實驗室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評估、健康監(jiān)測和治療，并建立健康檔案。 ? 實驗室人員應(yīng)接受與所操作生物因子或?qū)嶒炇覂?nèi)潛在的生物因子相關(guān)的免疫接種或檢測。 五、 感染性物質(zhì)的操作與防護(hù)規(guī)范 一）、實驗室內(nèi)檢測樣本的安全操作 ? 在實驗室內(nèi)，進(jìn)行感染性物質(zhì)的操作，包括其樣本采集、內(nèi)部運(yùn)輸、接收和開啟的方法不正確，都會增加造成相關(guān)人員發(fā)生實驗室感染的危險性。因此，進(jìn)行感染性物質(zhì)的操作應(yīng)注意以下問題： 包裝容器 ? 用于裝盛感染性物質(zhì)的容器一般不建議使用玻璃制品，為了保證安全，最好采用塑料制品（根據(jù)實際需要而定）。樣本容器應(yīng)當(dāng)堅固，不易破碎，帶螺旋蓋，蓋好后不應(yīng)有液體滲漏。所有的標(biāo)本都應(yīng)存放在容器內(nèi)。容器應(yīng)貼上標(biāo)簽以利于識別，標(biāo)簽上應(yīng)有樣品名稱、采集日期、編號等必要的信息。樣品的有關(guān)表格和 /或說明不要綁在容器外面，而應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里，以防止發(fā)生污染而影響使用。 標(biāo)本的接收 ? 大規(guī)模接收標(biāo)本的實驗室應(yīng)在一個專用的房間或區(qū)域進(jìn)行。對于病原已知的按國家規(guī)定可在 BSL－ 2操作的病原微生物或未知的感染性材料，最低應(yīng)在一個專用區(qū)域或房間接受，并在生物安全柜內(nèi)打開外包裝，操作人員應(yīng)穿防水的防護(hù)服，戴生物安全專用口罩和眼罩、手套。 ? 樣本接受由收樣員按照規(guī)定程序收樣，并做好收樣登記，與送樣人員做好交接工作，最后雙方簽字確認(rèn)。 實驗室內(nèi)運(yùn)輸 ? 為防止發(fā)