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凝膠過濾層析ppt課件(已修改)

2025-01-26 08:56 本頁面
 

【正文】 凝膠過濾層析 凝膠色譜技術是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由于設備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。目前已經(jīng)被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫(yī)學等有關領域廣泛采用,不但應用于科學實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。 定義 ? 凝膠過濾層析是生化分離常用 色譜技術 的一種。 ? 利用具有網(wǎng)狀結構的凝膠的 分子篩 作用 ,根據(jù)被分離物質(zhì)的 分子大小不同 來進行分離,也被稱為體積排阻層析( size exclusion chromatography)、分子篩層析( Molecular Sieve Chromatography)、凝膠滲透層析( Gel Permeation Chromatography) 應用 ? 凝膠層析法適用于分離和提純蛋白質(zhì)、酶、多肽、激素、多糖、核酸類等物質(zhì)。 ? 分子大小彼此相差 25%的樣品,只要通過單一凝膠床就可以完全將它們分開。 ? 利用凝膠的分子篩特性,可對這些物質(zhì)的溶液進行 脫鹽、去熱源和脫色 。 原理 ? 凝膠是一類多孔性高分子聚合物,每個顆粒猶如一個篩子。 ? 當樣品溶液通過凝膠柱時, 相對分子質(zhì)量較大 的物質(zhì)沿著凝膠顆粒間的孔隙,隨著溶劑流動,首先流出層析柱; ? 相對分子質(zhì)量較小 的物質(zhì)可自由地進出凝膠顆粒的網(wǎng)孔,使流量增長,移動速率慢而最后流出層析柱。 ? 中等大小的分子 在大分子物質(zhì)與小分子物質(zhì)之間被洗脫。 ? 這樣,經(jīng)過層析柱,混合物中的各物質(zhì)按其分子大小不同而被分離。 帶網(wǎng)孔的葡聚糖珠 小分子進入葡聚糖珠內(nèi) 大分子不能進入珠內(nèi),經(jīng)珠之間縫隙流出 固定相(凝膠) ? 三維空間網(wǎng)狀結構 樣品 固 定 相 流 動 相 小分子 被延滯 小
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