【正文】 1 第 3 章 納米抗病毒藥 概述 病毒感染的危害性 據(jù)報道， 60～ 65%流行性傳染病是由病毒感染引起的，國際病毒分類委員會于 2022 年 5 月提出的第 8 份報告，已發(fā)現(xiàn)的病毒超過 6000 種，分為 3 個目， 73 科， 9 個亞科， 287 屬及 1938 種。使人類致病的病毒有 1200 多種，若包括病毒亞型及病毒變異株，其總數(shù)已超過 10000 多種。隨著艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎等危害性大、發(fā)病率高、難于治愈的病毒性疾病在全球廣泛蔓延，以及流感病毒、冠狀病毒等呼吸道病毒基因的變異所出現(xiàn)新的變種病毒或病毒變異株 , 多次暴發(fā)全球 局部區(qū)域大范圍流行，迫切需要新的預(yù)防和治療藥物，使抗病毒藥物的研制成為世界醫(yī)藥市場令人關(guān)注的領(lǐng)域。 抗病毒藥物的研究現(xiàn)狀 對病毒性疾病的治療，目前仍缺乏專屬性強的藥物。臨床上常用的藥物有： 抑制病毒復(fù)制的抗病毒藥 。增強機體免疫功能的免疫調(diào)節(jié)藥 。針對臨床癥狀的止咳、鎮(zhèn)痛、退熱和消炎等對癥治療藥 。防止繼發(fā)感染的抗感染藥 。預(yù)防病毒感染的疫苗 。阻斷病毒傳播的消毒藥等。其中抗病毒藥和免疫調(diào)節(jié)藥能直接干預(yù)病毒的復(fù)制，是本文論述的重點。自 1962 年至 2022 年底 ，經(jīng)世界各國批準使用的合成 抗病毒藥共 56 個品種，其中廣譜抗病毒藥 1 個，抗艾滋病病毒（ HIV）藥 21 個，抗皰疹病毒藥 22 個，抗人乳頭瘤狀病毒藥 1 個，抗呼吸道病毒藥 5 個，抗肝炎病毒藥 3 個，其他類別 3個。我國抗病毒藥物的研究與開發(fā)起步較晚，至今獲得生產(chǎn)批文的抗病毒藥有 25 個，其中廣譜抗病毒藥 1 個，抗 HIV 藥 6 個，抗皰疹病毒藥 11 個，抗人乳頭瘤狀病毒藥 1 個，抗呼吸道病毒藥 3 個，抗肝炎病毒藥 1 個，其他類別 2 個，有近 40％的品種是國外早已淘汰的或年產(chǎn)僅幾公斤的外用藥 [1]。 納米載藥、釋藥系統(tǒng)在抗病毒藥物新制劑研制中的應(yīng)用 納米是指 直徑在 1～ 1000nm數(shù)量級的微小分子顆粒。各種抗病毒藥物的納米載藥、釋藥系統(tǒng)研制目前尚處于臨床前的研究階段，正在研制的納米載藥、釋藥系統(tǒng)新制劑有如下幾種類型： 納米裸粒子 用超臨界溶劑法可將抗病毒藥物制成純藥物納米粒子（即納米裸粒子），或在滾軸器中，加入超低粘度羥丙基纖維素水溶液作表面活性劑，用硬質(zhì) 氧化鋯 研磨劑，旋轉(zhuǎn)研磨 4～ 5天可得粒徑為 127～240 nm的納米粒。這種藥物納米裸粒子的穩(wěn)定性較差，在室溫下放置易產(chǎn)生凝聚作用使分子顆粒增大。尚未見對抗病毒藥物的納米裸粒子進行藥理性能研究的報道。 自乳化釋藥系統(tǒng)（ SEDDS） 自乳化釋藥系統(tǒng)是在沒有水相存在的情況下，將疏水性抗病毒藥物加入適當脂質(zhì)和非離子表面活性物質(zhì)形成熱力學(xué)穩(wěn)定的均一乳液，分裝于軟膠囊中，制成自乳化藥物制劑，口服后在胃液水相中受 2 胃蠕動和乳化劑的作用，即可形成透明狀的小油珠，其粒徑為 100nm～ 300nm、油珠的體積可小于50nm3，這種載藥、釋藥系統(tǒng)稱為 SEDDS，能提高疏水性藥物的口服生物利用度，已有 4個 HIV蛋白酶抑制劑制成自乳化制劑制，裝入明膠軟膠囊，獲美國 FDA批準臨床使用。 藥質(zhì)體（ Phamacosomes） 藥質(zhì)體 是將抗病毒藥物與脂質(zhì)如甘油脂、磷脂等共價結(jié)合成兩親性脂質(zhì)前體，并在水中自組裝成高分散性的有序的聚集體，如囊泡。它屬于一種自組裝藥物釋藥藥系統(tǒng)（ selfassembled drug delivery systems SADDS）。藥質(zhì)體中脂質(zhì)前藥的兩親性使其對生物膜有很好的親和性和透過性，高度分散特性又使其在體內(nèi)有靶向性和黏附性，是一種高效的新載藥系統(tǒng)。 納米脂質(zhì)體 (lipid nanoparticle， LN) 納米脂質(zhì)體 是一種定向藥物載體 ， 用 磷脂、膽固醇等為膜材包合 納米粒， 形成脂質(zhì)體雙分子層 ，囊泡中央 和各層之間被水相隔開， 進入人體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性 ， 從而提高藥物的治療指數(shù)。 脂質(zhì)體納米粒對淋巴結(jié)也有靶向作用，適用于水溶性差、口服生物利用度低的藥物作為釋藥系統(tǒng)。 固體脂質(zhì)納米粒 (solid lipid nanoparticle， SLN) 固體脂質(zhì)納米粒以天然或人工合成的固體脂質(zhì)（如卵磷脂、脂肪酸甘油酯等）為載體．將 抗病毒藥物包裹于脂質(zhì)核中制成的納米給藥體系，可控制 藥物的 釋放，避免藥物降解，并具有良好的靶向性等。 前體脂質(zhì)體納米粒 (proliposomes nanoparticle) 前體脂質(zhì)體 亦 稱重建脂質(zhì)體 ， 系脂質(zhì)體的前體形式，具有脂質(zhì)體制劑的 全部 特 性，有 固體 和 液體兩種 形 態(tài)。固 體 前體脂質(zhì)體 是具 有良好流動性能 的 粉末，應(yīng)用前與水水合即可分散或溶解成脂質(zhì)體 ；液體 前體脂質(zhì)體 系 將 抗病毒 藥物 接上長鏈脂肪酸鏈制成前體藥物，再將其 包封于類脂質(zhì)雙分子層（厚度約 4 nm）內(nèi)而形成的微型 囊 泡。水溶性藥物包封于雙分子層的親水基團夾層中，而脂溶性藥物則分散于雙分子層疏水基團的夾層中。 前體 脂質(zhì)體 可 解決脂質(zhì)體以混懸液形式貯存的一系列穩(wěn)定性問題，如藥物滲漏、粒子聚集、磷脂氧化 和 降解等，利于脂質(zhì)體制劑的產(chǎn)業(yè)化和商品化。 抗壞血酸棕櫚酸酯 脂質(zhì)體 （ aspasomes）載藥 納米 囊 抗壞血酸棕櫚酸酯 是穩(wěn)定性良好的親脂性化合物， 兼 有抗氧化作用和透皮性能，用溶劑蒸發(fā)法將其與膽固醇和 磷酸雙十六烷基酯 制成脂質(zhì)薄片，再分散于含藥的磷酸緩沖溶液中，可制成載藥 aspasomes 脂質(zhì)體 納米囊泡 或納米乳，用于 釋藥制劑 。 上述各種類型納米載藥、釋藥系統(tǒng)新制劑在抗病毒藥物應(yīng)用的實例將在下述各類藥物詳細論述。 3 研究表 明，多種納米載藥、釋藥系統(tǒng)可使藥物的藥效與體內(nèi)過程發(fā)生很大的變化，能增強藥效，降低不良反應(yīng)；對于難溶性抗病毒藥物有望增大表面積增加溶解度，提高粘附性，從而改善吸收率、提高口服生物利用度或增強皮膚和眼內(nèi)局部給藥的濃度和延長藥物作用時間 。某些納米靶向載藥、釋藥制劑可將藥物輸送到特定的靶器官，改變藥物在體內(nèi)的分布，提高靶器官的藥物濃度，利于透過血腦屏障，可用于治療某些特定器官如肝臟、腦部及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病毒感染；并可調(diào)節(jié)藥物的體內(nèi)循環(huán)時間和控制藥物的釋放速度，達到緩釋或控釋效果，使藥物作用時間延長；對于某些核苷 、核苷酸、多肽或擬肽類的抗病毒藥物在體內(nèi)易受酶的作用而失活，納米載藥、釋藥系統(tǒng)可起到一定的保護作用，提高其在消化道內(nèi)的穩(wěn)定性，用于提供新的給藥途徑?？共《舅幖{米載藥、釋藥系統(tǒng)可能賦予傳統(tǒng)常用制型許多新的特征，對藥物的藥效學(xué)和藥物代謝動力學(xué)的影響已引起醫(yī)藥界的廣泛重視，至今的研究成果已充分顯示抗病毒藥納米載藥、釋藥系統(tǒng)對新藥的研究與開發(fā)有重要的意義 [2]。 廣譜抗病毒藥： 廣譜抗病毒藥是指對人體多種 RNA 及 DNA 致病性病毒均有特異性抑制作用的藥物。迄今，僅利巴韋林（ ribavirin）在國內(nèi)外批準臨床 使用。在研的藥物有利巴韋林左旋異構(gòu)體（ levovirin）及其前藥韋拉米定（ viramidine），均處在Ⅲ期臨床試驗階段，預(yù)計 2022～ 2022 年可投入臨床使用。 利巴韋林（三氮唑核苷、病毒唑）： 一般特性 利巴韋林為白色結(jié)晶狀粉末，無臭、無味。在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚或氯仿中不溶，2 %水溶液 pH ～ 。利巴韋林有廣譜抗病毒作用。在細胞培養(yǎng)內(nèi)抗 RNA 病毒作用較強，甲型、乙型流感病毒最敏感，最小抑制濃度（ MIC）為 ～ ；對呼吸道合胞病毒、副流感病毒、麻 疹病毒、漢坦病毒、拉薩熱病毒、甲型肝炎病毒（ HAV）和丙型肝炎病毒（ HCV）等均有抑制作用。對DNA 病毒敏感性較差，抑制皰疹病毒、腺病毒的 MIC 為 100～ 1000mg/L。動物試驗對小鼠流感病毒肺炎、家兔皰疹及痘苗病毒角膜炎，猴感染拉薩熱病毒均有治療作用。利巴韋林難于越過血腦屏障，對小鼠乙型腦炎病毒感染無效，口服生物利用度約 45％。 研究概況 1986 年美國 FDA 首次批準在氣霧罩內(nèi)治療小兒合胞病毒感染。 1994 年擴大適應(yīng)癥，單用或與重組基因 α2a、 α2b 干擾素合用治療丙型病毒性肝炎；我國于 1973 年研制成功， 1980 年鑒定投產(chǎn)。 至今，已開發(fā)了注射劑、凍干粉針劑、葡萄糖注射液、氯化鈉注射液、片劑、含片、分散片、膠囊、顆粒劑、泡騰顆粒劑、口服液、滴眼液、眼膏、滴鼻液；至今，已開發(fā)了注射劑、凍干粉針劑、葡萄糖注射液、氯化鈉注射液、片劑、含片、分散片、膠囊、顆粒劑、泡騰顆粒劑、口服液、滴眼液、眼膏、滴鼻液和氣霧噴霧劑等 54 個規(guī)格 15 種制劑；在研的還有 吸入粉霧劑、注射用復(fù)方粉針劑、 緩釋 4 顆粒 、 緩釋膠囊 、 緩釋片、口腔速崩片、脂質(zhì)體口服乳 、 軟膏 、 眼凝膠等 等 。臨床上 用靜脈滴注早期治療流感、副流感病毒性肺炎、小兒腺病 毒肺炎、流行性腎出血熱綜合癥和拉薩熱等可減輕癥狀，減少并發(fā)癥；口服可治療甲型肝炎、帶狀皰疹、皮膚單皰病毒感染、麻疹及上呼吸道病毒感染；滴鼻加含片治療甲、乙型流感可退熱，縮短病程；滴眼劑可治療流行性結(jié)膜炎、單皰病毒角膜炎和痘苗病毒角膜炎；乳膏劑可治療帶狀皰疹和生殖器皰疹；氣霧噴霧劑可治療呼吸道病毒引起的鼻炎、咽峽炎和咽結(jié)膜熱。 利巴韋林緩釋微丸 陶秀梅 [3]等采用離心造粒粉末層析法制備利巴韋林含藥素丸，再用丙烯酸樹酯水分散體包衣，得到利巴韋林緩釋微丸，粒徑 650～ 750μ m，收率 ％，載藥量 ％，其釋藥動力學(xué)受滲透壓驅(qū)動。 利巴韋林前體脂質(zhì)體 于海翔等 [45]以大豆磷脂為原料，加入膽固醇和維生素 E,混勻后得乳白色脂質(zhì)體微囊泡乳狀液，經(jīng)薄膜蒸發(fā)得利巴韋林前體脂質(zhì)體，其形態(tài)為不規(guī)則的乳白色球體，偶見有談黃色條塊狀或葡萄串樣未充分分散開的磷脂聚集體及長條狀的膽固醇結(jié)晶，其掃描電鏡圖如圖 31 所示。 圖 31 利巴韋林前體脂質(zhì)體固體形態(tài)的掃描電鏡圖（ 20220） 利巴韋林前體脂質(zhì)體水化后得脂質(zhì)體乳液，其平均粒徑為 ，粒度分布較均勻， ％粒子的粒徑范圍都在 500nm 以下，有少數(shù) 粒徑為 2μ m 以上的粒子；水化后的包封率約 22％， δ電位為177。 3mV； 用差示掃描量熱 計 (DSC)測得前體脂質(zhì)體的相轉(zhuǎn)變溫度為 ℃； 水化后脂質(zhì)體的 pH為 ，在 25℃時粘度為 s。 脂質(zhì)體乳液對肝臟有較強的靶向性，而鼻腔給藥，能提高藥物在肺部的分布，但對于藥物穿透血腦屏障無促進作用；急性毒性試驗 [6]表明，腹腔注射 LD50為 177。 ，與利巴韋林水溶液比較無統(tǒng)計學(xué)差異；局部刺激性試驗，脂質(zhì)體乳液不增加鼻粘膜的刺激性。大鼠灌胃給予 利巴韋林脂質(zhì)體口服乳 900mg/kg，與市售的利巴韋林口服液比較， 脂質(zhì)體乳液釋藥更平緩，在體內(nèi)滯留時間長于市售的口服液， 達峰時間（ Tmax）為 小時，口服液為 小時； 5 藥物濃度峰值（ Cmax）為 g/mL， AUC 為 g h/mL， 消除速率常數(shù) k 值為 L/h，而 口服液為 L/h；相對生物利用度為 ％，與口服液等效。大鼠灌胃給予 利巴韋林脂質(zhì)體口服乳與市售口服液的藥代動力學(xué)參數(shù)如表 31 所示。 利巴韋林脂質(zhì)體口服乳液 已完成臨床前試驗研究，正在申報臨床試驗 。 表 31 大鼠灌胃給予 利巴韋林 脂質(zhì)體口服乳與市售口服液的藥代動力學(xué)參數(shù)比較 [5] 參數(shù) 市售口服液 脂質(zhì)體口服乳 Tmax（ h） Cmax（ μ g/mL） AUC（ S0）（μ g h/mL） AUMC(S1) AUMC(S2) MRT（ h） VRT（ h2） k 抗人免疫缺陷病毒藥物 人免疫缺陷病毒（ HIV）所致獲得性免疫缺 陷綜合征（ acquired immunodeficiency syndrome），簡稱艾滋?。?AIDS）是危害性極大、死亡率很高的傳染病 , 據(jù) 2022 年 12 月世界衛(wèi)生組（ WHO） 和 聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃署 聯(lián)合公布的 全球艾滋病流行報告，全世界 現(xiàn)有 AIDS 患者和 HIV 攜帶者人數(shù)為 3940萬， 2022 年 新增感染者 490 萬， 死 亡 310 萬 。自 20 世紀 80 年代初發(fā)現(xiàn)第一批病例，至今累計 死于AIDS 的總?cè)藬?shù)已經(jīng) 超過 3000 萬 ； 中國現(xiàn)有 HIV 感染者 約 84 萬人；其中， AIDS 病人約 8 萬例 ，已死亡近 10 萬人。若不加以有效地控制，至 2022 年 HIV 感染人數(shù)可能達到 600 萬例， AIDS 患者 120萬例，將造成嚴重的社會、經(jīng)濟問題。 抗 HIV 藥物近 20 多年來發(fā)展較迅速，至 2022 年底 國外已批準上市的抗 HIV 藥物 21 個品種，另有 5 個固定處方的復(fù)方制劑，其中抗 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 11 個，抗 HIV 蛋白酶抑制劑 9 個， HIV 受體細胞融合抑制劑 1 個；我國批準生產(chǎn)的有 6 個品種。國外 2022 年在研的有 119 個品種，已進入 III期臨床研究的有 10 個品種，預(yù)計在 2022～ 2022 年 可能上市的有非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制藥卡帕韋林（ capravirine）和 HIV CCR5 受體抑制藥馬雷韋羅（ maraviroc）；已批準上市的阿德福韋酯（ adefovir dipivoxil）也可能擴大適應(yīng)癥用于治療 艾滋病 。 抗 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制藥 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶（ RT）是 HIV pol 基因編碼的多功能