【正文】 1 第 3 章 納米抗病毒藥 概述 病毒感染的危害性 據(jù)報(bào)道， 60～ 65%流行性傳染病是由病毒感染引起的，國(guó)際病毒分類委員會(huì)于 2022 年 5 月提出的第 8 份報(bào)告，已發(fā)現(xiàn)的病毒超過(guò) 6000 種，分為 3 個(gè)目， 73 科， 9 個(gè)亞科， 287 屬及 1938 種。使人類致病的病毒有 1200 多種，若包括病毒亞型及病毒變異株，其總數(shù)已超過(guò) 10000 多種。隨著艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎等危害性大、發(fā)病率高、難于治愈的病毒性疾病在全球廣泛蔓延，以及流感病毒、冠狀病毒等呼吸道病毒基因的變異所出現(xiàn)新的變種病毒或病毒變異株 , 多次暴發(fā)全球 局部區(qū)域大范圍流行，迫切需要新的預(yù)防和治療藥物，使抗病毒藥物的研制成為世界醫(yī)藥市場(chǎng)令人關(guān)注的領(lǐng)域。 抗病毒藥物的研究現(xiàn)狀 對(duì)病毒性疾病的治療，目前仍缺乏專屬性強(qiáng)的藥物。臨床上常用的藥物有： 抑制病毒復(fù)制的抗病毒藥 。增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的免疫調(diào)節(jié)藥 。針對(duì)臨床癥狀的止咳、鎮(zhèn)痛、退熱和消炎等對(duì)癥治療藥 。防止繼發(fā)感染的抗感染藥 。預(yù)防病毒感染的疫苗 。阻斷病毒傳播的消毒藥等。其中抗病毒藥和免疫調(diào)節(jié)藥能直接干預(yù)病毒的復(fù)制，是本文論述的重點(diǎn)。自 1962 年至 2022 年底 ，經(jīng)世界各國(guó)批準(zhǔn)使用的合成 抗病毒藥共 56 個(gè)品種，其中廣譜抗病毒藥 1 個(gè)，抗艾滋病病毒（ HIV）藥 21 個(gè)，抗皰疹病毒藥 22 個(gè)，抗人乳頭瘤狀病毒藥 1 個(gè)，抗呼吸道病毒藥 5 個(gè)，抗肝炎病毒藥 3 個(gè)，其他類別 3個(gè)。我國(guó)抗病毒藥物的研究與開(kāi)發(fā)起步較晚，至今獲得生產(chǎn)批文的抗病毒藥有 25 個(gè)，其中廣譜抗病毒藥 1 個(gè)，抗 HIV 藥 6 個(gè)，抗皰疹病毒藥 11 個(gè)，抗人乳頭瘤狀病毒藥 1 個(gè)，抗呼吸道病毒藥 3 個(gè)，抗肝炎病毒藥 1 個(gè)，其他類別 2 個(gè)，有近 40％的品種是國(guó)外早已淘汰的或年產(chǎn)僅幾公斤的外用藥 [1]。 納米載藥、釋藥系統(tǒng)在抗病毒藥物新制劑研制中的應(yīng)用 納米是指 直徑在 1～ 1000nm數(shù)量級(jí)的微小分子顆粒。各種抗病毒藥物的納米載藥、釋藥系統(tǒng)研制目前尚處于臨床前的研究階段，正在研制的納米載藥、釋藥系統(tǒng)新制劑有如下幾種類型： 納米裸粒子 用超臨界溶劑法可將抗病毒藥物制成純藥物納米粒子（即納米裸粒子），或在滾軸器中，加入超低粘度羥丙基纖維素水溶液作表面活性劑，用硬質(zhì) 氧化鋯 研磨劑，旋轉(zhuǎn)研磨 4～ 5天可得粒徑為 127～240 nm的納米粒。這種藥物納米裸粒子的穩(wěn)定性較差，在室溫下放置易產(chǎn)生凝聚作用使分子顆粒增大。尚未見(jiàn)對(duì)抗病毒藥物的納米裸粒子進(jìn)行藥理性能研究的報(bào)道。 自乳化釋藥系統(tǒng)（ SEDDS） 自乳化釋藥系統(tǒng)是在沒(méi)有水相存在的情況下，將疏水性抗病毒藥物加入適當(dāng)脂質(zhì)和非離子表面活性物質(zhì)形成熱力學(xué)穩(wěn)定的均一乳液，分裝于軟膠囊中，制成自乳化藥物制劑，口服后在胃液水相中受 2 胃蠕動(dòng)和乳化劑的作用，即可形成透明狀的小油珠，其粒徑為 100nm～ 300nm、油珠的體積可小于50nm3，這種載藥、釋藥系統(tǒng)稱為 SEDDS，能提高疏水性藥物的口服生物利用度，已有 4個(gè) HIV蛋白酶抑制劑制成自乳化制劑制，裝入明膠軟膠囊，獲美國(guó) FDA批準(zhǔn)臨床使用。 藥質(zhì)體（ Phamacosomes） 藥質(zhì)體 是將抗病毒藥物與脂質(zhì)如甘油脂、磷脂等共價(jià)結(jié)合成兩親性脂質(zhì)前體，并在水中自組裝成高分散性的有序的聚集體，如囊泡。它屬于一種自組裝藥物釋藥藥系統(tǒng)（ selfassembled drug delivery systems SADDS）。藥質(zhì)體中脂質(zhì)前藥的兩親性使其對(duì)生物膜有很好的親和性和透過(guò)性，高度分散特性又使其在體內(nèi)有靶向性和黏附性，是一種高效的新載藥系統(tǒng)。 納米脂質(zhì)體 (lipid nanoparticle， LN) 納米脂質(zhì)體 是一種定向藥物載體 ， 用 磷脂、膽固醇等為膜材包合 納米粒， 形成脂質(zhì)體雙分子層 ，囊泡中央 和各層之間被水相隔開(kāi)， 進(jìn)入人體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性 ， 從而提高藥物的治療指數(shù)。 脂質(zhì)體納米粒對(duì)淋巴結(jié)也有靶向作用，適用于水溶性差、口服生物利用度低的藥物作為釋藥系統(tǒng)。 固體脂質(zhì)納米粒 (solid lipid nanoparticle， SLN) 固體脂質(zhì)納米粒以天然或人工合成的固體脂質(zhì)（如卵磷脂、脂肪酸甘油酯等）為載體．將 抗病毒藥物包裹于脂質(zhì)核中制成的納米給藥體系，可控制 藥物的 釋放，避免藥物降解，并具有良好的靶向性等。 前體脂質(zhì)體納米粒 (proliposomes nanoparticle) 前體脂質(zhì)體 亦 稱重建脂質(zhì)體 ， 系脂質(zhì)體的前體形式，具有脂質(zhì)體制劑的 全部 特 性，有 固體 和 液體兩種 形 態(tài)。固 體 前體脂質(zhì)體 是具 有良好流動(dòng)性能 的 粉末，應(yīng)用前與水水合即可分散或溶解成脂質(zhì)體 ；液體 前體脂質(zhì)體 系 將 抗病毒 藥物 接上長(zhǎng)鏈脂肪酸鏈制成前體藥物，再將其 包封于類脂質(zhì)雙分子層（厚度約 4 nm）內(nèi)而形成的微型 囊 泡。水溶性藥物包封于雙分子層的親水基團(tuán)夾層中，而脂溶性藥物則分散于雙分子層疏水基團(tuán)的夾層中。 前體 脂質(zhì)體 可 解決脂質(zhì)體以混懸液形式貯存的一系列穩(wěn)定性問(wèn)題，如藥物滲漏、粒子聚集、磷脂氧化 和 降解等，利于脂質(zhì)體制劑的產(chǎn)業(yè)化和商品化。 抗壞血酸棕櫚酸酯 脂質(zhì)體 （ aspasomes）載藥 納米 囊 抗壞血酸棕櫚酸酯 是穩(wěn)定性良好的親脂性化合物， 兼 有抗氧化作用和透皮性能，用溶劑蒸發(fā)法將其與膽固醇和 磷酸雙十六烷基酯 制成脂質(zhì)薄片，再分散于含藥的磷酸緩沖溶液中，可制成載藥 aspasomes 脂質(zhì)體 納米囊泡 或納米乳，用于 釋藥制劑 。 上述各種類型納米載藥、釋藥系統(tǒng)新制劑在抗病毒藥物應(yīng)用的實(shí)例將在下述各類藥物詳細(xì)論述。 3 研究表 明，多種納米載藥、釋藥系統(tǒng)可使藥物的藥效與體內(nèi)過(guò)程發(fā)生很大的變化，能增強(qiáng)藥效，降低不良反應(yīng)；對(duì)于難溶性抗病毒藥物有望增大表面積增加溶解度，提高粘附性，從而改善吸收率、提高口服生物利用度或增強(qiáng)皮膚和眼內(nèi)局部給藥的濃度和延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間 。某些納米靶向載藥、釋藥制劑可將藥物輸送到特定的靶器官，改變藥物在體內(nèi)的分布，提高靶器官的藥物濃度，利于透過(guò)血腦屏障，可用于治療某些特定器官如肝臟、腦部及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病毒感染；并可調(diào)節(jié)藥物的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間和控制藥物的釋放速度，達(dá)到緩釋或控釋效果，使藥物作用時(shí)間延長(zhǎng)；對(duì)于某些核苷 、核苷酸、多肽或擬肽類的抗病毒藥物在體內(nèi)易受酶的作用而失活，納米載藥、釋藥系統(tǒng)可起到一定的保護(hù)作用，提高其在消化道內(nèi)的穩(wěn)定性，用于提供新的給藥途徑?？共《舅幖{米載藥、釋藥系統(tǒng)可能賦予傳統(tǒng)常用制型許多新的特征，對(duì)藥物的藥效學(xué)和藥物代謝動(dòng)力學(xué)的影響已引起醫(yī)藥界的廣泛重視，至今的研究成果已充分顯示抗病毒藥納米載藥、釋藥系統(tǒng)對(duì)新藥的研究與開(kāi)發(fā)有重要的意義 [2]。 廣譜抗病毒藥： 廣譜抗病毒藥是指對(duì)人體多種 RNA 及 DNA 致病性病毒均有特異性抑制作用的藥物。迄今，僅利巴韋林（ ribavirin）在國(guó)內(nèi)外批準(zhǔn)臨床 使用。在研的藥物有利巴韋林左旋異構(gòu)體（ levovirin）及其前藥韋拉米定（ viramidine），均處在Ⅲ期臨床試驗(yàn)階段，預(yù)計(jì) 2022～ 2022 年可投入臨床使用。 利巴韋林（三氮唑核苷、病毒唑）： 一般特性 利巴韋林為白色結(jié)晶狀粉末，無(wú)臭、無(wú)味。在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚或氯仿中不溶，2 %水溶液 pH ～ 。利巴韋林有廣譜抗病毒作用。在細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)抗 RNA 病毒作用較強(qiáng)，甲型、乙型流感病毒最敏感，最小抑制濃度（ MIC）為 ～ ；對(duì)呼吸道合胞病毒、副流感病毒、麻 疹病毒、漢坦病毒、拉薩熱病毒、甲型肝炎病毒（ HAV）和丙型肝炎病毒（ HCV）等均有抑制作用。對(duì)DNA 病毒敏感性較差，抑制皰疹病毒、腺病毒的 MIC 為 100～ 1000mg/L。動(dòng)物試驗(yàn)對(duì)小鼠流感病毒肺炎、家兔皰疹及痘苗病毒角膜炎，猴感染拉薩熱病毒均有治療作用。利巴韋林難于越過(guò)血腦屏障，對(duì)小鼠乙型腦炎病毒感染無(wú)效，口服生物利用度約 45％。 研究概況 1986 年美國(guó) FDA 首次批準(zhǔn)在氣霧罩內(nèi)治療小兒合胞病毒感染。 1994 年擴(kuò)大適應(yīng)癥，單用或與重組基因 α2a、 α2b 干擾素合用治療丙型病毒性肝炎；我國(guó)于 1973 年研制成功， 1980 年鑒定投產(chǎn)。 至今，已開(kāi)發(fā)了注射劑、凍干粉針劑、葡萄糖注射液、氯化鈉注射液、片劑、含片、分散片、膠囊、顆粒劑、泡騰顆粒劑、口服液、滴眼液、眼膏、滴鼻液；至今，已開(kāi)發(fā)了注射劑、凍干粉針劑、葡萄糖注射液、氯化鈉注射液、片劑、含片、分散片、膠囊、顆粒劑、泡騰顆粒劑、口服液、滴眼液、眼膏、滴鼻液和氣霧噴霧劑等 54 個(gè)規(guī)格 15 種制劑；在研的還有 吸入粉霧劑、注射用復(fù)方粉針劑、 緩釋 4 顆粒 、 緩釋膠囊 、 緩釋片、口腔速崩片、脂質(zhì)體口服乳 、 軟膏 、 眼凝膠等 等 。臨床上 用靜脈滴注早期治療流感、副流感病毒性肺炎、小兒腺病 毒肺炎、流行性腎出血熱綜合癥和拉薩熱等可減輕癥狀，減少并發(fā)癥；口服可治療甲型肝炎、帶狀皰疹、皮膚單皰病毒感染、麻疹及上呼吸道病毒感染；滴鼻加含片治療甲、乙型流感可退熱，縮短病程；滴眼劑可治療流行性結(jié)膜炎、單皰病毒角膜炎和痘苗病毒角膜炎；乳膏劑可治療帶狀皰疹和生殖器皰疹；氣霧噴霧劑可治療呼吸道病毒引起的鼻炎、咽峽炎和咽結(jié)膜熱。 利巴韋林緩釋微丸 陶秀梅 [3]等采用離心造粒粉末層析法制備利巴韋林含藥素丸，再用丙烯酸樹(shù)酯水分散體包衣，得到利巴韋林緩釋微丸，粒徑 650～ 750μ m，收率 ％，載藥量 ％，其釋藥動(dòng)力學(xué)受滲透壓驅(qū)動(dòng)。 利巴韋林前體脂質(zhì)體 于海翔等 [45]以大豆磷脂為原料，加入膽固醇和維生素 E,混勻后得乳白色脂質(zhì)體微囊泡乳狀液，經(jīng)薄膜蒸發(fā)得利巴韋林前體脂質(zhì)體，其形態(tài)為不規(guī)則的乳白色球體，偶見(jiàn)有談黃色條塊狀或葡萄串樣未充分分散開(kāi)的磷脂聚集體及長(zhǎng)條狀的膽固醇結(jié)晶，其掃描電鏡圖如圖 31 所示。 圖 31 利巴韋林前體脂質(zhì)體固體形態(tài)的掃描電鏡圖（ 20220） 利巴韋林前體脂質(zhì)體水化后得脂質(zhì)體乳液，其平均粒徑為 ，粒度分布較均勻， ％粒子的粒徑范圍都在 500nm 以下，有少數(shù) 粒徑為 2μ m 以上的粒子；水化后的包封率約 22％， δ電位為177。 3mV； 用差示掃描量熱 計(jì) (DSC)測(cè)得前體脂質(zhì)體的相轉(zhuǎn)變溫度為 ℃； 水化后脂質(zhì)體的 pH為 ，在 25℃時(shí)粘度為 s。 脂質(zhì)體乳液對(duì)肝臟有較強(qiáng)的靶向性，而鼻腔給藥，能提高藥物在肺部的分布，但對(duì)于藥物穿透血腦屏障無(wú)促進(jìn)作用；急性毒性試驗(yàn) [6]表明，腹腔注射 LD50為 177。 ，與利巴韋林水溶液比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；局部刺激性試驗(yàn)，脂質(zhì)體乳液不增加鼻粘膜的刺激性。大鼠灌胃給予 利巴韋林脂質(zhì)體口服乳 900mg/kg，與市售的利巴韋林口服液比較， 脂質(zhì)體乳液釋藥更平緩，在體內(nèi)滯留時(shí)間長(zhǎng)于市售的口服液， 達(dá)峰時(shí)間（ Tmax）為 小時(shí)，口服液為 小時(shí)； 5 藥物濃度峰值（ Cmax）為 g/mL， AUC 為 g h/mL， 消除速率常數(shù) k 值為 L/h，而 口服液為 L/h；相對(duì)生物利用度為 ％，與口服液等效。大鼠灌胃給予 利巴韋林脂質(zhì)體口服乳與市售口服液的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如表 31 所示。 利巴韋林脂質(zhì)體口服乳液 已完成臨床前試驗(yàn)研究，正在申報(bào)臨床試驗(yàn) 。 表 31 大鼠灌胃給予 利巴韋林 脂質(zhì)體口服乳與市售口服液的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較 [5] 參數(shù) 市售口服液 脂質(zhì)體口服乳 Tmax（ h） Cmax（ μ g/mL） AUC（ S0）（μ g h/mL） AUMC(S1) AUMC(S2) MRT（ h） VRT（ h2） k 抗人免疫缺陷病毒藥物 人免疫缺陷病毒（ HIV）所致獲得性免疫缺 陷綜合征（ acquired immunodeficiency syndrome），簡(jiǎn)稱艾滋病（ AIDS）是危害性極大、死亡率很高的傳染病 , 據(jù) 2022 年 12 月世界衛(wèi)生組（ WHO） 和 聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署 聯(lián)合公布的 全球艾滋病流行報(bào)告，全世界 現(xiàn)有 AIDS 患者和 HIV 攜帶者人數(shù)為 3940萬(wàn)， 2022 年 新增感染者 490 萬(wàn)， 死 亡 310 萬(wàn) 。自 20 世紀(jì) 80 年代初發(fā)現(xiàn)第一批病例，至今累計(jì) 死于AIDS 的總?cè)藬?shù)已經(jīng) 超過(guò) 3000 萬(wàn) ； 中國(guó)現(xiàn)有 HIV 感染者 約 84 萬(wàn)人；其中， AIDS 病人約 8 萬(wàn)例 ，已死亡近 10 萬(wàn)人。若不加以有效地控制，至 2022 年 HIV 感染人數(shù)可能達(dá)到 600 萬(wàn)例， AIDS 患者 120萬(wàn)例，將造成嚴(yán)重的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)問(wèn)題。 抗 HIV 藥物近 20 多年來(lái)發(fā)展較迅速，至 2022 年底 國(guó)外已批準(zhǔn)上市的抗 HIV 藥物 21 個(gè)品種，另有 5 個(gè)固定處方的復(fù)方制劑，其中抗 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 11 個(gè)，抗 HIV 蛋白酶抑制劑 9 個(gè)， HIV 受體細(xì)胞融合抑制劑 1 個(gè)；我國(guó)批準(zhǔn)生產(chǎn)的有 6 個(gè)品種。國(guó)外 2022 年在研的有 119 個(gè)品種，已進(jìn)入 III期臨床研究的有 10 個(gè)品種，預(yù)計(jì)在 2022～ 2022 年 可能上市的有非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制藥卡帕韋林（ capravirine）和 HIV CCR5 受體抑制藥馬雷韋羅（ maraviroc）；已批準(zhǔn)上市的阿德福韋酯（ adefovir dipivoxil）也可能擴(kuò)大適應(yīng)癥用于治療 艾滋病 。 抗 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制藥 HIV 逆轉(zhuǎn)錄酶（ RT）是 HIV pol 基因編碼的多功能