檢疫性真菌病害ppt課件(已修改)
2025-01-20 05:00 本頁面
【正文】 第五章 檢疫性真菌病害 ? 小麥矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt ? 小麥印度腥黑穗病 Wheat karnal bunt ? 煙草霜霉病 Tobacco blue mold ?馬鈴薯癌腫病 Potato wart ?榆樹枯萎病 Dutch elm disease 復習思考題 植物檢疫性真菌常見檢疫檢驗技術 ? 直接檢驗 ? 染色檢驗 ? 洗滌檢驗 ? 保濕萌芽檢驗 ? 分離培養(yǎng)檢驗 ? 適用范圍：具明顯癥狀的植物材料 ? 主要工具：放大鏡或解剖鏡，主要是利用肉眼現(xiàn)場快速初檢 ? 原理：染病的組織，或病原菌本身，經(jīng)特殊的化學藥品處理后，可帶有特殊的顏色 ? 例如：馬鈴薯癌腫病 （ Synchytrium endobioticum） 薯塊上癌瘤不明顯時，可做徒手切片，加 1滴 1％的 “ 藏花紅 ” 染色液，健康組織細胞壁呈亮紅色，感病組織細胞壁呈暗紅色。 ? 原理：種子表面常附著真菌孢子，將一定量的樣品放入容器內(nèi)，加一定量的無菌水，充分振蕩，可使病菌孢子洗滌下來，而后離心后，可沉淀，鏡檢沉淀物可確定其種類和數(shù)量。 ? 主要儀器和試劑：振蕩器、離心機、顯微鏡、 ％吐溫溶液等 ? 主要試驗流程如下： 稱取樣品 洗脫孢子（振蕩） 離心富集 鏡檢計數(shù) ? 影響檢驗結(jié)果的因素： ① 種子表面的病菌孢子不一定能完全洗滌下來； ② 離心管內(nèi)，懸浮液表面常形成一層極難沉降的孢子薄膜，管壁上也可能黏附孢子； ③ 將懸浮液滴于玻片時，由于孢子迅速沉淀，造成一些視野間孢子分布極不均勻； ④ 操作不夠嚴格，造成人為誤差。 ? 原理：種子攜帶的真菌，無論外表黏附的還是潛伏種子內(nèi)的，在種子萌發(fā)階段即可開始侵染，甚至有些在種子還未萌發(fā)時就可長出病菌。 ? 主要儀器及試劑：吸水紙、沙土、冰箱、培養(yǎng)箱等。 ? 主要包括：保濕培養(yǎng)檢驗、沙土萌芽和土內(nèi)萌芽檢驗等三種方法，其中保濕培養(yǎng)檢驗法是國內(nèi)外最常用的一種方法。 ? 吸水紙法 無菌吸水紙（ 3層） 滅菌培養(yǎng)皿 ○ ○ ○ ○ ○ 吸水 1－ 培養(yǎng)、觀察 12h光照黑暗交替 恒溫 所觀察到的結(jié)果示意圖如下 ? 常規(guī)植物病理學方法 小麥矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt ?分布： 是麥類黑穗病中危害最大、防治最難的一種病害，它于 1847年及 1860年先后發(fā)現(xiàn)于捷克和美國，在全世界范圍內(nèi)傳播和蔓延，目前已在歐洲、北美、南美、澳洲、亞洲、非洲等 40多個國家發(fā)生。 ?寄主： 禾本科 5個族， 18個屬， 65個種。主要栽培植物有冬小麥、大麥、黑麥，冰草屬為天然發(fā)病的主要禾草寄主。 ?危害性： 1962年美國減產(chǎn) ％， 1972年西部 7州，平均減產(chǎn) 17％，損失 1. 2億 Kg。菌癭可存活 10年以上。 ?癥狀 ： 系統(tǒng)侵染性，表現(xiàn)為：病株特矮（ 1/3～ 1/2），分孽特多（ 1倍），病穗特密，病粒特硬，有魚腥臭味。 ?病原菌： Tilletia controversa . K252。hn, in Rabenhorst, Hedwigia 13: 188 (1874) ? Position in classification: Tilletiaceae, Tilletiales, Exobasidiomycetidae, Ustilaginomycetes, Basidiomycota, Fungi ?形態(tài)特征： 冬孢子 ， 冬孢子萌發(fā) 。 ?生物學特征： 冬孢子萌發(fā) 2～ 15（ 3~8） ℃ ，弱光 400～ 600lx，土壤含水量 35～ 88％，萌發(fā)周期長 3個月。冬孢子內(nèi)含有內(nèi)源孢子萌發(fā)抑制劑。 ?生理分化： 美國 15小種，德國 8個小種。 ?初侵染來源： 土壤帶菌，冬孢子可存活 1年，菌癭可存活 3～10年。 ?傳播： 種子；運輸工具、包裝材料及下腳料；糞肥；雨水。 ?發(fā)病規(guī)律 ： 侵染期長， 12月～ 4月， 1～ 2月是盛期，幼嫩分蘗處侵入，細胞間蔓延， 50天到生長點，隨寄主生長，菌絲進入穗原始體，到各個花器，破壞子房，形成冬孢子堆。長時間 3～ 8 ℃ 低溫利于侵染；冬麥區(qū)苗期日平均溫度 0～ 10 ℃ 達 45d以上，即使沒有雪覆蓋也同樣利于發(fā)病。 ?TCK的循環(huán) : ?流行因素 ： 大面積感病品種、足夠菌源、冬季日均溫 0～ 10 ℃ 的日數(shù) 》 40d、穩(wěn)定積雪 70d以上，積雪厚度 10cm以上。 ?國內(nèi)適生區(qū)域： 西北高原冬麥區(qū)和新疆、青藏高原晚播冬麥區(qū)極為適宜病害的發(fā)生，屬高度危險區(qū)；江淮流域及華北、東北冬麥區(qū)基本適合病害發(fā)生，屬危險區(qū)；西南高海拔地區(qū)有時也具備病菌入侵條件，也可能受害；春麥區(qū)不發(fā)病。 ? 檢驗與檢測： ① 直接檢查：放大鏡 菌癭 ② 洗滌檢查： 50g＋ 100ml無菌水，振蕩 5min， 10～15ml離心 3min，定容，制片觀察。 ③ 冬孢子鑒定：孢子形態(tài)鑒定（ 網(wǎng)脊高度、膠鞘厚度、網(wǎng)目徑、孢子大小、不育細胞等） 。 ④ 冬孢子自發(fā)熒光實驗： TCK孢子于熒光顯微鏡下有自發(fā)熒光現(xiàn)象，而 TCT孢子則無。 ⑤ 冬孢子萌發(fā)試驗： 5 ℃ 、 17 ℃ 下，光照。矮腥孢子 5 ℃ 下 21d開始萌發(fā)， 17 ℃ 不萌發(fā)。 ⑥ PCR技術：引物 5`TGACAACGGATCTCTTGGTT3`、 5` TCACCAACTCCAAGCAATCT3 `,206bp處有特異擴增帶。 ? 檢疫和防治 ① 進口小麥和原糧必須進行檢疫，病麥需除害處理 ② 帶菌小麥原糧必須集中在幾個規(guī)定有條件的口岸
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