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2007年研究生高級生化技術(shù)(1)(已修改)

2024-10-28 15:34 本頁面
 

【正文】 高級生化技術(shù) 中山醫(yī)學(xué)院 生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室 錢艷 Email: 實(shí)驗(yàn)一 基因組 DNA的制備 基因組 DNA的提取通常用于構(gòu)建基因組文 庫 、 Southern雜交及 PCR分離基因等 。 基因組 DNA的提取與純化 ?核酸分離純化的總原則: ? 保證核酸一級結(jié)構(gòu)完整 ? 排除其他分子的污染 ( 蛋白質(zhì) 、 脂 類 、 糖 、 有機(jī)熔劑 、 金屬離子 、 外源 DNA、 RNA等 ) 核酸提取的主要步驟 主要包括:破碎細(xì)胞,去除與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)及多糖、脂類等生物大分子,去除其它不需要的核酸分子、去除鹽類、有機(jī)溶劑等雜質(zhì),純化核酸等。 核酸提取注意事項(xiàng) ? 減少化學(xué)因素對核酸的降解(如過量酸堿) ? 減少物理因素對核酸的降解(機(jī)械剪切力:強(qiáng)烈震蕩、滲透壓急劇改變、反復(fù)凍融;高溫等) ? 防止核酸的生物降解(核酸酶的預(yù)防) 人基因組 DNA的制備 ? 實(shí)驗(yàn)
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