2007年研究生高級(jí)生化技術(shù)(1)-文庫(kù)吧
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【正文】 目的及意義 1. 從人口腔上皮細(xì)胞中提取純的基因組 DNA 2. 掌握基因組 DNA抽提的方法，理解核酸分離純化的基本原理 ? 基因組 DNA提取原理 利用基因組 DNA較長(zhǎng)的特性，可以將其與細(xì)胞器或質(zhì)粒等小分子 DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇，基因組的大分子 DNA即沉淀形成纖維狀絮團(tuán)漂浮其中，可用玻璃棒將其取出，而小分子 DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部，從而達(dá)到提取的目的。 ? 分離純化基因組 DNA的方法有很多種 ： 不同生物 （ 植物 、 動(dòng)物 、 微生物 ） 的基因組 DNA的提取方法有所不同 ， 分離方法也有差異 。 但原理相似 ， 因此它們有共同的步驟 ： ① 裂解細(xì)胞 ： SDS裂解細(xì)胞 ， EDTA抑制核酸酶 ② 除去蛋白質(zhì) ：蛋白酶 K水解蛋白質(zhì) ， 酚和氯仿 /異戊醇 抽提 、 分離蛋白質(zhì)； ③ 析出 DNA：乙醇沉淀使 DNA從溶液中析出 。 ? 實(shí)驗(yàn)材料及試劑 材料： 人口腔上
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