【正文】 h225。n)物,細菌結(jié)構(gòu)模式圖,一、概述,第十六頁，共九十八頁。,(2)真核細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu) 三大結(jié)構(gòu)體系： 生物膜系統(tǒng) 質(zhì)膜、內(nèi)膜系統(tǒng)（細胞器） 遺傳信息表達(biǎod225。)系統(tǒng) 染色質(zhì)(體)、核糖體、 mRNA、tRNA等 細胞骨架系統(tǒng) 胞質(zhì)骨架、核骨架,一、概述(ɡ224。i sh249。),第十七頁，共九十八頁。,微 絲,葉綠體,線粒體,質(zhì) 膜,液 泡,細胞核,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),微 管,細胞壁,高爾基體,植物(zh237。w249。)細胞模式圖,第十八頁，共九十八頁。,動物細胞模式圖,微 絲,微 管,質(zhì) 膜,線粒體,中心(zhōngxīn)體,細胞核,溶酶體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基體,第十九頁，共九十八頁。,(1) 無絲分裂——無紡錘絲出現(xiàn)(chūxi224。n)，染色體（DNA）復(fù)制后直接移到兩個仔細胞中。,(2) 細胞增殖(zēngzh237。)周期（有絲分裂）,G0期：休眠期 G1期：DNA合成前期 S 期：DNA合成期 G2期: DNA合成后期(h242。uqī) M 期：有絲分裂期,細胞的分裂和分化,第二十頁，共九十八頁。,①細胞分裂間期,② 有絲分裂(yǒu sī fēn li232。)期,前期(qi225。nqī),中期(zhōngqī),后期,末期,子細胞,分為G1期、S期和G2期三個階段。,新生細胞的去向：重新進入細胞周期、 細胞分化 成為Go期細胞,第二十一頁，共九十八頁。,(3)細胞分化 多細胞生物體是由各種各樣形態(tài)和功能都不同的細胞群所組成。高等動、植物由受精卵細胞開始的胚胎發(fā)生過程(gu242。ch233。ng)隨著細胞分裂次數(shù)的增加而使得早期胚胎的細胞數(shù)量也增加許多。其中有些細胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上逐漸發(fā)生了差異，這種細胞之間差異的發(fā)生過程(gu242。ch233。ng)就是細胞分化。個體發(fā)育的過程(gu242。ch233。ng)就是細胞分化的過程(gu242。ch233。ng)，個體的各種器官和組織都是通過細胞分化形成的。,一、概述(ɡ224。i sh249。),第二十二頁，共九十八頁。, 癌細胞,癌細胞的主要(zhǔy224。o)特征,1. 脫分化：已分化細胞失去分化后的特性(t232。x236。ng)，恢復(fù)分裂增殖能力。 2. 無限增殖 3. 失去接觸抑制現(xiàn)象 4.細胞表面和粘附性質(zhì)改變 5. 細胞骨架紊亂 6.對生長因子需求降低,一、概述(ɡ224。i sh249。),第二十三頁，共九十八頁。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,（一）微生物細胞工程 定義：微生物細胞工程應(yīng)用微生物進行細胞水平的研究與生產(chǎn)(shēngchǎn)，具體內(nèi)容包括各種微生物細胞的培養(yǎng)、遺傳性狀的改造、微生物細胞的直接利用或獲得細胞代謝產(chǎn)物等。 細胞融合基本過程 原生質(zhì)體的制備→ 融合重組→ 原生質(zhì)體再生成細胞→ 融合重組的測定,第二十四頁，共九十八頁。,（1）原生質(zhì)體的制備 酶解法 質(zhì)生質(zhì)體的形成率＝原生質(zhì)體數(shù)/未經(jīng)酶處理的總菌數(shù)。 ① 革蘭氏陽性菌：溶菌酶，肽聚糖中N－乙酰胞壁酸與N－乙酰葡萄糖胺之間的β －1,4－糖苷鍵 ②革蘭氏陰性菌：溶菌酶+(數(shù)分鐘后）0.1mol/L的EDTA共同作用(zu242。y242。ng)15－20min，則可使90%以上的革蘭氏陰性菌轉(zhuǎn)變?yōu)榭晒┘毎诤嫌玫那驙铙w。 ③ 真核細胞：消解酶、蝸牛酶、纖維素酶、幾丁質(zhì)酶等處理，原生質(zhì)體得率在90%以上。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,第二十五頁，共九十八頁。,注意：原生質(zhì)體制備后必須(b236。xū)用滲透壓穩(wěn)定劑維持其穩(wěn)定性。 （2）融合重組 p146圖4－6 注意：原生質(zhì)體融合重組作為基因聲稱的一種有效方法，需經(jīng)歷三個主要階段：細胞融合形成異核體、不同核融合產(chǎn)生二倍體、融合核交換和重組生成重組體 （3）原生質(zhì)體再生成細胞,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,第二十六頁，共九十八頁。,置于高滲再手固體培養(yǎng)基中。 再生頻率＝（原生質(zhì)體再生細胞數(shù)/總菌落數(shù)） 100% (主要是利用原生質(zhì)體對滲透壓的敏感性） （4）融合重組的測定 ① 直接法：不補充(bǔchōng)兩親株生長所需營養(yǎng)物或補充(bǔchōng)兩種藥物 ② 間接法:親株和重組子都再生，然后用影印法復(fù)制到選擇培養(yǎng)基上以檢出重組子。 融合頻率＝融合子數(shù)/再生的原生質(zhì)體數(shù),二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,第二十七頁，共九十八頁。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,（二）植物細胞工程 定義:以植物細胞為基本單位在體外條件下進行培養(yǎng)、繁殖和人為操作，改變細胞的某些生物學(xué)特性，從而改良品種加速繁育植物個體或獲得有用(yǒu y242。nɡ)物質(zhì)的技術(shù)。 植物組織培養(yǎng) （1）植物組織培養(yǎng)：是一種將植物組織、器官或細胞在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進行無菌培養(yǎng)，并重新再生細胞或植株的技術(shù)，包括植物培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng),第二十八頁，共九十八頁。,植物(zh237。w249。)組織培養(yǎng),第二十九頁，共九十八頁。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,(2)進行植物組織培養(yǎng)，一般要經(jīng)歷以下五個階段： a 外植體的選擇及培養(yǎng) 。 b 誘導(dǎo)去分化階段 。 c 繼代增殖階段 。 d 誘導(dǎo)分化生根成芽階段 。 e 移栽(y237。 zāi)成活階段 。,第三十頁，共九十八頁。,植物(zh237。w249。)細胞培養(yǎng),二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,單個 細胞(x236。bāo),營養(yǎng)培養(yǎng)基,克隆植株,工業(yè)化植物細胞培養(yǎng)系統(tǒng)主要有兩大類： 懸浮細胞培養(yǎng)系統(tǒng)和固定化細胞培養(yǎng)系統(tǒng),第三十一頁，共九十八頁。, 植物(zh237。w249。)細胞雜交,1960年英國諾丁漢大學(xué)Cocking 教授領(lǐng)導(dǎo)的小組率先利用真菌纖維素酶，成功地制備出了大量具有高度(gāod249。)活性可再生的番茄幼根細胞原生質(zhì)體, 開辟了原生質(zhì)體融合研究的新階段。 植物細胞雜交的主要過程如下： (1) 原生質(zhì)體的制備：機械法與酶法 (2) 原生質(zhì)體的融合 ：物理方法與化學(xué)法 ；膜融合與核融合,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,第三十二頁，共九十八頁。,(3) 雜合體的鑒別與篩選 ：顯微鏡、互補法、細胞與分子生物學(xué)法 注：原生質(zhì)體培養(yǎng)過程(gu242。ch233。ng)：脫去細胞壁的原生質(zhì)體→ 細胞壁再生→ 細胞分裂形成細胞團→ 愈傷組織→ 分化形成芽和根→ 完整植株,二、不同(b249。 t243。nɡ)對象的細胞工程,第三十三頁，共九十八頁。,細胞育種 誘導(dǎo)突變(tūbi224。n)，篩選新品系、新品種,次生(c236。shēng)代謝產(chǎn)物生成 從培養(yǎng)的植物細胞中提取所需的代謝產(chǎn)物。 優(yōu)點 ?比栽培原料作物更易控制最佳生產(chǎn)條件； ?培養(yǎng)物為無菌、無蟲材料，能保證產(chǎn)品質(zhì)量； ?工藝操作較為簡單，可減少勞動費用，提高 生產(chǎn)率。,植物(zh237。w249。)細胞工程的應(yīng)用,第三十四頁，共九十八頁。,植物(zh237。w249。)細胞工程的實際應(yīng)用,江