【正文】 h225。n)物,細(xì)菌結(jié)構(gòu)模式圖,一、概述,第十六頁(yè)，共九十八頁(yè)。,(2)真核細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu) 三大結(jié)構(gòu)體系： 生物膜系統(tǒng) 質(zhì)膜、內(nèi)膜系統(tǒng)（細(xì)胞器） 遺傳信息表達(dá)(biǎod225。)系統(tǒng) 染色質(zhì)(體)、核糖體、 mRNA、tRNA等 細(xì)胞骨架系統(tǒng) 胞質(zhì)骨架、核骨架,一、概述(ɡ224。i sh249。),第十七頁(yè)，共九十八頁(yè)。,微 絲,葉綠體,線粒體,質(zhì) 膜,液 泡,細(xì)胞核,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),微 管,細(xì)胞壁,高爾基體,植物(zh237。w249。)細(xì)胞模式圖,第十八頁(yè)，共九十八頁(yè)。,動(dòng)物細(xì)胞模式圖,微 絲,微 管,質(zhì) 膜,線粒體,中心(zhōngxīn)體,細(xì)胞核,溶酶體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基體,第十九頁(yè)，共九十八頁(yè)。,(1) 無(wú)絲分裂——無(wú)紡錘絲出現(xiàn)(chūxi224。n)，染色體（DNA）復(fù)制后直接移到兩個(gè)仔細(xì)胞中。,(2) 細(xì)胞增殖(zēngzh237。)周期（有絲分裂）,G0期：休眠期 G1期：DNA合成前期 S 期：DNA合成期 G2期: DNA合成后期(h242。uqī) M 期：有絲分裂期,細(xì)胞的分裂和分化,第二十頁(yè)，共九十八頁(yè)。,①細(xì)胞分裂間期,② 有絲分裂(yǒu sī fēn li232。)期,前期(qi225。nqī),中期(zhōngqī),后期,末期,子細(xì)胞,分為G1期、S期和G2期三個(gè)階段。,新生細(xì)胞的去向：重新進(jìn)入細(xì)胞周期、 細(xì)胞分化 成為Go期細(xì)胞,第二十一頁(yè)，共九十八頁(yè)。,(3)細(xì)胞分化 多細(xì)胞生物體是由各種各樣形態(tài)和功能都不同的細(xì)胞群所組成。高等動(dòng)、植物由受精卵細(xì)胞開(kāi)始的胚胎發(fā)生過(guò)程(gu242。ch233。ng)隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增加而使得早期胚胎的細(xì)胞數(shù)量也增加許多。其中有些細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上逐漸發(fā)生了差異，這種細(xì)胞之間差異的發(fā)生過(guò)程(gu242。ch233。ng)就是細(xì)胞分化。個(gè)體發(fā)育的過(guò)程(gu242。ch233。ng)就是細(xì)胞分化的過(guò)程(gu242。ch233。ng)，個(gè)體的各種器官和組織都是通過(guò)細(xì)胞分化形成的。,一、概述(ɡ224。i sh249。),第二十二頁(yè)，共九十八頁(yè)。, 癌細(xì)胞,癌細(xì)胞的主要(zhǔy224。o)特征,1. 脫分化：已分化細(xì)胞失去分化后的特性(t232。x236。ng)，恢復(fù)分裂增殖能力。 2. 無(wú)限增殖 3. 失去接觸抑制現(xiàn)象 4.細(xì)胞表面和粘附性質(zhì)改變 5. 細(xì)胞骨架紊亂 6.對(duì)生長(zhǎng)因子需求降低,一、概述(ɡ224。i sh249。),第二十三頁(yè)，共九十八頁(yè)。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,（一）微生物細(xì)胞工程 定義：微生物細(xì)胞工程應(yīng)用微生物進(jìn)行細(xì)胞水平的研究與生產(chǎn)(shēngchǎn)，具體內(nèi)容包括各種微生物細(xì)胞的培養(yǎng)、遺傳性狀的改造、微生物細(xì)胞的直接利用或獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物等。 細(xì)胞融合基本過(guò)程 原生質(zhì)體的制備→ 融合重組→ 原生質(zhì)體再生成細(xì)胞→ 融合重組的測(cè)定,第二十四頁(yè)，共九十八頁(yè)。,（1）原生質(zhì)體的制備 酶解法 質(zhì)生質(zhì)體的形成率＝原生質(zhì)體數(shù)/未經(jīng)酶處理的總菌數(shù)。 ① 革蘭氏陽(yáng)性菌：溶菌酶，肽聚糖中N－乙酰胞壁酸與N－乙酰葡萄糖胺之間的β －1,4－糖苷鍵 ②革蘭氏陰性菌：溶菌酶+(數(shù)分鐘后）0.1mol/L的EDTA共同作用(zu242。y242。ng)15－20min，則可使90%以上的革蘭氏陰性菌轉(zhuǎn)變?yōu)榭晒┘?xì)胞融合用的球狀體。 ③ 真核細(xì)胞：消解酶、蝸牛酶、纖維素酶、幾丁質(zhì)酶等處理，原生質(zhì)體得率在90%以上。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,第二十五頁(yè)，共九十八頁(yè)。,注意：原生質(zhì)體制備后必須(b236。xū)用滲透壓穩(wěn)定劑維持其穩(wěn)定性。 （2）融合重組 p146圖4－6 注意：原生質(zhì)體融合重組作為基因聲稱(chēng)的一種有效方法，需經(jīng)歷三個(gè)主要階段：細(xì)胞融合形成異核體、不同核融合產(chǎn)生二倍體、融合核交換和重組生成重組體 （3）原生質(zhì)體再生成細(xì)胞,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,第二十六頁(yè)，共九十八頁(yè)。,置于高滲再手固體培養(yǎng)基中。 再生頻率＝（原生質(zhì)體再生細(xì)胞數(shù)/總菌落數(shù)） 100% (主要是利用原生質(zhì)體對(duì)滲透壓的敏感性） （4）融合重組的測(cè)定 ① 直接法：不補(bǔ)充(bǔchōng)兩親株生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物或補(bǔ)充(bǔchōng)兩種藥物 ② 間接法:親株和重組子都再生，然后用影印法復(fù)制到選擇培養(yǎng)基上以檢出重組子。 融合頻率＝融合子數(shù)/再生的原生質(zhì)體數(shù),二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,第二十七頁(yè)，共九十八頁(yè)。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,（二）植物細(xì)胞工程 定義:以植物細(xì)胞為基本單位在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖和人為操作，改變細(xì)胞的某些生物學(xué)特性，從而改良品種加速繁育植物個(gè)體或獲得有用(yǒu y242。nɡ)物質(zhì)的技術(shù)。 植物組織培養(yǎng) （1）植物組織培養(yǎng)：是一種將植物組織、器官或細(xì)胞在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，并重新再生細(xì)胞或植株的技術(shù)，包括植物培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng),第二十八頁(yè)，共九十八頁(yè)。,植物(zh237。w249。)組織培養(yǎng),第二十九頁(yè)，共九十八頁(yè)。,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,(2)進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，一般要經(jīng)歷以下五個(gè)階段： a 外植體的選擇及培養(yǎng) 。 b 誘導(dǎo)去分化階段 。 c 繼代增殖階段 。 d 誘導(dǎo)分化生根成芽階段 。 e 移栽(y237。 zāi)成活階段 。,第三十頁(yè)，共九十八頁(yè)。,植物(zh237。w249。)細(xì)胞培養(yǎng),二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,單個(gè) 細(xì)胞(x236。bāo),營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,克隆植株,工業(yè)化植物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)主要有兩大類(lèi)： 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和固定化細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),第三十一頁(yè)，共九十八頁(yè)。, 植物(zh237。w249。)細(xì)胞雜交,1960年英國(guó)諾丁漢大學(xué)Cocking 教授領(lǐng)導(dǎo)的小組率先利用真菌纖維素酶，成功地制備出了大量具有高度(gāod249。)活性可再生的番茄幼根細(xì)胞原生質(zhì)體, 開(kāi)辟了原生質(zhì)體融合研究的新階段。 植物細(xì)胞雜交的主要過(guò)程如下： (1) 原生質(zhì)體的制備：機(jī)械法與酶法 (2) 原生質(zhì)體的融合 ：物理方法與化學(xué)法 ；膜融合與核融合,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,第三十二頁(yè)，共九十八頁(yè)。,(3) 雜合體的鑒別與篩選 ：顯微鏡、互補(bǔ)法、細(xì)胞與分子生物學(xué)法 注：原生質(zhì)體培養(yǎng)過(guò)程(gu242。ch233。ng)：脫去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體→ 細(xì)胞壁再生→ 細(xì)胞分裂形成細(xì)胞團(tuán)→ 愈傷組織→ 分化形成芽和根→ 完整植株,二、不同(b249。 t243。nɡ)對(duì)象的細(xì)胞工程,第三十三頁(yè)，共九十八頁(yè)。,細(xì)胞育種 誘導(dǎo)突變(tūbi224。n)，篩選新品系、新品種,次生(c236。shēng)代謝產(chǎn)物生成 從培養(yǎng)的植物細(xì)胞中提取所需的代謝產(chǎn)物。 優(yōu)點(diǎn) ?比栽培原料作物更易控制最佳生產(chǎn)條件； ?培養(yǎng)物為無(wú)菌、無(wú)蟲(chóng)材料，能保證產(chǎn)品質(zhì)量； ?工藝操作較為簡(jiǎn)單，可減少勞動(dòng)費(fèi)用，提高 生產(chǎn)率。,植物(zh237。w249。)細(xì)胞工程的應(yīng)用,第三十四頁(yè)，共九十八頁(yè)。,植物(zh237。w249。)細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用,江