20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞儀的原理-文庫(kù)吧
2025-10-28 18:42 本頁(yè)面
【正文】 頁(yè)，共五十頁(yè)。,流 式 細(xì) 胞 儀 與 顯 微 鏡 的 區(qū) 別,第十頁(yè)，共五十頁(yè)。,二、散 射 光 的 測(cè) 量,細(xì)胞在液柱中與激光束相交時(shí)向周圍(zhōuw233。i)360176。立體角方向散射的光線信號(hào)，它的強(qiáng)弱與細(xì)胞的大小、形狀、胞內(nèi)顆粒折射等有關(guān)，主要分為前向散射光和側(cè)向散射光。,第十一頁(yè)，共五十頁(yè)。,前 向 散 射 光（FS）,前向散射光（forward scatter, FS）：激光束照射細(xì)胞(x236。bāo)時(shí)，光以相對(duì)軸較小角度(0.5176。～10176。)向前方散射的訊號(hào)用于檢測(cè)細(xì)胞等粒子的表面屬性，信號(hào)強(qiáng)弱與細(xì)胞體積大小成正比。,通常在FCM應(yīng)用中，選取FS作閾值，來(lái)排除樣品(y224。ngpǐn)中的各種碎片及鞘液中的小顆粒，以避免對(duì)被測(cè)細(xì)胞的干擾。,第十二頁(yè)，共五十頁(yè)。,前 向 散 射 光 示 意 圖,第十三頁(yè)，共五十頁(yè)。,前向散射光,第十四頁(yè)，共五十頁(yè)。,側(cè) 向 散 射 光（SS）,側(cè)向散射光（side scatter, SS）：激光束照射細(xì)胞時(shí)，光以90176。角散射的訊號(hào)，用于檢測(cè)(jiǎn c232。)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)屬性。,第十五頁(yè)，共五十頁(yè)。,側(cè) 向 散 射 光 示 意 圖,第十六頁(yè)，共五十頁(yè)。,側(cè)向(c232。 xi224。nɡ)散射光,第十七頁(yè)，共五十頁(yè)。,光 散 射 測(cè) 量 的 用 途,測(cè)得的FS與SS信號(hào)通過(guò)計(jì)算機(jī)處理，可得到(d233。 d224。o)FSSS圖，由此可僅用散射光信號(hào)對(duì)未染色的活細(xì)胞進(jìn)行分析或分選。 此為血細(xì)胞分類的基本原理，但不能分析表面分子。,光散射(sǎnsh232。)測(cè)量最有效用途：從非均一群體中鑒別出某些亞群,第十八頁(yè)，共五十頁(yè)。,三、熒 光 的 測(cè) 量,熒光信號(hào)由被檢細(xì)胞上標(biāo)記的特異性熒光染料受激發(fā)后產(chǎn)生，發(fā)射的熒光波長(zhǎng)與激發(fā)光波長(zhǎng)不同。 每種熒光染料會(huì)產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的熒光和顏色，通過(guò)波長(zhǎng)選擇通透性濾片，可將不同波長(zhǎng)的散射光和熒光信號(hào)區(qū)分開(kāi)，送入不同的光電倍增管。 選擇不同的單抗及染料就可同時(shí)測(cè)定一個(gè)(yī ɡ232。)細(xì)胞上的多個(gè)不同特征。,第十九頁(yè)，共五十頁(yè)。,熒 光 染 料 的 特 性,第二十頁(yè)，共五十頁(yè)。,熒 光 信 號(hào) 的 檢 測(cè),使
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