【正文】 氣象色譜 質(zhì)譜聯(lián)用（ GCMS）和液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。一般將其劃為殘留速測(cè)技術(shù)當(dāng)中的一種手段。尤其適合于多殘留分析。 特點(diǎn)是應(yīng)用于農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測(cè)和多殘留檢測(cè)等具有突出的特點(diǎn)，但由于儀器昂貴，目前在國(guó)內(nèi)尚未廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留量檢測(cè)工作。 2）電化學(xué)方法 ? 電化學(xué)分析方法是一種快速、靈敏、準(zhǔn)確的微量和痕量分析方法。 ? 極譜法具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便快速等特點(diǎn)，尤其是樣品前處理上可簡(jiǎn)化許多步驟，適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，但需特殊的選擇電極，應(yīng)用受到一定限制。 1）超臨界流體色譜（ SFE） SCF就是以超臨界流體作為色譜流動(dòng)相的色譜?？梢允褂酶鞣N類型的較長(zhǎng)色譜柱；可在較低溫度下分析相對(duì)分子質(zhì)量較大、對(duì)熱不穩(wěn)定的化合物和極性較強(qiáng)的化合物；可與各種氣象高效液相色譜檢測(cè)其匹配；可與紅外質(zhì)譜聯(lián)用；可以通過(guò)調(diào)節(jié)壓力、溫度、流動(dòng)相組成多重梯度，選擇最佳色譜條件。 SFC綜合利用了氣象色譜和高效液相色譜的優(yōu)點(diǎn)，克服了各自的缺點(diǎn)。 SFC主要流程包括 :高壓流動(dòng)相輸送系統(tǒng)、色譜分離系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)三個(gè)部分。 2）毛細(xì)管區(qū)帶電泳（ CZE） ? 毛細(xì)管區(qū)帶電泳 是對(duì)一般常規(guī)液相色譜方法難以分離的離子型化合物的理想分析方法。特別適合于分離常規(guī)液譜難以分離的離子型化合物。 ? 優(yōu)點(diǎn) ： 具有簡(jiǎn)單、快速、成本低、高效、所需樣品量極少，一般只需幾納升（ nL）。 ? 不足 ： 毛細(xì)管區(qū)帶電泳尚缺乏靈敏度很高的檢測(cè)器。 3）免疫分析技術(shù) ? 免疫分析法（ IA） 是將免疫反應(yīng)與現(xiàn)代測(cè)試手段相結(jié)合而建立的超微量測(cè)定技術(shù)。是生物酶技術(shù)、熒光光譜技術(shù)、輻射技術(shù)和免疫分析技術(shù)應(yīng)用于農(nóng)藥殘留分析領(lǐng)域的一門新技術(shù)。是基于抗原和抗體之間的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的一種微量分析方法。 ? 原理 :農(nóng)藥是半抗原，一般不具備抗原性不能刺激動(dòng)物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，需先將該小分子通過(guò)與一定碳鏈長(zhǎng)度、大分子的載體蛋白質(zhì)（通常使用牛血清白蛋白、兔血清白蛋白、卵清蛋白）以共價(jià)鍵相偶聯(lián)制備成人工抗原，是動(dòng)物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生式別該農(nóng)藥并與之特異性結(jié)合的抗體。再通過(guò)對(duì)半抗原或抗體進(jìn)行標(biāo)記（酶、熒光物質(zhì)、放射性核等），利用標(biāo)記物的生物、物理、化學(xué)放大作用，對(duì)樣品中的特定農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。 （ FIA） 此法是將抗血清、待測(cè)農(nóng)藥、熒光標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥混合在聚苯乙烯管中，經(jīng)培育后加入γ球蛋白和相對(duì)分子質(zhì)量為 6000的聚乙二醇，使與之結(jié)合的待測(cè)農(nóng)藥和熒光標(biāo)記的農(nóng)藥沉淀下來(lái)；未被測(cè)的熒光標(biāo)記的農(nóng)藥留在上清夜中。當(dāng)抗血清與熒光標(biāo)記農(nóng)藥的量一定時(shí)，含待測(cè)農(nóng)藥多的試管中，抗體結(jié)合的熒光標(biāo)記農(nóng)藥少，上清液中游離的熒光標(biāo)記的農(nóng)藥就多。即待測(cè)物含量與游離的熒光標(biāo)記物含量成正比，測(cè)定上清液的熒光強(qiáng)度，即可算出待測(cè)物含量。 法（ EIA） 優(yōu)點(diǎn)：酶免疫法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、方便快速、分析容量大、分析成本低、安全可靠等。 局限性：如開(kāi)發(fā)過(guò)程需要投入較多的資金和時(shí)間，得到一個(gè)好的抗原并不容易，對(duì)試劑的選擇性高，很難同時(shí)分析多種成分，對(duì)結(jié)構(gòu)類似的化合物有一定的交叉反應(yīng)。 ? 根據(jù)其特點(diǎn)和步驟分為酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ ELISA）和酶放大免疫測(cè)試法（ EMIT） (1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 該法利用酶標(biāo)記抗體或抗原，通過(guò)對(duì)抗原與抗體之間的 ELISA反應(yīng)依靠比色法來(lái)確定農(nóng)藥的殘留量。 優(yōu)點(diǎn) :特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速、廉價(jià)、不需繁瑣的預(yù)處理已成為現(xiàn)場(chǎng)分析的首選方法。 缺點(diǎn) :制備抗體較困難，可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性現(xiàn)象。 (2)酶放大免疫測(cè)試法 基本原理：是用特定的酶標(biāo)記待測(cè)農(nóng)藥，然后將抗體、酶標(biāo)記農(nóng)藥、待測(cè)農(nóng)藥同時(shí)加入反應(yīng)試管中進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反映。酶標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥與抗體結(jié)合后，酶被抑制而失去活性。樣本中待測(cè)農(nóng)藥越多，則游離的未被抑制的酶也越多，根據(jù)吸附反應(yīng)后酶活性的改變可以測(cè)定出農(nóng)藥含量。 該法缺點(diǎn)就是每一種待測(cè)農(nóng)藥都必須進(jìn)行酶標(biāo)記，限制了該法的推廣運(yùn)用。 ? 原理 ： 它是將抗血清與待測(cè)農(nóng)藥在試管中培育一定時(shí)間后，加入同位素標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥，該同位素標(biāo)記農(nóng)藥即和待測(cè)農(nóng)藥競(jìng)爭(zhēng)與抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒈豢贵w結(jié)合的和未被抗體結(jié)合的標(biāo)記農(nóng)藥分離，未被抗體結(jié)合的放射性標(biāo)記農(nóng)藥留在溶液中。待測(cè)農(nóng)藥含量越大，則標(biāo)記農(nóng)藥被抗體結(jié)合的量就越少，游離的標(biāo)記農(nóng)藥就越多，溶液中的放射強(qiáng)度就越大。待測(cè)農(nóng)藥的含量與反應(yīng)后溶液中的放射強(qiáng)度成正比，根據(jù)放射強(qiáng)度就可得出待測(cè)物含量。 該法不適于大批樣品的常規(guī)檢測(cè)，但樣品制備簡(jiǎn)單，植株樣品可直接用乙酸乙酯提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮，比液相色譜（ LC）簡(jiǎn)單，分析速度約為后者的五倍 。 （ FIIA） ? 流動(dòng)注射免疫分析是由免疫分析與流動(dòng)注射系統(tǒng)相結(jié)合而形成的。在農(nóng)藥殘留分析中是較為先進(jìn)的技術(shù)，抗農(nóng)藥的抗體固定在可更換柱芯的膜上。 ? 基本原理 ：用泵將農(nóng)藥樣品液流過(guò)膜，清洗后再將酶標(biāo)的半抗原過(guò)膜，膜經(jīng)過(guò)數(shù)次清洗，將生成的底物泵過(guò)柱，檢測(cè)有色的產(chǎn)物，檢測(cè)信號(hào)與農(nóng)藥的濃度成反比。 4）直接光譜分析技術(shù) ? 近紅外衰減全反射光譜和表面增強(qiáng)拉曼光譜是光譜分析的靈敏度提高 102 ~ 107倍。這些快速、直接的光譜技術(shù)只需極少量的樣品，具有很大的反應(yīng)潛力。還有激光光譜技術(shù)，如激光拉曼光譜可使光譜分析的靈敏度幾乎達(dá)到極限 —一個(gè)分子或原子水平。該技術(shù)只需要極少量的樣品，幾乎不需要樣品預(yù)處理，這將為開(kāi)發(fā)高靈敏度的檢測(cè)器提供可能的技術(shù)基礎(chǔ)，具有很大的應(yīng)用潛力。 5）傳感器技術(shù) ? 生物傳感器 是由一種生物敏感膜和電化學(xué)轉(zhuǎn)化器兩部分緊密配合，對(duì)特定種類的化學(xué)物質(zhì)或生物活性具有選擇性和可逆響應(yīng)的分析裝置。 ? 按生物功能可分為 酶?jìng)鞲衅鳎ò娢恍秃碗娏餍停?、免疫傳感器、微生物傳感器? ? 優(yōu)點(diǎn) ： 具有微型化、響應(yīng)速度快、樣品用量少并可以插入生物組織或細(xì)胞內(nèi)的特點(diǎn)。 ? 缺點(diǎn) :主要存在結(jié)果的不穩(wěn)定、難重現(xiàn)性和使用壽命短的問(wèn)題。 ? 采用電導(dǎo)型生物傳感器可以測(cè)定食品中有機(jī)磷農(nóng)藥甲基馬拉松、乙基馬拉松、敵百蟲(chóng)、二乙丙基磷酸等 6）酶抑制技術(shù) ? 酶抑制技術(shù)是利用有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶的活性抑制作用而建立起來(lái)的用于分析此類農(nóng)藥在食品中的殘留量的技術(shù)。 ? 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外在此技術(shù)上進(jìn)行了大量的研究。利用紙片或電極作為載體將酶吸附，并制成速測(cè)箱，是一種快速、靈敏和經(jīng)濟(jì)的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)手段。 7）實(shí)驗(yàn)室機(jī)器人 實(shí)驗(yàn)室機(jī)器人現(xiàn)已商品化，但在農(nóng)藥殘留量分析和環(huán)境監(jiān)測(cè)方面的應(yīng)用還處于起步階段，主要是因?yàn)闄C(jī)器人工作程序的變更缺乏靈活性和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法缺乏標(biāo)準(zhǔn)化所造成。另外機(jī)器人系統(tǒng)動(dòng)作緩慢，一般要求寬闊的空間。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室機(jī)器人變得更方便、靈活、實(shí)驗(yàn)方法也更加標(biāo)準(zhǔn)化時(shí)，它的使用將會(huì)增加。 ? 近年來(lái)食品中獸藥殘留分析的發(fā)展方向： （ 1）是由單一品種分析向多品種分析發(fā)展； （ 2）向待測(cè)樣品制備和前處理的微量化、自動(dòng)化、無(wú)毒化、快速化和低成本方向發(fā)展。 ? 用于檢測(cè)、定量分析和確證動(dòng)物性產(chǎn)品是否存在殘留的檢測(cè)手段包括： 薄層色譜法（ TLC）、氣相色譜法（ GC）、氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法（ GCMS）、高效液相色譜法（ HPLC）、液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法（ LCMS）、放射免疫測(cè)定法（ RIA）以及生物自顯影法。 獸藥殘留快速檢測(cè)方法 ? 獸藥殘留分析技術(shù)是復(fù)雜混合物中的痕量分析技術(shù)，現(xiàn)代獸藥分析方法通常包括樣品的前處理（提取、凈化、濃縮和衍生化）和測(cè)定兩部分。 ? 目前國(guó)內(nèi)外獸藥監(jiān)控檢測(cè)所使用的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法主要有：酶聯(lián)免疫試劑盒或試紙條、抗生素快速篩選法（ FAST）、快速涂抹實(shí)驗(yàn)（ STOP）和磺胺現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)法（ SOS）等。 1）抗生素快速篩選法 該方法是由獸醫(yī)或選派的檢驗(yàn)員在屠宰場(chǎng)對(duì)牲畜中的抗生素或磺胺類進(jìn)行快速篩選檢驗(yàn)。如果結(jié)果顯陰性，產(chǎn)品可被放行。如果結(jié)果顯陽(yáng)性，組織樣品（肌肉、肝、腎）要送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn)。畜體要扣留到實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)出。 2）快速涂抹實(shí)驗(yàn) 該方法是工廠檢驗(yàn)員對(duì)可疑動(dòng)物進(jìn)行廠內(nèi)試驗(yàn)的一種快速方法。通常是對(duì)母牛的抗生素殘留進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，陽(yáng)性樣品的畜體要扣留到實(shí)驗(yàn)室的確認(rèn)結(jié)果發(fā)出。 3）磺胺現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)法 磺胺現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)法是 FSIS開(kāi)發(fā)的針對(duì)豬中磺胺類殘留問(wèn)題的測(cè)定方法，主要用于尿中磺胺的測(cè)定。對(duì)于所有的 SOS測(cè)定陽(yáng)性產(chǎn)品，實(shí)驗(yàn)室將利用組織進(jìn)行確證。 以上快速方法在美國(guó)殘留監(jiān)控的實(shí)施中起著非常重要的作用，被稱為 FSIS特殊計(jì)劃。其主要特點(diǎn)是監(jiān)控樣品量大、快速，是整個(gè)殘留監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)信息的基礎(chǔ)。 4）免疫檢測(cè)技術(shù)（ IA） ? 免疫檢測(cè)技術(shù)是利用抗體和抗原在體外的特異性反應(yīng)建立起來(lái)的檢測(cè)技術(shù)。 ? 酶免疫測(cè)定技術(shù)使用酶標(biāo)記，避免了放射免疫分析方法的放射性污染和標(biāo)記物穩(wěn)定性問(wèn)題。其中ELISA操作簡(jiǎn)便、靈敏，可使得痕量的藥殘分析成為普通實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)技術(shù)，而且可同時(shí)檢測(cè)數(shù)十個(gè)上百個(gè)樣品，是十分理想的大批量樣品中藥殘的快速篩選手段。 ? 國(guó)外的獸藥殘留免疫檢測(cè)多用單克隆抗體，而國(guó)內(nèi)多數(shù)還只停留在多克隆抗體水平。單克隆抗體在靈敏度和交叉反應(yīng)方面都優(yōu)于多克隆抗體，且均一性、專一性和無(wú)限量供應(yīng)性等特點(diǎn)，有利于標(biāo)準(zhǔn)化。 ? 藥物多組分殘留檢測(cè) 方法 又分為多殘留分析方法（可同時(shí)分析多種不同類化合物，如包括有機(jī)氯、有機(jī)磷、擬除蟲(chóng)菊酯等的方法）和選擇性多殘留檢測(cè)方法（指分析一類化合物如有機(jī)磷等的方法）。 ?（ HPLC） HPLC在技術(shù)上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測(cè)器，實(shí)現(xiàn)了操作自動(dòng)化；但需要昂貴的儀器，操作繁瑣，需處理樣品，成本高，檢測(cè)一個(gè)樣大約需一天時(shí)間，成本 120元。 磺胺類藥物（ SA）被廣泛用作飼料添加劑，已成為殘留問(wèn)題最嚴(yán)重的獸藥之一，目前 HPLC是 SA殘留測(cè)定的最主要方法。 HPLC所用的檢測(cè)其主要有以下 4種 ： ? （ 1）紫外分光光度（ UV）檢測(cè)器（左圖） ?（ 2）熒光檢測(cè)器（右圖） （ 3）電化學(xué)檢測(cè)器（左圖） ?（ 4）質(zhì)譜儀檢測(cè)器（右圖） 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) ? 氣相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（ GCMS） 是將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀串聯(lián)成為一個(gè)整機(jī)使用的的檢測(cè)技術(shù)。 ? 特點(diǎn) ： 它既具有氣相色譜高分離性能，又具有質(zhì)譜準(zhǔn)確鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，可達(dá)到及時(shí)定性和定量的檢測(cè)、減少干擾物的影響和提高儀器的靈敏度的目的。 ? 適用于 農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測(cè)和多殘留檢測(cè)。 ? 有機(jī)磷、有機(jī)氯類等農(nóng)藥用有機(jī)溶劑提取，再經(jīng)液液分配等步驟除去干擾物質(zhì)，用氣相色譜帶火焰光度檢測(cè)器（ FPD）或電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)色譜的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其中的殘留物進(jìn)行一次多殘留組分的檢測(cè)。 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) ? 液相色譜的分析能力與質(zhì)譜檢測(cè)器的豐富信息與高靈敏度使采用質(zhì)譜檢測(cè)器作為 HPLC檢測(cè)手段的液質(zhì)連用技術(shù)成為目前發(fā)展最迅速的分析手段之一。 ? 液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)是殘留分析理想的檢測(cè)手段。 ? 大部分農(nóng)藥可用 GCMS檢測(cè)，但對(duì)極性或熱不穩(wěn)定性太強(qiáng)的農(nóng)藥及其代謝物不適用（如滅菌丹、利谷隆、黃草消等），可采用高效液相色譜 質(zhì)譜法來(lái)檢測(cè)。 LCMS既發(fā)揮了色譜法的高分析能力，又發(fā)揮了質(zhì)譜法的高鑒別能力。這種技術(shù)適用于多組分混合物中未知組分的定性鑒定。 ? LCMS對(duì)簡(jiǎn)單的樣品可進(jìn)行分析前凈化并具有幾乎通用的多殘留分析能力，用于對(duì)初級(jí)檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品進(jìn)行在線確證，其優(yōu)勢(shì)明顯，但其儀器價(jià)格昂貴，液相色譜和質(zhì)譜技術(shù)尚不十分成熟。 ? 與經(jīng)典的色譜和質(zhì)譜法相比，免疫分析法（ IA）避免了上述缺點(diǎn)， IA中目前應(yīng)用較多的是 ELISA法，該法多采用多克隆抗體，交叉反應(yīng)率高，常用于多殘留的檢測(cè)，另外可以針對(duì)一類藥物的共同結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)抗原，然后得到針對(duì)該結(jié)構(gòu)的特異性抗體，以此抗體為基礎(chǔ)制作的試劑盒可以針對(duì)含有特征結(jié)構(gòu)的該藥物進(jìn)行特異性檢測(cè)。 ? 再多組分分析中，更簡(jiǎn)單的方法是采用混合型固定相SPE,可以使用混合鍵合相硅膠（通常具有疏水和離子交換兩種集團(tuán)），或?qū)煞N填料混合裝柱，分離機(jī)只取決于 pH和淋洗溶劑。該法操作簡(jiǎn)便，可以凈化很小體積的樣品，溶劑用量少、選擇性高、速度快、可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。不會(huì)發(fā)生乳化，凈化中引入的雜質(zhì)少，是很有前景的處理方法。 ? 建立藥物殘留分析技術(shù)是有效控制動(dòng)物性產(chǎn)品中藥物殘留的關(guān)鍵措施。因此，未來(lái)首先發(fā)展簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、靈敏和便攜化的篩選性多殘留分析