1 基因工程的基本概念 2 基因工程的誕生 3 基因工程的研究內(nèi)容 4 基因-文庫吧
2024-12-29 01:05 本頁面
【正文】 es） 1970年 . Smith等分離出第一種限制性核酸內(nèi)切酶。 Werner Arber 理論預見限制酶 Hamilton O. Smith 得到第一個限制酶 Daniel Nathans 用限制酶切得SV40 DNA片斷 2 ) DNA連接酶（ ligase） 1967年 5個實驗室?guī)缀跬瑫r發(fā)現(xiàn)了 DNA連接酶。 3 ) 載體（ vector） 1972年前后使用小分子量的細菌 質粒 和 ?噬菌體 作載體。在細菌細胞里的大量擴增。 4 ) 感受態(tài)體系 1970年 M. Mandel和 A. Higa發(fā)現(xiàn)經(jīng)過 氯化鈣處理的大腸桿菌容易吸收噬菌體 DNA。 1972年S. Cohen發(fā)現(xiàn)這種處理過的細菌同樣能吸收質粒 DNA。 5 ） 逆轉錄酶 1970年 Baltimore等人和 Temin等人同時各自發(fā)現(xiàn)了逆轉錄酶。 6 ） 瓊脂糖凝膠電泳 1960s發(fā)明了瓊脂糖凝膠電泳，可將不同長度的 DNA分離開。 7 ） DNA測序技術 1975年 F. Sanger、 A. Maxam和 W. Gilbert發(fā)明了 DNA快速測序技術。 C 基因工程的誕生 1 ） Berg的開創(chuàng)性實驗 1972年斯坦福大學的 Paul Berg小組完成了首次體外重組實驗： 將 SV40的 DNA片斷與 ?噬菌體的DNA片斷連接起來。 2 ） BoyerCohen實驗 1973年斯坦福大學的 S. Cohen小組將含有 卡那霉素抗性 基因的大腸桿菌 R65質粒與含有 四環(huán)素抗性 基因的另一種大腸桿菌質粒 pSC101連接成重組質粒，具有 雙重抗藥性 。 后來又把非洲爪蟾核糖體基因片斷同 pSC101質粒重組，轉化大腸桿菌，并在菌體內(nèi)成功轉錄出相應的 mRNA。這是第一次成功的基因克隆實驗。 BoyerCohen實驗 3 基因工程的研究內(nèi)容 1 ） 目的基因的獲取 從復雜的生物基因組中，經(jīng)過酶切消化或PCR擴增等步驟，分離出帶有 目的基因 的DNA片斷。 2 ） 重組體的制備 將目的基
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