基因診斷-文庫(kù)吧
2025-12-14 17:44 本頁(yè)面
【正文】 因診斷的對(duì)象 1. 病原生物的侵入，如肝炎、艾滋病、支原體、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)。 2. 先天遺傳性疾患， 如苯丙酮尿癥、無(wú)丙種球蛋白血癥。 3. 后天基因突變引起的疾病，如腫瘤。 4. 其它，如親子鑒定、個(gè)體識(shí)別、法醫(yī)物證。 與疾病相關(guān)的遺傳物質(zhì)改變主要有兩類， 1. 遺傳物質(zhì)，即 DNA或 RNA的水平的變化 。 如病毒感染時(shí)病毒基因及其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在人體內(nèi)的從無(wú)到有，某些腫瘤中癌基因表達(dá)水平的從低到高。 2. 遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化，即基因突變 。 如點(diǎn)突變引起的基因失活、染色體轉(zhuǎn)位引起的基因激活或滅活等等。 因此，從理論上說(shuō)，所有涉及基因結(jié)構(gòu)和功能變化的檢測(cè)都屬于基因診斷 。 基因診斷的內(nèi)容 常用基因診斷的技術(shù) 1. Hybridization 2. PCR 3. RFLP 4. AFLP 5. ASO 6. SSCP 每個(gè)人的 DNA是不完全相同的，一般每 100－ 500bp就有一個(gè)是不相同的，即多態(tài)性。在兩套基因組 DNA中平均有 1000萬(wàn)處不同，它們多位于內(nèi)含子序列中。堿基的變異就可能導(dǎo)致酶切點(diǎn)的消失或新的切點(diǎn)出現(xiàn)，當(dāng)使用同一限制酶切割不同個(gè)體基因組 DNA時(shí)， DNA片段長(zhǎng)度出現(xiàn)差異，這種由于內(nèi)切酶切點(diǎn)變化所導(dǎo)致的 DNA片段長(zhǎng)度的差異，稱為限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ restriction fragment length polymorphism, RFLP）。 RFLP反映了常見(jiàn)的個(gè)體間 DNA核苷酸的可遺傳性變異，它按照孟德?tīng)柗绞竭z傳。 RFLP可用 Southern印跡雜交法檢出。 1. RFLP (restriction fragment length polymorphism) 等位基因 2由于出現(xiàn)新的切點(diǎn)， DNA片段縮至 8kb。 DNA片段電泳后雜交圖 RFLP的檢出等位基因 1因有額外切點(diǎn)而導(dǎo)致產(chǎn)生兩個(gè)長(zhǎng)短不同的 DNA片段（ 3kb及 5kb）且均能與探針雜交 。 在人類基因組中還存在一類 DNA重復(fù)序列，稱為小衛(wèi)星 DNA。它們分布十分廣泛，每個(gè)重復(fù)單位通常只有幾－－幾十個(gè)堿基對(duì)，但其重復(fù)次數(shù)在人群中是高度變異的，又叫數(shù)目變異的串聯(lián)重復(fù)（ variable number tandem repeats,VNTR）。當(dāng)用限制酶切割 VNTR區(qū)時(shí)，只要酶切點(diǎn)不在重復(fù)區(qū)內(nèi)，就可能得到各種長(zhǎng)度不同的片段，可用于致病基因的連鎖分析。 串聯(lián)重復(fù)的短片段的長(zhǎng)度多態(tài)性可以通過(guò) P
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