atp生物熒光腫瘤體外藥敏檢測技術(shù)的建立及-文庫吧
2024-12-19 00:20 本頁面
【正文】 L, Tidefelt U急性非淋巴細(xì)胞白血病陽性預(yù)測值 ： 86%， 陰性預(yù)測值 ： 100%2023年 美國 O39。Meara AT, Sevin BU上皮性卵巢癌陽性預(yù)測值 ： 83%， 陰性預(yù)測值 ： %ATPTCA技術(shù)的臨床相關(guān)性研究結(jié)果ATPTCA與其它藥敏檢測方法的相關(guān)性ATPTCA技術(shù)與 DiSC法的相關(guān)性 ATPTCA技術(shù)與 MTT法的相關(guān)性1. 1998年年 德國德國 DCS公司將該技術(shù)產(chǎn)業(yè)化，并獲得國際公司將該技術(shù)產(chǎn)業(yè)化，并獲得國際 ISO質(zhì)量評質(zhì)量評估體系認(rèn)證，估體系認(rèn)證， 在歐洲和北美市場獲得準(zhǔn)入在歐洲和北美市場獲得準(zhǔn)入 。2. ，美國全國醫(yī)療保險協(xié)會年，美國全國醫(yī)療保險協(xié)會 (Health Maintenance Organization)認(rèn)為，該技術(shù)是一項精確和可靠的并能指導(dǎo)醫(yī)認(rèn)為，該技術(shù)是一項精確和可靠的并能指導(dǎo)醫(yī)生選擇用藥的生選擇用藥的 先進技術(shù)先進技術(shù) ，建議在全美進行醫(yī)療保險賠付。目，建議在全美進行醫(yī)療保險賠付。目前在加州等前在加州等 6個州已獲醫(yī)療保險賠付個州已獲醫(yī)療保險賠付 。3. 2023年日本厚生省和保險聯(lián)合會也認(rèn)為，該技術(shù)是一項年日本厚生省和保險聯(lián)合會也認(rèn)為，該技術(shù)是一項 先進的先進的臨床醫(yī)學(xué)項目臨床醫(yī)學(xué)項目 ，該技術(shù)指導(dǎo)的腫瘤化療較傳統(tǒng)的化療方案更，該技術(shù)指導(dǎo)的腫瘤化療較傳統(tǒng)的化療方案更能明顯提高胃腸道腫瘤的治愈率，建議該項技術(shù)在全國范圍能明顯提高胃腸道腫瘤的治愈率，建議該項技術(shù)在全國范圍內(nèi)獲得醫(yī)療保險賠付。內(nèi)獲得醫(yī)療保險賠付。 因此， ATPTCA技術(shù)是目前最先進的體外藥敏技術(shù)，該技術(shù)敏感，可靠，具有極大的臨床應(yīng)用價值第二部分 ATPTCA藥敏檢測技術(shù)及藥敏檢測技術(shù)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立l ATPTCA技術(shù)的核心試劑l 1. 熒光酶試劑l 熱穩(wěn)定性和發(fā)光效率均好的重組酶試劑保證檢測的敏感性和可l 靠性，滿足臨床實際工作的需要l 2. 培養(yǎng)基l 腫瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基支持腫瘤細(xì)胞生長增殖，促進正常細(xì)胞 死亡，從而保證藥敏檢測的腫瘤細(xì)胞特異性 下面我將就這兩個核心試劑的研發(fā)匯報我所做的一些工作● 熒光酶基因克隆、點突變、表達及純化 (2023,4－ 2023,10)● 腫瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基配方篩選及優(yōu)化 (2023,5－ 2023,12)● 檢測技術(shù)核心試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立 (2023,1－ 2023,3) 工作內(nèi)容及進展自熒火蟲體內(nèi)發(fā)光腺體提取熒光酶 mRNA逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA,PCR擴增，克隆 構(gòu)建重組質(zhì)粒 PET22bluc設(shè)計點突變引物，定點突變熒光酶第 245和215位氨基酸序列將含點突變 PET22bluc導(dǎo)入原核高效表達系統(tǒng)EcoliBL21篩選高表達株，高效穩(wěn)定表達重組熒光酶通過蛋白工作站，純化生產(chǎn)重組熒光酶制備凍干熒光酶制劑重組熒光酶研發(fā)路線熒光酶基因的克隆和鑒定PCR產(chǎn)物電泳圖 重組質(zhì)粒 PET22bluc鑒定圖野生型野生型 熒光酶基因編碼序列熒光酶基因編碼序列 (1653bp)M215： GC → AG Ala→Leu M245： C → G His→Gln atggaagacgccaaaaacataaagaaaggcccggcgccattctatcctctagaggatggaaccgctggagagcaactgcataaggctatgaagagatacgccctggttcctggaacaattgcttttacagatgcacatatcgaggtgaacatcacgtacgcggaatacttcgaaatgtccgttcggttggcagaagctatgaaacgatatgggctgaatacaaatcacagaatcgtcgtatgcagtgaaaactctcttcaattctttatgccggtgttgggcgcgttatttatcggagttgcagttgcgcccgcgaacgacatttataatgaacgtgaattgctcaacagtatgaacatttcgcagcctaccgtagtgtttgtttccaaaaaggggttgcaaaaaattttgaacgtgcaaaaaaaattaccaataatccagaaaattattatcatggattctaaaacggattaccagggatttcagtcgatgtacacgttcgtcacatctcatctacctcccggttttaatgaatacgattttgtaccagagtcctttgatcgtgacaaaacaattgcactgataatgaattcctctggatctactgggttacctaagggtgtggcccttccgcatagaactgc*ctgcgtcagattctcgcatgccagagatcctatttttggcaatcaaatcattccggatactgcgattttaagtgttgttccattccatcac*ggttttggaatgtttactacactcggatatttgatatgtggatttcgagtcgtcttaatgtatagatttgaagaagagctgtttttacgatcccttcaggattacaaaattcaaagtgcgttgctagtaccaaccctattttcattcttcgccaaaagcactctgattgacaaatacgatttatctaatttacacgaaattgcttctgggggcgcacctctttcgaaagaagtcggggaagcggttgcaaaacgcttccatcttccagggatacgacaaggatatgggctcactgagactacatcagctattctgattacacccgagggggatgataaaccgggcgcggtcggtaaagttgttccattttttgaagcgaaggttgtggatctggataccgggaaaacgctgggcgttaatcagagaggcgaattatgtgtcagaggacctatgattatgtccggttatgtaaacaatccggaagcgaccaacgccttgattgacaaggatggatggctacattctggagacatagcttactgggacgaagacgaacacttcttcatagttgaccgcttgaagtctttaattaaatacaaaggatatcaggtggcccccgctgaattggaatcgatattgttacaacaccccaacatcttcgacgcgggcgtggcaggtcttcccgacgatgacgccggtgaacttcccgccgccgttgttgttttggagcacggaaagacgatgacggaaaaagagatcgtggattacgtcgccagtcaagtaacaaccgcgaaaaagttgcgcggaggagttgtgtttgtggacgaagtaccgaaaggtcttaccggaaaactcgacgcaagaaaaatcagagagatcctcataaaggccaagaagggcggaaagtccaaattgtaa 熒光酶基因突變位點測序圖熒光酶基因突變位點測序圖G →C , 導(dǎo)致第 245位氨基酸置換 (His→Gln)測序單位：上海生工GC →AG, 導(dǎo)致第 215位氨基酸置換 (Ala→Leu) 熒光酶表達 電泳圖 純化后電泳圖熒光酶蛋白質(zhì) 電
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